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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
935
- 英文名:
Protease Inhibitor for Yeast
- 保质期:
两年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂怎么卖,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂怎么卖
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
规格:1mL
编号:BTN130529
本产品为酵母细胞蛋白酶抑制混合液,溶剂为DMSO。专门用于裂解各种酵母细胞时,抑制各种内源和外源蛋白酶活性,防止蛋白质降解。
产品特点:
1. 即开即用,不需要单独购买每个成分再配制。
2. 止蛋白质降解。本产品抑制谱广,能特异性抑制丝*酸蛋白酶、半胱*酸蛋白酶、天门冬*酸蛋白酶及金属蛋白酶等各种蛋白酶活性。
3. 本产品为优化的酵母蛋白酶抑制剂混合溶液。与各种细胞裂解液兼容,在裂解液中加入1/100体积即可。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期两年。
欲了解更多真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂怎么卖的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
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真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂怎么卖关键词:真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂,Protease Inhibitor for Yeast,BTN130529
·AFLP试剂盒(EcoRI-MseI)
编号:BTN100903
英文名称:AFLP Kit(EcoRI-MseI)
规格:1600次
本产品在传统AFLP-PCR的基础上经过精心优化而开发。AFLP(amplified fragment length polymorphism)原理是一种结合RFLP和PCR技术特点的、迄今为止最有效分子标记分型技术,其原理如下:

产品特点:
1.一站式,足够50次酶切-连接反应、50次预扩反应和1600次AFLP PCR(PCR按30μL体系计算),但不包括DNA 纯化和带型分析试剂(如PAGE电泳试剂和银染试剂)。
2.本系列产品提供EcoRI-MseI 组合,适用于GC含量在50%以上的基因组。对GC含量在50%以下的基因组,需从本公司采购AFLP(EcoRI-TaqI)组合。
3.各种参数都经过优化,一次PCR所得AFLP片段数一般在10-100之间,可重复性好,误差小于0.6%。
4.本产品适用于基因组在500 Mb-6000Mb的材料(如动物和植物),对于基因组在50-500Mb的材料(如细菌和真菌)或50Mb以下的材料(如质粒,cosmid,BAC,YAC和PAC等),需要分别另购专门的+1型预扩引物混合液和+3型EcoRI引物(8 种)AFLP引物对。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 酶切-连接Buffer,10× | 100μl |
| EcoRI-MseI酶混合液 | 100μl |
| EcoRI-MseI 接头混合物 | 1ml |
| T4 DNA连接酶(1U/μL) | 50μl |
| +0型预扩引物混合液 | 750μl |
| PCR Mix 3.0 | 9ml×3 |
| 对照DNA(50ng/μL) | 20μl |
| +2型EcoRI引物(8条) | 1ml每种 |
| +3型MseI引物(8条) | 1ml每种 |
| TE溶液,pH8.0 | 10ml |
| 超纯水 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
+2型EcoRI引物和+3型MseI引物最后碱基的序列
| 引物名称 | 8条引物3´最后碱基 |
| +2型EcoRI引物 | -AA,-AT,-AG,-AC,-TA,-TT,-TG,-TC |
| +3型MseI引物 | -CAA,-CAC,-CAG,-CAT,-CTA,-CTC,-CTG,-CTT |
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
自备试剂:Southern级DNA纯化试剂,尿素-PAGE电泳套装,银染试剂盒。
使用方法:
一、DNA提取(本试剂盒不提供相关试剂)
用户需要自备50-500ng Southern级别的基因组DNA,用前最好预实验以确保DNA能够被EcoRI和MseI内切酶彻底切开。
二、限制性酶切和接头连接反应(本试剂盒足够50次本反应)
1.在0.2mL离心管中加入设置20μL的限制性内切酶酶切体系:
| 成分 | 用量 |
| 酶切-连接Buffer,10× | 2μl |
| 样品DNA | 50ng(对小基因组材料) 500ng(对大基因组材料) 如果用对照,则用5μL |
| EcoR I-Mse I酶混合液 | 2μl |
| 超纯水 | 加水到20μl |
2.轻柔混匀并短暂离心后,37℃保温2小时酶切(若PCR 仪器不带热盖,则必须加50μL自备石蜡油,否则水分会蒸发影响反应。下同),70℃保温15分钟灭活内切酶。
3.在上述酶反应体系中加入20μl EcoRI-MseI 接头混合物和1μl T4 DNA连接酶,轻柔混匀并短暂离心后,20℃保温2小时让接头跟DNA片段相连。
4.在一个离心管中加入10μl上步得到的连接反应液和90μL TE缓冲液,pH8,充分混匀,得到酶切-连接反应10倍稀释液,未用完的酶切-连接反应原液(30μL)可放-20℃保存。
三、预扩增(本试剂盒足够50次本反应)
5.在0.2mL离心管中设置30μl的PCR 体系:
| 成分 | 体积 |
| 酶切-连接反应液10倍稀释液 | 5μl |
| +0型预扩引物混合液 | 10μl |
| PCR Mix 3.0 | 15μl |
6.离心数秒,按下列参数进行PCR预扩增:
| 温度 | 时间 | |
| PCR(20次) | 94℃ | 30s |
| 56℃ | 60s | |
| 72℃ | 60s |
7.可以取10μl PCR产物在1.5%琼脂糖胶上电泳检测,产物为100-1500bp 模糊条带。
8.将剩下的预扩反应液用TE 稀释50倍,直接用于下步反应或放-20℃保存待用。
四、选择性PCR扩增(本试剂盒足够至少1600次本反应)
9.在0.2mL PCR 管中,加入下列成分(如果用户已经知道哪个一种或几种引物组合适合自己的材料,则直接使用;如果不知道,则需要预先测试所有64 种组合,设置64个PCR反应),下面只是一种组合:
| 成分 | 体积 |
| 预扩反应液50倍稀释液 | 5μl |
| +2型EcoR I引物之一(八种之一) | 5μl |
| +3型Mse I引物之一(八种之一) | 5μl |
| PCR Mix 3.0 | 15μl |
10.轻柔混匀后离心数秒,按下列参数进行PCR:
| 温度 | 时间 | |
| PCR(13次) | 94℃ | 30s |
| 65℃ | 30s(每次循环递减0.7℃) | |
| 72℃ | 60s | |
| PCR(13次) | 94℃ | 30s |
| 55℃ | 30s | |
| 72℃ | 60s | |
| 延伸 | 72℃ | 5min |
五、尿素-PAGE电泳和银染(需另购试剂并按相关说明书进行)
真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂怎么卖关键词:真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂,Protease Inhibitor for Yeast,BTN130529
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