柱式病毒DNA提取试剂盒哪里买

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百奥莱博专业生产销*(代"售")柱式病毒DNA提取试剂盒哪里买，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：柱式病毒DNA提取试剂盒哪里买
产地：国产|进口
规格：50次
编号：BTN70701
英文名：Virus DNA column extraction kit
品牌：百奥莱博
本试剂盒是在一管式病毒DNA提取试剂盒的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品及拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、阴道拭子等)中提取微量病毒DNA的产品。

试剂盒特点：
1. 操作简单，整个过程只需要20分钟左右，不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高，通过PCR 检测到的最终灵敏度可以达到30-50拷贝/mL。
3. 安全无毒，不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
4. 如果加上病毒离心富集步骤，最多可以处理1.5mL液体病毒样品。
5.与PCR和荧光PCR 兼容。
6. 价廉物美，性价比远高于国外同类产品。
7.适用于各种材料，包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	30ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液3.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 对于液体病毒样品：在1.5mL离心管中加入0.1-0.2mL液体病毒样品。如果病毒需要富集，可以将1.5mL液体在4℃ 24,000 g 冷冻离心60分钟，移弃1.3mL后剩下的0.2mL 用于第2 步处理。对于拭子样品：将一个拭子放入离心管中，加入1mL自备的生理盐水，振荡器上充分振荡半分钟，然后转移0.2mL 到1.5mL塑料离心管中，用于第2 步处理。
2. 加入0.6mL溶液A到第一步得到的0.2mL样品中，振荡30秒混匀后室温放置10分钟。注意：溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 短暂离心后将500μl溶液转移到离心吸附柱中，室温放置2分钟。
4. 12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
5. 将剩余溶液短暂离心后全部转移到步骤3的离心吸附柱中，室温放置2分钟。
6. 12000rpm室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
7. 加入0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12000 rmp室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
8. 12000rpm室温离心1分钟(干甩)，弃含穿透液的离心管。
9. 将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的RNase-free的1.5mL离心管中，在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100μl DNA 洗脱液3.0，然后室温放置2分钟。
10. 12000rpm室温离心1分钟，离心管中的溶液即为病毒DNA溶液。
11. DNA样品可以直接用于PCR，也可放-20℃长期保存。

疑难解答：
Q：提取液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难？
A：原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存，每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种RNA分子，每种RNA 有很多拷贝)，同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一)，样品中病毒数往往又不是很多，使得样品中病毒核酸的绝对量往往比一个细胞中核酸的绝对量还少，所以操作中十分容易丢失。另外，由于得到的核酸绝对量很少，不能使用电泳和测OD检测，只能通过PCR或RT-PCR 检测，而PCR或RT-PCR的条件又需要优化，所以要确定提取是否成功十分不容易。

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·NP40裂解液
编号：BTN131009
英文名称：NP40 Lysis Buffer
规格：250mL
NP-40裂解液是一种比较温和的细胞组织裂解液。NP-40解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP和co-IP等。

产品特点：
1．本产品裂解能力强度温和，对膜蛋白的处理能力一般；对核蛋白的提取能力较好；对胞浆蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子处理效果很好。
2．本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂，能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。
3．本产品的主要成分为50mM Tris(pH7.4)，150mM NaCl，1% NP-40以及sodiu*(代"m") pyrophosphate，β-glycerophosphate，sodiu*(代"m") orthovanadate，sodiu*(代"m") fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂，可以有效抑制蛋白降解。
4．用NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA法蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

对于培养细胞样品：
1．融解NP-40 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2．对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150～250μl裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-～250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3．充分裂解后，10000-14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
 裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。

对于组织样品：
1．把组织剪切成细小的碎片。
2．融解NP-40裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3．按照每20mg组织加入150～250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4．用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5．充分裂解后，10000～14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6．如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

备注：
1．为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2．裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。


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·重组蛋白G
编号：BTN131080
英文名称：Streptococci protein G
规格：1mg
本品为重组蛋白G，纯度＞90%，带His标签，分子量10kD。

储存条件：-20℃保存，有效期1年。

·博莱霉素溶液
编号：BTN120704
英文名称：Bleomycin Solution
规格：1mL
本产品浓度为100mg/mL博莱霉素的水溶液。博莱霉素(争光霉素；Bleocin ；Zeocin)，分子式：C55H83N19O21S2Cu，分子量：1137.41，外观为绿色液体。博来霉素为弱碱性物质。易溶于水、甲醇，微溶于乙醇，是一种属于争光霉素家族的糖蛋白抗生素，在体内能作用于大多数细菌(包括E. coli)、真菌(如：酵母菌)、植物细、动物细胞。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期一年。

·柱式软体动物DNA提取试剂盒
编号：BTN101111
英文名称：Mollusc DNA column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是专门用于从各种软体动物组织中提取基因组DNA的试剂盒。其原理是基于阳离子去垢剂CTAB在适当的离子强度条件下，特异地跟基因组DNA 结合形成沉淀，然后在用硅胶膜技术进行进一步纯化。

产品特点：
1.适用于用常规方法难以提取的、各种富含多糖的软体动物动物，包括螺类、贝类、乌贼、章鱼和蜗牛等。
2. 提取到的基因组DNA 完整性，其中最长可以到达长度一般在20-50kb。
3. DNA 纯净，OD260/280一般都在1.9左右、DNA片段大小在30-50 Kb左右，可直接用于PCR、酶切、杂交等。
4. 操作简单，整个过程约30分钟。
5. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。
6. 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格便宜。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	100ml
RNase A(10mg/mL)	150μl
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
1. 匀浆方法一：称取0.1-0.3g软体动物组织，转移到塑料研钵中，液氮研磨成粉后转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意：最好避免使用含二氧化硅的玻璃研钵，因为DNA 会吸附在表面，影响得率。在离心管中加入1mL 65℃预热的溶液A并用移液枪头充分吹打混匀(如果溶液A有沉淀，需先在65℃加热溶解后摇匀再使用)。进入第三步。
2. 匀浆方法二：将0.1-0.3g软体动物组织剪成小块，转移到10-15mL塑料管中(培养细菌那种离心管即可)，加入1mL 65℃预热的溶液A，用Polytron 式匀浆机(剪切式匀浆机)匀浆1分钟左右。
3. 65℃保温5-30分钟，其间最好吹打混匀2-3次。
4.转移到新的1.5mL离心管中，12000～15000g室温离心3分钟。
5. 将不超过0.75mL的上清转移到新离心管中。有时候上清液中还会有少量细小悬浮物，但对后续操作没有影响，不必进行特殊处理。
6.在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒充分混匀，溶液将呈白色混浊状。
7. 将其置于冰浴中放置5-10分钟。
8. 12000～15000g室温离心3分钟，转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
9. 加入0.2mL的*仿(自备)，震荡器上充分振荡30秒混匀。
10. 12000～15000g室温离心3分钟，两相交界面将有白色膜状物，小心转移上清到新1.5-5mL塑料离心管中。注意：由于下一步要加1.5倍体积的溶液C，所以新的离心管的体积要足够大。
11. 加入1.5倍体积的溶液C，上下颠倒30秒混匀，然后分多次的将混合液转移到离心吸附柱中。
12. 每次转移0.7-0.8mL 混合液后，室温放置5-10分钟。
13. 12000～15000g室温1分钟，弃穿透液。
14. 对需要多次上柱的样品，可以在此将剩余的样品加到离心吸附柱式中，重复第12-14 步的操作。
15. 将0.7mL 通用洗柱液加入离心柱，室温离心1分钟，弃穿透液。
16.在离心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液，12000～15000g离心半分钟(此步为第二次洗涤)。
17. 空甩1分钟去除残留液体。
18. 将离心柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中，加入30-100μL DNA 洗脱液2.0。
19.室温放置5分钟后离心1分钟，管底即为软体动物DNA溶液，可立即使用，也可长期保存在－20℃。
20.可以重复上步一次，以洗脱更多的DNA(第二次洗脱的DNA一般有第一次的30%左右)。


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·柱式土壤RNA提取试剂盒
编号：BTN90705
英文名称：Soil microbe RNA Column extraction kit
规格：50次

·多聚甲醛-磷酸缓冲固定液
编号：BTN131282
英文名称：Polyoxymethylene PBS
规格：250mL
本产品是我司推出的专门固定组织和细胞的产品。固定的目的是使蛋白质等成分凝固，使组织结构或细胞形态更接近生活状态。 使细胞内的蛋白质、抗原等沉淀或固定，定位在细胞内原有位置，终止或减少外源性和内源 性分解酶的反应，防止组织因离体时间延长而发生细胞自溶，减少细胞可溶性蛋白质、脂肪和糖类物质的弥散、破坏与丢失。同时也可使组织硬化成形，便于后续的包埋、切片及染色。

4%多聚甲醛固定液是目前最常用的固定液之一。对多种组织都具有良好固定能力。多聚甲醛溶液主要由多聚甲醛、磷酸盐、去离子水组成，pH为7.4，该固定液适合于绝大多数组织和细胞的固定，是免疫组织化学和培养细胞固定中最常用的固定液之一，它能较好的保护组织和细胞的形态结构以及核酸。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1．对于细胞样品，去除培养液后，按照每六孔板一个孔加入1 毫升固定液的比例，加入固定液。对于其它样品，加入免疫染色固定液的量都以充分盖住样品为准。通常室温固定10分钟即可。也可以4℃过夜。
2．对于组织样本固定液必须足量，一般是组织块总体积的10-50倍，固定时间视组织块大小而定，一般 48-72h，保证固定液充分渗入组织中。标本浸入固定液后要轻轻摇晃几下,防止标本贴在瓶壁上,影响固定效果。
3．继续后续操作。

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