萤光素酶报告基因检测试剂盒(海肾)优惠促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括萤光素酶报告基因检测试剂盒(海肾)优惠促销在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：萤光素酶报告基因检测试剂盒(海肾)优惠促销
产地：国产|进口
英文名：Renilla Luciferase Reporter Gene Assay Kit
品牌：百奥莱博
规格：100次|1000次
本试剂盒是一种以肠腔素为底物来检测海肾萤光素酶，简称renilla luciferase活性的试剂盒。

海肾萤光素酶是一种分子量约为36kD的蛋白，在氧气存在的条件下，可以催化Coelenterazine氧化成Coelenteramide。在Coelenterazine氧化的过程中，会发出生物萤光。生物萤光可以通过化学发光仪或液闪测定仪进行测定。本试剂盒的检测原理参考下图。


海肾萤光素酶的检测原理图。

通过萤光素和萤光素酶这一生物发光体系，可以非常灵敏、高效地检测基因的表达。通常把感兴趣基因的转录调控元件或5’启动子区克隆在luciferase的上游，或把3’-UTR区克隆在luciferase的下游等，构建成报告基因质粒。然后转染细胞，用适当药物等处理细胞后裂解细胞，测定萤光素酶活性。通过萤光素酶活性的高低来判断药物处理等对目的基因的转录调控作用。海肾萤光素酶一方面常用作萤火虫萤光素酶报告基因检测的内参，以消除由于质粒的转染效率不同而带来的误差；另一方面海肾萤光素酶也可以和萤火虫萤光素酶一样被用于常规的报告基因检测。海肾萤光素酶催化Coelenterazine发光的最强发光波长为465nm。

注意事项：
1. 为取得最佳测定效果，在用单管的化学发光仪测定时，样品和测定试剂混合后到测定前的时间应尽量控制在相同时间内，例如30秒内；使用具有化学发光测定功能的多功能荧光酶标仪时，宜先把样品全部加好，然后统一加入海肾萤光素酶检测工作液。
2. 由于温度对酶反应有影响，所以测定时样品和试剂均需达到室温后再进行测定。
3. 样品和测定试剂混合后，必须等待1-2秒，再进行测定。测定时间通常为10秒，根据情况也可以测定更长或更短时间，但是同一批样品宜使用相同的测定时间。
4. 海肾萤光素酶检测底物(100×)配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发，有时会在初次使用时发现体积明显小于100μl的情况，此时用无水乙醇把体积补足至100μl，并混匀后即可使用。
5. 海肾萤光素酶检测工作液宜配制后立即使用。如不能立即使用，-20℃可以保存一周。随着保存时间的延长检测效果会不断下降，因此不可配制成工作液后长期保存。
6. 为避免由于质粒转染细胞时效率的差异而带来的误差，可以同时转入适当的萤火虫萤光素酶的报告基因质粒作为内参，采用百奥莱博的双萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT272)进行检测；也可以同时转入β-半乳糖苷酶报告基因质粒作为内参，然后采用百奥莱博的β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒(YT274)进行检测。采用本试剂盒中的报告基因细胞裂解液裂解获得的样品可以直接用于β-半乳糖苷酶报告基因检测试剂盒(YT274)的检测。

储存条件：-20℃，有效期一年。

萤光素酶报告基因检测试剂盒(海肾)优惠促销极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·PKC抑制剂(蛋白激酶C抑制剂)(Staurosporine)
编号：YT352
英文名称：Protein Kinase C Inhibitor
规格：0.1mg|0.5mg
本品是一种可以通透细胞膜的蛋白激酶C(PKC)抑制剂，IC50达到0.7nM。在浓度较高时(1-20nM)，可以抑制CDK1/cyclin B，CDK2/cyclin A，CDK4/cyclin D，CDK/p25，GSK-3β，PKA、PKG和CAMKII等蛋白激酶；在50-100nM，可以促进神经突起的生长；在0.2-1μM，可以诱导细胞凋亡。Staurosporine还可以抑制肿瘤细胞中VEGF的上调。

CAS：62996-74-1
分子式：C28H26N4O3
分子量：466.53
纯度：＞98%

储存条件：-20℃避光。

·CDK2抑制剂(PHA-793887)
编号：YT939
英文名称：CDK2 Inhibitor
规格：10mM×0.2ml|5mg|25mg
本品是一种新型有效的CDK2、CDK5和CDK7抑制剂，IC50分别为8nM、5nM和10nM，作用于CDK2、5和7比作用于CDK1、4和9选择性高6倍以上。

CAS：718630-59-2
分子式：C19H31N5O2
分子量：361.48
纯度：93.9%
结构式：


PHA-793887抑制许多肿瘤细胞系增殖，包括A2780、HCT-116、COLO-205、C-433、DU-145、A375、PC3、MCF-7和BX-PC3，IC50为88nM–3.4μM。PHA-793887作用于白血病细胞系包括K562、KU812、KCL22和TOM1时有细胞毒性，IC50为0.3–7μM，但是作用于正常未受刺激处理的外周血单核细胞或CD34+造血干细胞时没有细胞毒性。PHA-793887作用于白血病细胞系具有高活性，IC50< 0.1μM。PHA-793887诱导细胞周期停滞，抑制Rb和核磷蛋白*(代"磷")酸化，0.2-1μM时调节cyclin E和cdc6表达，5μM时诱导凋亡。

储存条件：-20℃，有效期12个月。


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·超氧化物阴离子荧光探针DHE
编号：YT301
英文名称：Dihydroethidium
规格：5mg
本品是最常用的检测细胞内超氧化物阴离子水平的荧光探针。Dihydroethidium可以溶解于DMSO，配制成适当的母液。

Dihydroethidium是一种最常用的超氧化物阴离子荧光检测探针。可以直接用于活细胞的标记。Dihydroethidium被活细胞摄入后，可以在细胞内的超氧化物阴离子作用下脱*，产生ethidium。Ethidium (例如*化乙锭)可以和RNA或DNA结合产生红色荧光。当细胞内的超氧化物阴离子水平较高时，产生的ethidium较多，红色荧光就较强，反之则较弱。这样就可以用dihydroethidium进行超氧化物阴离子水平的检测。

Dihydroethidium本身为蓝色荧光，最大激发波长为370nm，最大发射波长为420nm，脱*后和RNA或DNA结合产生红色荧光，最大激发波长为300nm，最大发射波长为610nm，实际观察时也可以使用535nm作为激发波长。

用于细胞内超氧化物阴离子检测时，Dihydroethidium的常用浓度为1-10μM。通常用含有0.5-5μM的Dihydroethidium的适当溶液和细胞一起在37℃孵育30分钟左右进行荧光探针装载，随后可以适当洗涤，接着可以直接用流式细胞仪或其它适当荧光检测仪器进行检测。

分子式：C21H21N3
分子量：315.41

注意事项：
1. Dihydroethidium易在空气中氧化，请尽量避免暴露于空气中。
2. Dihydroethidium脱*后产生毒性较高的ethidium，请注意防护。
3. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

储存条件：-20℃，有效期半年。

·Western一抗二抗清除剂(弱碱性)
编号：YT072
英文名称：Antibody Stripping buffer(Weakly alkaline)
规格：250ml
本品用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后，有时还需要检测tubulin、actin等表达量相对稳定的蛋白作为参照，或检测其它蛋白进行比较。通过使用一抗二抗去除液，充分去除一抗二抗，可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个SDS-PAGE胶相比，不仅省时省力，而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。

使用Western一抗二抗去除液多次重复使用同一张膜，会导致蛋白信号的减弱。但是，本Western一抗二抗去除液，经过多个抗体的检测试验，通常可以重复利用膜3-5次。使用本试剂只需大约20-30分钟即可实现蛋白膜的重复使用，然后可以进行封闭等后续的Western操作。

百奥莱博的不同的Western一抗二抗去除液主要在去除结合的一抗二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗二抗的结合，同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。

抗体清除剂选型表：

产品编号	YT071	YT072	YT073	YT074
产品名称	Western一抗二抗清除剂(强碱性)	Western一抗二抗清除剂(弱碱性)	Western一抗二抗清除剂(中性)	Western一抗二抗清除剂(酸性)
产品包装	250ml	250ml	250ml	250ml
pH	强碱性	弱碱性	中性	酸性
对于膜上蛋白的保留效果	好	好	好	好
对于一抗二抗的去除效果	好	好	好	好
去除一抗二抗所需时间	15-20分钟	20-30分钟	20-30分钟	40-80分钟
适用膜的类型	PVDF和NC	PVDF和NC	仅PVDF	PVDF和NC
腐蚀性	强	弱	无	弱

用于普通的Western检测时蛋白膜上一抗二抗的去除可以任选一种去除液。如果是NC膜，即硝酸纤维素膜时，不宜选用YT071N。从时间角度考虑，强碱性、弱碱性和中性的去除液所需的时间都比较短，可以优先考虑。从价格因素考虑，强碱性的去除液性价比最高。从安全性考虑，中性的去除液由于没有腐蚀性而表现出更高的安全性。弱碱性和弱酸性一抗二抗去除液的安全性次之。但只要正确操作，并进行适当防护，使用强碱性的一抗二抗去除液也是完全可行的。
　　对于特定的抗原和抗体，很难说哪一种Western一抗二抗去除液的效果最好。在遇到一抗二抗去除效果欠佳时，可以考虑适当延长一抗二抗去除液的孵育时间，同时确保孵育时的温度不低于20℃。温度过低时一抗二抗的去除效果会下降。同时也可以考虑尝试其它的一抗二抗去除液，以摸索出最佳的适合您实验条件的Western一抗二抗去除液。

注意事项：
1. 使用辣根过氧化物酶(HRP)，任何一次封闭(blocking)都应当使用5%脱脂牛奶，如果使用碱性磷酸酯酶，任何一次封闭都应当使用酪蛋白(casein)。
2. 为取得最佳效果，推荐使用PVDF膜。但硝酸纤维素膜也可以使用本Western一抗二抗去除液。
3. 使用化学发光试剂进行的Western检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的Western检测， 例如DAB，NBT/BCIP，不适用于本试剂。
4. 本Western一抗二抗去除液有轻微腐蚀性，使用时请注意防护。

储存条件：4℃，有效期一年。


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1-*磷酸*盐 Clearing factor lipase 2183-17-7

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