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772
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货牛传染性鼻气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒(IBRV)优惠的品牌:百奥莱博,是优质的动物疫病PCR检测试剂盒产品,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多牛传染性鼻气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒(IBRV)等动物疫病PCR检测试剂盒产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京现货牛传染性鼻气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒(IBRV)优惠
编号:SYA494
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:48次/盒|96次/盒
等级:科研试剂
一、简介:
本试剂盒用一对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、原理
该试剂盒适用于检测气管分泌物试子、肺组织等样本中牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV),用于牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(40T/Kit)
组份 数量 规格
IBRV反应液(IBRV-qPCR MIX) 1管 800μl/管
核酸提取液(DNA Extraction) 2管 1.5ml/管
酶混合物(Enzymes Mix) 1管 40μl/管
阴性对照(NTC) 1管 250μl/管
IBRV阳性对照(IBRV-PTC) 1管 50μl/管
四、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列、MJ系列、Roche系列,博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
五、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为12个月。
六、样本采集、前处理与DNA提取
6.1 样本采集
病死或扑杀动物,无菌采集肺病变部位或病变/非病变部位交界处的样品;活动物灭菌棉试子沾取气管分泌物,放入无菌试管中。
6.2 样本前处理:
组织样本:每份组织分别从3个不同的位置称取样本约1g,手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入1.5ml生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至1.5ml灭菌离心管,8000rpm离心2min,取上清液100μl于1.5ml灭菌离心管。
6.3 DNA提取
6.3.1 对于上述处理好的样本加入等体积的核酸提取液(固体标本加入50μl核酸提取液),100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mlEP管,-20℃保存;
6.3.2 DNA的提取也可以采用商业化DNA提取试剂盒。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接去4μl加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的制备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(IBRV-qPCR MIN)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 20μl N×20μl
酶混合物 1μl N×1μl
总量 21μl N×21μl
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入21μl荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(IBRV-PTC)4μl,10000rpm瞬时离心10s。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
预变性 1循环 94℃ for 2 min
PCR扩增 40循环 94℃ for 15 sec
55℃ for 30 sec
在55℃延伸时收集荧光信号。报告基因:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判断
(1)阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(IBRV-PTC):均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3结果判定
(1)在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明IBRV核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明IBRV核酸阴性。
(3)如果Ct值>35,判为可以样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行IBRV qPCR检测。如果重复扩增曲线为为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明IBRV核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3)PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配制、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京现货牛传染性鼻气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒(IBRV)优惠极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·鼻疽伯克霍尔德菌/类鼻疽伯克霍尔德菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA136
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪流感抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA641
等级:科研实验专用
规格:192次/盒
·肺炎支原体单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA035
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·肠道病毒通用(EV-U)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA210
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·禽流感病毒N1亚型(AIV-N1)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA328
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
·诺如病毒G1/ G2分型双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA215
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·布鲁氏杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA115
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
本试剂盒适用于检测头部、乳腺、生殖器淋巴结、脾、怀孕后期或生产后早期的子宫、乳房组织、流产的胎儿组织、胎膜、阴道分泌物、精液、关节炎和水囊瘤液等样本中的布氏杆菌(BS),用于布氏杆菌(BS)感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
本试剂盒用一对布氏杆菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对布氏杆菌核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
试剂盒组成:
| 组份 | 数量 | 规格 |
| 布氏杆菌反应液(BS-qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| 布氏杆菌阳性对照(BS-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
储存条件:-20℃以下,有效期6个月。
使用方法:
一、样品采集:死亡或扑杀动物,取头部、乳腺、生殖器淋巴结、脾、怀孕后期或生产后早期的子宫、乳房组织、流产的胎儿组织、胎膜、阴道分泌物、精液、关节炎和水囊瘤液。
二、样品处理:
➤组织样品:每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g,手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入1.5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中;
➤阴道拭子样品、精液、关节炎和水囊瘤液直接取100μL于1.5mL灭菌离心管中。
三、DNA提取:
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入40uL核酸提取液,100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
四、检测步骤:
1.试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BS-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶液 | 1µL | N×1µL |
| 总量 | 15µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(BS-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
2.qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min | |
| 预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
| PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
五、结果分析:
1.结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2.试验成立判定
➤阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(BS-PTC):均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
3.结果判定
➤在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明BS核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明BS核酸阴性。
➤如果35<Ct值,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行BS qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明BS核酸阳性;否则判为样本阴性。
六、注意事项:
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待,按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京现货牛传染性鼻气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒(IBRV)优惠关键词:IBRV,SYA494,牛传染性鼻气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒(IBRV),百奥莱博
·高致病性禽流感H5N1病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA153
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·小肠结肠炎耶尔森菌/弯曲菌双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA099
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·沙门菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA058
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·轮状病毒B型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA198
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·弯曲菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA066
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·副溶血性弧菌TDH/TLH/TOXR/TRH四重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA110
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·人副流感病毒3型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA176
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·札如病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA203
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪链球菌病(PSS)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA443
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
·鸭源性成分单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA292
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对鸭源性成分特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用荧光PCR技术对鸭源性成分DNA进行体外扩增检测。本试剂盒中鸭源性成分的探针报告基团为FAM。
二、用途
该试剂盒适合于各种饲料及其它样品中鸭源性成分的检测。
三、试剂盒组成(48T)
组成成分 数量 规格
鸭物种荧光qPCR反应液(Duck-qPCR MIX) 1管 720μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(Duck-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Bio-Rad系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品采集与DNA提取
6.1 样品采集
样品的采集按照国家标准《饲料中牛羊源性成分的定性检测定性聚合酶链式反应(PCR)法》(GB/T 20190-2006)要求进行。
6.2 DNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Duck-qPCR MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Duck-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(Duck-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明鸭源性成分核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明鸭源性成分核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行鸭源性成分qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明鸭源性成分核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京现货牛传染性鼻气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒(IBRV)优惠关键词:IBRV,SYA494,牛传染性鼻气管炎病毒荧光PCR检测试剂盒(IBRV),百奥莱博
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