EMSA突变探针-AP1(1.75μM)现货价格

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EMSA突变探针-AP1(1.75μM)现货价格
品牌：百奥莱博
编号：YT196
规格：60μl
产地：国产|进口

EMSA突变探针－AP1是用于EMSA(也称gel shift)研究的AP1 consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－AP1的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。
EMSA突变探针－AP1的序列如下：
5’-CGC TTG ATG ACT TGG CCG GAA-3’
3’-GCG AAC TAC TGA ACC GGC CTT-5’
EMSA突变探针－AP1中AP1的公认的结合位点发生了突变，从而使AP1无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和AP1的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和AP1的结合的条带不会被抑制。
1,阴性对照反应(标记探针)；2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。
一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。
保存条件：
-20℃保存，一年有效。
注意事项：
避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。

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EMSA突变探针-AP1(1.75μM)现货价格关键词：EMSA突变探针-AP1,YT196,1.75μM
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·台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒
编号：YT123
英文名称：Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit
规格：100次

台盼蓝染色细胞存活率检测试剂盒，是利用正常的健康细胞能够排斥台盼蓝，而丧失细胞膜完整性的细胞可以被台盼蓝染色研制而成。严格来说，台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性，通常认为细胞膜丧失完整性，即可认为细胞已经死亡。
台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成，并且操作非常简单。
本试剂盒足够检测100个细胞样品。
保存条件：
4℃保存，一年有效。
注意事项：
本试剂盒提供的两种溶液都是无菌的，使用时最好在超净台内进行，避免细菌污染。
台盼蓝对人体有毒，请注意小心防护。

使用说明：
1. 收集细胞：
对于贴壁细胞先用胰酶和/或EDTA消化下细胞。对于悬浮细胞，则可以直接收集细胞。把收集的细胞在1000-2000g离心1分钟，弃上清，用1毫升或根据细胞的量用适当细胞重悬液重新悬起细胞。
2. 台盼蓝染色：
吸取100微升重悬的细胞到一塑料离心管内，加入100微升台盼蓝染色液(2X)，轻轻混匀，染色3分钟(染色3分钟时间已经足够，但染色时间可以更长一些，但不宜超过10分钟)。
3. 计数：
吸取少量经过染色的细胞，用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量，每个细胞样品至少数500个细胞，数出蓝色细胞和细胞总数。
细胞存活率＝(细胞总数－蓝色细胞数)/细胞总数X100%

·Western及IP细胞裂解液
编号：YT038
英文名称：Cell lysis buffer for Western and IP
规格：100ml

Western及IP细胞裂解液，是一种在非变性条件下裂解细胞的裂解液。本细胞裂解液裂解的细胞，可以用于PAGE，Western，免疫沉淀(immunol precipitation，IP)和免疫共沉淀(co-IP)。
Western及IP细胞裂解液的主要成分为20mM Tris(pH7.5)，150mM NaCl，1% Triton X-100，以及sodium pyrophosphate，β-glycerophosphate，EDTA，Na3VO4，leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用。
用Western及IP细胞裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用我公司生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
保存条件：
-20℃保存，一年有效。
注意事项：
为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
需自备PMSF。PMSF可以向我公司订购。
裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
选择合适的裂解液；另一方面也需要通过一些预实验来摸索最佳的适合您实验条件的裂解液。

对于组织样品：
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解Western及IP细胞裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3. 按照每20毫克组织加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

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