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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
804
- 英文名:
DNA ladder(200-5000bp)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输、-20℃保存
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应DNA marker(200-5000bp)价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:DNA marker(200-5000bp)价格
编号:BTN70503S
英文名:DNA ladder(200-5000bp)
产地:国产|进口
本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5μL。
使用效果:

注:1500bp条带为20ng/uL,其余每条带为10ng/uL
疑难解答:
a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀,亮度相当,但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色,加大EB浓度等方法解决。
更多有关DNA marker(200-5000bp)价格的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·核酸外切酶T
编号:BTN130627
英文名称:Exonulease T
规格:250U
核酸外切酶T(Exo T)又称核糖核酸酶T(RNase T),沿 3´→5´方向特异性作用于单链RNA或DNA的3´突出末端。核酸外切酶T作用于3´突出末端,产生RNA或DNA分子的平末端。
产品特点:
➤特异地作用于单链DNA或RNA;
➤ 使DNA或RNA的3´突出端变为平齐末端;
➤ 无核酸内切酶和外切酶污染。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 核酸外切酶(5000U/mL) | 50μL |
| 10×Buffer | 1ml |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期半年。
热失活:65℃ 加热 20分钟。
活性定义:1单位指 100μl反应体系中,25℃条件下,30分钟从1nmol[³H]-标记的多聚胸腺嘧啶生成0.1nmol TCA可溶性DNA所需要的酶量。
·Ribo-SPIA cDNA扩增试剂盒
编号:BTN131083
英文名称:Ribo-SPIA RNA Amplification Kit
规格:20次
血液样品和各种临床样品(包括组织检查、FFPE切片或少量细胞样品)都是基因表达分析和诊断的常见材料,但这些样品通常数量有限,质量不高,还没法进行第二次取样。所以得到足够RNA量供后续试验是一个非常棘手的瓶颈。为解决这一问题,本公司根据Ribo-SPIA技术,开发了本产品。Ribo-SPIA技术的核心是利用DNA/RNA嵌合引物,以带polyA尾巴的mRNA为模板进行逆转录并得到双链cDNA、RNase H不间断地在cDNA第1链中的RNA部分产生裂口,DNA聚合酶以此裂口为基础进行链取代聚合反应,产生cDNA单链。
产品特点:
1.高效,能线性扩增1000-10000倍,能用5-100 ng总RNA模板扩增得到5μg左右的单链cDNA(扩增的cDNA主要来源于总RNA中的mRNA)。
2. 步骤简单方便,扩增在恒温进行,只需要4个小时,不需要特殊仪器设备。
3. 保真性好,保持RNA样品中各分子的相对丰度。
4. 尤其适用于RNA产量和质量都不高的样品。
5.扩增得到的单链cDNA能直接用于各种后续试验,包括qPCR、芯片分析、杂交反应等。
6. 本产品足够做10次双链cDNA的合成,20次SPIA扩增。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| cDNA一链合成缓冲液 | 40μl |
| MMLV逆转录酶 | 10μl |
| cDNA二链合成缓冲液,5× | 160μl |
| cDNA二链合成酶混合液20× | 40μl |
| SPIA RT引物 | 40μl |
| SPIA反应液,5× | 320μl |
| SPIA扩增引物 | 320μl |
| SPIA酶混合液 | 120μl |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期为1年。
使用方法:
一:样品RNA的制备
本产品不含RNA相关试剂,用于Ribo-SPIA扩增的每个批次的RNA样品最好先做一个预实验。总RNA样品的浓度必须在1-20ng/μL,一次RIBO-SPIA所需总RNA的量为1ug。也可以使用mRNA,一次Ribo-SPIA所需总mRNA的量为5-100 ng。过低则需要浓缩,过高则需要用无RNase的水稀释。RNA必须经过DNase处理,不能含DNA污染。微量提取时不能使用核酸类的助沉剂。注意:本产品只能扩增含带polyA尾巴的RNA,不能扩增DNA和不含polyA尾巴的RNA。
二:一管式双链cDNA的合成
1.在0.5mL PCR管中,按下表配制双链cDNA合成反应。
注意:最好每次实验设置一个阴性对照组,在此对照中用超纯水替代自备的mRNA或总RNA:
| 成分 | 用量 |
| 自备mRNA或总RNA | 4μL mRNA(5-100ng)或4μL总RNA(1ug) |
| SPIA RT引物MTA3 20uM | 1μl |
| 65℃,5分钟后室温放置2分钟,短暂离心后放4℃ | |
| cDNA一链合成缓冲液 | 4μl |
| MMLV逆转录酶 | 1μl |
| 轻柔吹打混匀后得到10μL的反应体系。42℃保温90分钟合成第一链cDNA。结束后70℃保温15分使酶变性,最后4℃放置,然后加入下列成分,得到80μL反应体系。 | |
| 超纯水 | 50μl |
| cDNA二链合成缓冲液 | 16μl |
| cDNA二链合成酶混合液 | 4μl |
| 轻柔吹打混匀后,短暂离心,16℃保温2小时合成cDNA第二链,然后75℃ 15分灭活酶,最后4℃放置待用 | |
三:SPIA扩增
2.在0.5mL PCR管中,按下表配制20μL的SPIA反应体系。注意:最好设置两个阴性对照组,在此两个对照中分别用超纯水替代SPIA引物和cDNA双链反应液。
| 成分 | 用量 |
| cDNA双链反应产物 | 40μL(来于上步) |
| SPIA扩增引物10uM | 16μl |
| SPIA反应液,5× | 16μl |
| 超纯水 | 42μl |
| 94℃20秒后50℃放置复性待用 | |
| SPIA酶混合液 | 6μl |
| 轻柔吹打混匀后得到120μL反应体系,50℃扩增60分钟,最后4℃放置 | |
四:SPIA扩增产物的检测
3. 取5μL SPIA扩增产物进行PAGE电泳检测。标准的反应结果是产生长度在200-2000bp之间的产物。
4. 如果产物将用于PCR定量,则可以不经过纯化直接使用,如果需要用于芯片杂交和浓度测定,则需要按常规的方法纯化cDNA以便去除残留的dNTP和引物。
5. OD检测纯度和浓度。在OD260的波长下测样品你给的光吸收。由于扩增产物是单链DNA,故1OD260=33ug/mL。
6. 所得DNA可以放-20℃长期放置。
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·RNase H
编号:BTN120413
英文名称:Ribonuclease H
规格:600U
RNase H是特异性分解RNA-DNA杂交体中的RNA链的核糖核酸内切酶,产生具有游离 3´-OH和5´-磷酸末端的产物,该酶对单链的核酸,双链DNA或双链RNA不起作用。
产品用途:
1.通过Okayama-Berg法进行cDNA Cloning。
2.DNA-RNA杂交体的检定。
3.在Oligo(dT)存在下除去mRNA的Poly(A)末端。
4.mRNA的定量。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:以Poly(rA)*Poly(dT)为底物,在30℃、pH7.7的条件下,20分钟内产生1nmol酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位
纯度:
1.50U的本酶和1μg的λDNA-Hind III分解物在37℃下反应16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2.50U的本酶和1μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
3.50U的本酶和1μg的16S,23S rRNA在37℃下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
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