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642
- 英文名:
Inorganic Pyrophosphatase(yeast)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
BTN130658型无机焦磷酸酶(PPase)(酵母)北京厂家由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多无机焦磷酸酶(PPase)(酵母)等工具酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:BTN130658型无机焦磷酸酶(PPase)(酵母)北京厂家
英文名:Inorganic Pyrophosphatase(yeast)
规格:10U
编号:BTN130658
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
无机焦磷酸酶催化无机焦磷酸盐水解生成正磷*(代"酸")盐,转录过程中可提高RNA的产量,其反应原理如下:

产品组成:
| 组份 | 规格 |
| 无机焦磷酸酶(100U/mL) | 100μL |
| 10×Buffer | 1mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指标准反应条件下,[0.5ml反应体系中,100mM Tricine(pH7.2),2mM MgCl2和2mM PPi,于25℃反应10分钟]每分钟催化从无机焦磷酸盐生成1μmol磷酸盐的酶量。
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·GpC甲基转移酶(M.CviPI)
编号:BTN130653
英文名称:GpC Methyltranferase(M.CviPI)
规格:200U
该GpC甲基转移酶(M.CviPI)能将双链二核苷酸识别序列中所有胞嘧啶残基(C5)甲基化。
产品特点:
1.阻止限制性内切酶的切割;
2.改变DNA的物理特性;
3.对DNA统一进行[3H]标记。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1酶活单位定义为在 20μl反应体系中,37℃条件下,1小时能保护1μg λDNA不被HaeIII限制性核酸内切酶切割所需要的酶量。
热失活:65℃ 20分钟。
备注:
胞嘧啶残基被甲基化后,可影响DNA的物理特性,如:降低Z-DNA形成的自由能,增加DNA的螺旋程度,改变DNA十字形突出的动力学特性。由于在化学测序过程中联*的反应性降低,5-甲基胞嘧啶的位置易于确定下来。
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·蛋白酶K溶液
编号:BTN80911
英文名称:Proteinase K Solution
规格:5mL
本产品是浓度为10mg/mL的蛋白酶K溶液,可以直接加入到各种溶液中降解其中的蛋白质。可以用于核酸纯化、原位杂交、DNA脉冲电泳和蛋白指纹图谱分析等实验。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·Levaditi硝酸*(代"银")法螺旋体染色试剂盒
编号:BTN160655
英文名称:Spirochaeta Staining Kit(Levaditi silver nitrate method)
规格:3×50ml
本产品是利用螺旋体具有的嗜银性,在一定条件下螺旋体可从银液中吸附银离子,经还原液处理后,螺旋体内吸附的银离子被还原为黑色的金属银而显色。该染色液主要用于显示梅毒螺旋体,亦可显示钩端螺旋体,但较少显示热回归螺旋体,对肝脏梅毒树胶肿和肝脏钩端螺旋体具有鉴别作用。
螺旋体是一类细长、弯曲呈螺旋状、运动活波的原核细胞型微生物,具有细菌的基本结构,细胞壁有脂多糖和壁酸。螺旋体分为密螺旋体(如梅毒螺旋体)、疏螺旋体(如回归热螺旋体)、钩端螺旋体等。梅毒螺旋体有8~12均匀的螺旋,两端尖直;钩端螺旋体细长,数目较多而且细密,一端或两端弯曲呈钩状,菌体亦常屈曲呈C形或S形。梅毒螺旋体和钩端螺旋体可用镀银法进行显色,如Levaditi法、Warthin-Starry法。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 2×50ml |
| 溶液B1 | 25ml |
| 溶液B2 | 25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,4℃避光保存,其中溶液B1、B2室温避光保存,有效期3个月。
使用方法:(以下步骤仅供参考)
1.临用前,将溶液B1与溶液B2 按照1:1 比例混合成溶液B,即用即配。
2.组织切片厚度1~2mm 为佳,置于10%福尔马林中固定2~4天。
3.流水冲洗过夜。
4.95%乙醇浸泡24h。
5.蒸馏水浸洗并不停摇动,直至组织下沉为止。
6.更换新的蒸馏水浸洗10min。
7.入溶液A,加盖置于37℃恒温箱孵育1 天,更换新的溶液A,继续37℃恒温箱孵育2天。
8.蒸馏水浸洗3次,每次10min。
9.入配制好的溶液B,加盖室温避光孵育2 天。
10.蒸馏水浸洗3次,每次2min。
11.常规脱水透明,浸蜡包埋。
12.切片厚度6~8μm,贴片,烤干。
13.二甲*脱蜡2次,中性树胶封固。
染色结果:
| 梅毒螺旋体、钩端螺旋体 | 黑色或棕黑色 |
| 背景 | 淡黄至棕黄色 |
注意事项:
1.实验所用器皿需用硫*(代"酸")洗液浸泡,洗干净。
2.步骤5、6的洗片步骤很有必要,一定要把组织中的甲醛和乙醇彻底清除,否则易导致组织内银盐的沉淀。
3.某些细菌和真菌菌丝也会被该染液染成黑色,应注意螺线体为螺旋状形态,并加以鉴别。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验试剂 1M LiCl 50% PEG3350 (氯化锂转化法只能PEG3350,不能用PEG8000,PEG3350在北京莱博生物有售,80元/100克) 2mg/ml salmon sperm DNA / TE(10mM Tris-Cl, pH8.0, 1.0mM EDTA)-20℃保存 注:醋酸锂对毕氏酵母无效,对酿酒酵母有效,仅氯化锂有效;PEG3350可屏蔽高浓度LiCl的毒害作用。 感受态毕氏酵母的制备 1. 接种
试验的注意事项1、信号肽识别位点的设计以质粒pPICZαA为例。在利用PCR反应在外源基因两端引入酶切位点的试验中。如果质粒pPICZαA双酶切中丢失了KEX2蛋白酶的酶切位点Lys-Arg,应该在上游中,增加了编码Lys、Arg的密码子AAA、AGA 。酵母细胞膜中中的KEX2蛋白酶是α-factor信号肽的切割酶,它能有效识别酶切位点Lys-Arg,通过对信号肽的切割使基因表达产物释放至胞外。2、PCR产物酶切保护碱基的设计利用PCR转换酶切位点,通过P3、P4两引物的扩增在rhEGF
开始做酵母双杂交了,计划用一个膜蛋白去筛库,已经做好了工作量大,而预期结果要靠点小运气的心理准备,面前真是一条很长的路要走! 在丁香园学习了很久,希望能将我这次试验过程中遇到的困难和思索记录下来,跟大家一同讨论,共同学习。 今天先说说实验之前的试剂准备,为了保证实验能顺利进行,我选择了clontech的matchmaker gold系统,订购了人脑cDNA文库(标准化的),还有培养基也是订的商品化的,再有一个提酵母质粒的KIT 1,GOLD系统式对系统3的升级版,替换了一个报告
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