北京生物素标记HIF-1α凝胶迁移探针(0.2μM)现货供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京生物素标记HIF-1α凝胶迁移探针(0.2μM)现货供应在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京生物素标记HIF-1α凝胶迁移探针(0.2μM)现货供应
编号：YT225
规格：200μl
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：Biotin-labeled HIF-1α Probe For EMSA
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的并经生物素(Biotin)标记的HIF-1αconsensus oligonucleotide。这个生物素标记的双链寡核苷酸含有公认的HIF-1α结合位点，可以用作EMSA研究时的探针。一个包装的生物素标记探针可以进行约200-400个样品的EMSA检测。

HIF-1 α consensus oligo的序列如下：
5"-TCT GTA CGT GAC CAC ACT CAC CTC-3"
3"-AGA CAT GCA CTG GTG TGA GTG GAG-5"

本生物素标记EMSA探针已经过纯化，可以直接用于EMSA结合反应。本生物素标记EMSA探针可以和百奥莱博的化学发光法EMSA试剂盒(YT190)配套使用。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于基于生物素标记的EMSA检测的详细操作可以参考百奥莱博的化学发光法EMSA试剂盒(YT190)的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

除北京生物素标记HIF-1α凝胶迁移探针(0.2μM)现货供应外，我公司正在打折促销以下产品：

·末端脱氧核糖核酸转移酶(TdT酶)
编号：YT512
英文名称：Terminal Deoxynucleotidyl Transferase
规格：500U
本酶是一种模板依赖的DNA聚合酶，可以催化在寡核苷酸、单链或双链DNA的3"羟基端加上dNTP。可以催化的寡核苷酸的最短长度为3个核苷酸。

用途：寡核苷酸或DNA 3"羟基末端标记；DNA末端加尾(DNA tailing)；5"-RACE；合成同一种脱氧核苷酸的寡聚链等。
来源：由大肠杆菌表达，表达基因的来源为小牛胸腺。
活性定义：37℃60分钟内，催化1nmol dNTP加入到多聚核苷酸3"羟基末端中所需的酶量定义为1个活性单位。
酶活性检测条件：200mM potassiu*(代"m") cacodylate(pH7.2),1mM CoCl2,0.1mM DTT,0.01%(v/v)Triton X-100,10μM oligo(dT)10,1mM dTTP and 0.4MBq/ml[3H]-dTTP。
纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNase。
酶储存溶液：100mM KAc(pH6.8),2mM 2-mercaptoethanol,0.01%(v/v)Triton X-100 and 50%(v/v)glycerol 。
Reaction Buffer(5X)：0.125M Tris(pH7.2 at 25℃),1M potassiu*(代"m") cacodylate,0.05%(v/v)Triton X-100,5mM CoCl2。
失活或抑制：70℃加热10分钟或加入适量EDTA均可导致Terminal Deoxynucleotidyl Transferase失活。金属离子螯合剂，较高浓度的铵根离子、*离子、碘离子和磷酸根均对Terminal Deoxynucleotidyl Transferase有抑制作用。
储存条件：-20℃。

使用说明：

1. DNA 3’末端标记：
a. 参考如下表格设置反应体系：
待标记DNA————————————————————10 pmol of 3"-termini
Reaction Buffer (5X) ——————————————10µl
[α-32P]-ddATP, ~10TBq/mmol (3000Ci/mmol)————1.85 MBq (50µCi)
TdT (20U/µl) ——————————————————2µl
补充无核酸酶的去离子水 —————————————至50µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育15分钟。
d. 70℃孵育15分钟或加入5µl 0.5M EDTA终止反应。
说明：标记的效率和3’羟基末端的类型有关，3’突出末端的标记效率要显著高于3’缩进末端或平末端的标记效率。

2. DNA末端加尾(DNA Tailing)：
a. 参考下表格设置反应体系：
DNA片段 ————————————————————1 pmol of 3"-termini
Reaction Buffer (5X)——————————————4µl
dATP or dTTP——————————————————130pmol
或 dGTP or dCTP (四种中通常只需加入一种)————60pmol
TdT (20U/µl)——————————————————1.5µl
补充无核酸酶的去离子水—————————————至20µl
b. 按上表设置好反应体系后，轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用 Vortex在最低速度轻轻混匀)，随后离心沉淀液体。
c. 37℃孵育15分钟。
d. 70℃孵育15分钟或加入5µl 0.5M EDTA终止反应。
说明：在上述反应条件下，每个3’羟基末端可以加上100-130个dA或dT，或20-30个dC或dG。

3. 其他用途可以参考上述用途或适当的文献资料进行。


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·超灵敏ECL化学发光试剂盒
编号：YT061
英文名称：Ultra sensitive ECL chemiluminescence Kit
规格：共100ml
本Western萤光检测试剂是一种特超敏ECL化学发光试剂盒，发光效果显著优于YT060高灵敏ECL化学发光试剂盒，可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶发生化学反应，发出萤光，从而可以通过用X光片压片或其它适当萤光成像设备检测样品。

本试剂盒灵敏度极高，比DAB显色的灵敏度至少高1000倍，比原Pierce公司(现Thermo公司)的SuperSignal West Pico Substrate的灵敏度高10倍以上，实际检测效果与原Pierce公司的SuperSignal West Dura和SuperSignal West Femto的检测灵敏度相近。对于辣根过氧化物酶的最低检测灵敏度可以达到飞克级，500飞克辣根过氧化物酶用本试剂盒检测并用化学发光仪进行发光强度的定量检测时，信噪比大于5。

本试剂盒系统发光时间更长。在10微升1-10纳克/微升辣根过氧化物酶标记IgG中，加入100微升本试剂盒工作液后在不同时间点通过化学发光仪检测化学发光。检测数据显示20分钟后发光无明显减弱， 60分钟后发光强度减弱至初始发光强度的约85%左右，120分钟后发光强度减弱至初始发光强度的约70%左右。


检测不同剂量HRP-IgG，20分钟后发光效果几乎不变，120分钟后发光效果仍然良好。

本试剂盒系统的高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量。同时必须注意适当减少一抗和二抗或样品的用量，以免获得过深的难以比较灰度的条带。本试剂盒系统稳定性较好，37℃水浴孵育30天，和4℃保存的试剂相比，对相同样品的检测效果无任何明显差异。此外本试剂盒系统背景很低，对PVDF膜和硝酸纤维素膜均适用。

储存条件：4℃避光，有效期一年。


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·磷酸化p44/42 MAPK抗体
编号：YT821
英文名称：anti-Phospho-p44/42 MAPK antibody
规格：>20次
本抗体是用经过适当修饰的含有磷酸化Thr202/Tyr204的一段human MAPK多肽为抗原制备而成的抗Phospho-p44/42 MAPK(Thr202/Tyr204)小鼠单克隆抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

本Phospho-p44/42 MAPK抗体不识别磷酸化或非磷酸化的SAPK/JNK，也不识别磷酸化或非磷酸化的p38 MAP kinase。

本抗体识别Thr202和Tyr204同时被磷酸化的p44/42 MAPK，常用于检测p44/42 MAPK的激活。

p44和p42 MAP kinase(即erk1和erk2)在调节细胞的生长、分化等过程中起重要作用。p44和p42 MAP kinase可以被生长因子、神经营养因子、细胞因子、激素、神经递质等多种细胞外信号激活。p44和p42 MAP kinase的激活依赖于MAP kinase
kinase(MEK)对Thr202和Tyr204的磷酸化。上述*基酸残基的位置为相对应于human MAP kinase的*基酸位置。

产品组份：
Phospho-p44/42 MAPK抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

抗体参数：

免疫原物种：人
免疫原：含有磷酸化Thr202/Tyr204的一段人MAPK多肽
克隆性：单克隆
宿主：小鼠
用途：WB,IP,IF,FCM
交叉反应性：人，大鼠，小鼠，仓鼠，斑马鱼
同种型：IgG1
p44/42 MAPK分子量：44/42kD
推荐稀释比例：WB(1:1000),IP(1:250),IF(1:100),FCM(1:500)


注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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