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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
732
- 英文名:
Fecal RNA column Extraction Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")粪便RNA柱式提取试剂盒厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:粪便RNA柱式提取试剂盒厂家
编号:BTN101109
规格:50次
英文名:Fecal RNA column Extraction Kit
品牌:百奥莱博
产地:北京
由于粪便中有机质含量丰富,对RT-PCR等后续反应有极大的抑制作用,所以从粪便中提取高纯度的RNA一直是十分棘手的问题。本产品是在粪便RNA提取试剂盒基础上开发的柱式粪便RNA提取产品。
试剂盒特点:
1. 操作比非柱式法更加简单快速,处理一个样品只需要约十几分钟。
2. 去污染效果好,RNA 纯度更高,平均OD260/280一般都在2.0左右。
3. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
4. 性价比高于进口的柱式粪便RNA提取产品。
5. 试剂无毒无害,环保。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 酸洗玻璃珠,400μm | 25g |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,有效期两年。
使用方法:
1.在自备的3-5mL离心管中称取0.5-1 g 粪便,加入0.5g 玻璃珠和1mL溶液A,盖紧离心盖后震荡器上剧烈震荡5-10分钟。注意:如果放置在低温,溶液A可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
2. 稍微静置后将上清液(一般呈棕色)转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中。所取上清液不要超过1mL,否则后续操作没有足够空间。
3.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备*仿,在振荡器上振荡30秒混匀。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
4.室温12000rpm离心3~5分钟。
5. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质,避免触及或吸取。最好留下100μl上清液不取。
6.在上清液中加入等体积的溶液C,用手上下颠倒或振荡器振荡30秒混匀,此时溶液呈均匀的乳浊状。
7.室温12000rpm离心3分钟,两相间将有白色膜状物(蛋白质)形成。
8. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中,套入收集管中厚12000rpm室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
9. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,套入收集管中后12000rpm室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
10. 加0.7mL 通用洗柱液,套入收集管中后室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
11. 加0.3mL 通用洗柱液,套入收集管中后室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。此步可以省略。
12. 将离心吸附柱套入收集管中后室温离心半分钟,弃含穿透液的收集管。此步干甩十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
13. 将离心吸附柱套入到一个自备的RNase-free 收集管中,加入30-100μL RNA洗脱液,室温放置1-2分钟。
14. 12000rpm室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
16. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
17. RNA 纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
欲了解更多粪便RNA柱式提取试剂盒厂家的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·Flemming固定液
编号:BTN140410
英文名称:Flemming Fixative Solution
规格:250mL
本产品为铬酸-锇酸-醋酸混合固定液,现配现用。该固定液对脂肪组织既有固定作用,又有染色作用,对有髓神经纤维也有固定兼染髓鞘的作用。该液不适合做HE的染色。应用该液固定的组织,切片不能太大过厚,一般1-2毫米。固定时间1-3天,后经水洗,保存于80%酒精中。可用于各种植物组织的固定。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·柱式真菌DNA大量提取试剂盒(玻璃珠法)
编号:BTN80926
英文名称:Fungus DNA Column large-scale extraction kit(Glass bead method)
规格:4次
本试剂盒在柱式真菌DNA提取试剂盒(BTN70901)基础上改良而得大提升级产品,主要用于大量快速从各种真菌材料中提取基因组DNA。
产品特点:
1.处理量大,一次可以处理1-3g 各种真菌组织。
2. 纯度高,OD260/280一般在1.8以上。不含污染和抑制剂,得到的DNA可以不经稀释直接用于酶切、PCR、real-timePCR、multiplex PCR、RAPD、RELP、AFLP、Southern Blotting,microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验。
3. 采用玻璃珠法破碎细胞,属于物理方法,远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好,也不容易带入外援真菌DNA。
4.产率一般在10-100μg/g真菌样品。离心吸附柱最大吸附量为800μg。
5. DNA片段长度一般在20-40kb左右。
6.适用范围广,适用于度大多数真菌材料,包括酵母(S.cerevisiae、S.pomb、Pichia pastoris)等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 40ml |
| 溶液B | 40ml |
| 溶液C | 100ml |
| 大提离心吸附柱 | 4套 |
| 通用洗柱液 | 200ml |
| DNA洗脱液2.0 | 5ml |
| 酸洗玻璃珠,400μm | 40g |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 对菌液:取60-100mL 过夜培养的真菌菌液(OD600一般在1以上)到干净的塑料离心管中,12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
2. 对菌落:用接种针在在培养基上刮取尽可能多的真菌菌落(约1 g),转移到装有20mL 无菌水的干净的塑料离心管中,洗涤下接种环上的菌体。12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
3. 对孢子材料,一般取1-3g左右,直接加入到离心管中,在材料中加入无菌水20mL,振荡半分钟后12000rpm离心2分钟弃上清留沉淀。
4.沉淀中加入10mL溶液A和10 克的玻璃珠,涡旋震荡10分钟,可以延长震荡时间。
5. 加入10mL的溶液B,涡旋震荡5分钟,12000rpm离心2分钟,将上清液全部转移到一个50mL的干净的塑料离心管中。
6.在上清中加入3倍体积的溶液C,颠倒数次混匀后,分三次上离心吸附柱,每次上柱后均先室温放置2分钟,然后12000rpm离心1分钟,倒掉穿透液,再第二次上柱,重复上面的操作,直到挂柱步骤完成。
7. 将20mL 通用洗柱液加入离心柱,12000rpm离心1分钟,弃穿透液。
8. 重复上步操作一次。
9. 12000rpm 空甩1分钟去除残留液体。
10. 将离心柱放置在一新的50mL塑料离心管中,加入500μL DNA 洗脱液2.0。
11.室温放置5分钟后12000rpm离心1分钟,管底即为真菌DNA样品,吸取离心管中的DNA溶液重新滴加在吸附柱上,离心洗脱以收集更多的DNA。
12. 所得DNA可立即使用,也可长期保存在-20℃。
13. 注:如离心机转速不能达到12000rpm,可以用最大转速离心10-15min 代替12000rpm离心1-2min。
粪便RNA柱式提取试剂盒厂家关键词:BTN101109,粪便RNA柱式提取试剂盒,Fecal RNA column Extraction Kit
ALH111 小量全血基因组DNA提取试剂盒(0.3ml) Whole blood genomic DNA extraction kit
YT449 ISRE荧光素酶报告基因质粒(干扰素激活反应元件) ISRE-luc Reporter gene plasmid
BTN100912A 长效期SDS-PAGE电泳液(>30 KD)(干粉) Stable SDS-PAGE Running Buffer
HR0185 膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用) Membrane protein extraction kit (2D electrophoresis)
SV1106 尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG) Uracil -DNA glycosylase (UDG)
YT087 免疫染色封闭液 Immunol Staining Blocking Buffer
BTN130997 Sephadex G50介质 Sephadex G50
SY0405 3ml重力层析空柱 Gravity Chromatography Columns
SV0240 BssKI限制性内切酶 BssKI Restriction Endonuclease
KFS367 酸性磷酸酶测试盒(ACP)
SY0615 重组人BMP-4 Recombinant Human BMP-4
SY0046 dNTP混合溶液(2.5 mM each) dNTP Mix (2.5 mM each)
BTN131027 胃蛋白酶 Pepsin
粪便RNA柱式提取试剂盒厂家关键词:BTN101109,粪便RNA柱式提取试剂盒,Fecal RNA column Extraction Kit
·PCR级绿如蓝DNA染料
编号:BTN70909
英文名称:DNAgreen, PCR Grade
规格:0.1mL
第二代的非饱和型荧光染料(如SYBR Green I)在高浓度下会抑制荧光PCR,所以反应重复性很不稳定,并且不能用于要求严格的Tm分析。本产品跟SYTO9、LC Green、EvaGreen一样,是第三代饱和型荧光染料,在饱和浓度下也不抑制荧光PCR反应。
产品特点:
1. 饱和浓度不抑制PCR反应,因此得到的荧光信号更强。
2. 抗水解、抗热解和抗光解的能力强于目前最常用的SYBR Green I。
3. 饱和浓度下染料分子没有机会在DNA分子间发生移位,因此荧光强度跟DNA变性程度呈线性关系,可以用于精细的Tm 测定实验,如High-resolution melting curve analysis等。
4.跟目前常用的PCR 仪器(包括iCycler、LightCycler、ABI 测序仪)兼容。激发和发射光谱跟FAM和SYBR Green I 接近,可以使用SYBR Green I的光学设置参数。
5. 不能渗透进入细胞内,毒性和致突变性远低于SYBR Green I。
6.可以用于qPCR、高分辨DNA 溶解曲线分析(HRM、high-resolution DNA melt curve analysis)、毛细管电泳等研究。
储存条件:常温运输、-20℃避光保存,有效期一年。
使用方法:
先将本产品放置在室温融化,然后震荡10秒钟,短暂离心后待用。下面以50μL的标准PCR反应体系为例说明其使用:
1.在一干净的PCR 管中,加入下列成分:
| 试剂 | 加入量 |
| 10×PCR Buffer(No Mg2+) | 5μl |
| MgCl2 50mM | 2.5μl |
| dNTP 10mM | 1μl |
| 本产品(PCR级绿如蓝染料) | 2.5μl |
| Taq DNA聚合酶 | 1-5U |
| DNA模板 | 适量 |
| PCR引物 | 5-50 pmol each |
| 补水到 | 50μl |
2. 放入荧光PCR 仪中进行qPCR,并在退火或延长反应时记录荧光信号。使用的光学参数可以跟FAM或SYBR Green I 完全一样。
注意事项:
1. 如果使用iCycler,可以不加FAM;如果使用ABI系统,需要在Well Inspector选项下的非特异参照中选择“无”;使用LightCycler时,最好在PCR 体系中再加入终浓度为0.5mg/mL的BSA以降低仪器对染料和模板的非特异吸附。
2. 如果使用化学修饰过的Taq DNA聚合酶,可能需要减低KCl的浓度并提高Tris的浓度。
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