北京现货长效期SDS-PAGE上样液特价促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京现货长效期SDS-PAGE上样液特价促销是高品质的蛋白质研究产品，由北京百奥莱博供应，用于生化科学研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多长效期SDS-PAGE上样液等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京现货长效期SDS-PAGE上样液特价促销
编号：BTN100911
英文名：Stable SDS-PAGE Loading Buffer
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
本产品是专门用于长效SDS-PAGE电泳的上样液(5×)，即开即用，简便快捷。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

除北京现货长效期SDS-PAGE上样液特价促销外，我公司正在打折促销以下产品：

·T3体外转录试剂盒
编号：BTN91108
英文名称：T3 in vitro Transcription Kit
规格：50次
本试剂盒是基于沙门氏噬菌体T3 RNA聚合酶的RNA体外转录试剂盒，它利用含有T3启动子的模版DNA，以NTP为底物，从T3启动子下游开始合成与模板DNA中一条链互补的RNA，简单快速获得大量的RNA分子。

产品特点：
1. 即开即用，用户只需提供含T3启动子的DNA模板即可以进行体外转录实验，不需耍单独准备每一个成份。
2. 单溶液预配液，减少加样次数，避免了操作误差，增加了可重复性。
3. 模板DNA可以是线性化的质粒DNA，也可以是PCR扩增产物。
4.可以合成的RNA的最佳长度在20nt到5000nt之问。
5.产品配方经过精心优化，每μg DNA模板可以合成2-6μg RNA。
6. 得到的RNA可以用于RNA结构研究、核解生物化学、体外翻译、RNA-蛋白质相互作用、反义技术、SELEX技术和RNA干扰(RNAi)等实验。

试剂盒组成：

 

成分	规格
转录预配液(2×)	0.5mL
阳性对照DNA(1.3 Kb片段)	20μL(10ng/μL)
T3 RNA聚合酶混合液	50μL
RNase-free水	1mL
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、制备DNA模板
PCR片段和质粒DNA都可以用作体外转录的模板，但是必须注意以下几点：
1)必须使用线性化的DNA。如果是质粒DNA，则必须先用适当的限制性内切酶切成线状。
2)是需要转录的DNA序列的上游必须有T3启动子。如果模板是PCR产物，则可以在设计引物时将T3启动子序列(5´AATTAACCCTCACTAAAGG 3´)加上。如果是将DNA片段克隆到载体上，则需要选择有T3启动子的载体，并且克隆位点必须位于T3启动子下游。
3)是需要转录的DNA序列的下游端最好不要是3´突出。如果是3´突出(如选择了Pst I来线性化质粒)，则最好用T4 DNA聚合酶修平。
4)是必须保证DNA模板中没有RNase。由于提取质粒DNA的过程中一般要使用大量的RNase A，因此质粒DNA一般都有严重的RNase A污染，所以在用作模板前，最好采取胶回收得方法回收质粒DNA。并且加入少量总RNA一起保温，然后电泳检测RNA是否被降解，以此判断纯化的DNA模板是否有残留RNase A。

二、体外转录反应
1.在一个RNase-free的塑料离心管中，在室温下(不是在4℃下)按次序加入下列成分：

成分	加入量	备注
DNA模板	xμl	总量在50 ng-1μg(如果模板是PCR片段，建议用50ng左右；如果模板是质粒DNA，建议用1μg左右；如果用本产品提供的阳性对照，建议用4μL)
转录预配液，2×	10μl	需室温时使用
T3 RNA聚合酶混合液	1μl	本成分还含其他促进剂，所以是混合物
RNase-free水	补水到20μL

注：此为20μL反应体系的用量，对其他体积的反应体系，各成分的用量可以按比例增减。如果需要标记RNA探针，则需要定做NTP分开而不是NTP预先混合的试剂盒。如果需要得到加帽RNA，则需要加入自备的加帽修饰核苷酸(本公司有各种加帽修饰核苷酸)。
2. 37℃保温1-2小时。注意：延长保温时间并不能提高产量。
3. 70℃加热10分钟灭活T3 RNA聚合酶。
4. 取1-3μL电泳检测转录效果。一般1μg DNA可以合成 5-10μg的RNA。
5. 得到的RNA可以放-80℃保存。

若需进一步去除DNA模板，可参考下列操作步骤，但所用试剂需另行购买，本试剂盒不提供。
1.在体外转录结束后，在反应体系中加入3-5U自备的RNase-free DNase(BTN90903；3-5U/μL)。
2. 37℃保温15-30分钟。
3. 补水到100μL，
4. 用自备的等体积(100μL)的Tris饱和酚-*仿抽提一次去除残留的DNase和RNA聚合酶。
5.在上清中加200μL自备的微量核酸沉淀剂(BTN50903；用前需要摇晃混匀)，振荡后15000rpm离心3～5分钟，弃上清。
6. 加入1mL 75%乙醇，震荡10秒后15000rpm离心3～5分钟，弃上清。
7. 短暂离心数秒，用枪头吸弃上清。
8. 晾干半分钟，所得沉淀即去除DNA模板后的RNA。可溶于RNase-free水中后立即使用或放-80℃长期保存。

疑难解答：
1、没有RNA产物。最常见原因是DNA模板有RNase污染，测试方法是用纯化的RNA跟模板DNA一起保温，再检测RNA是否降解。本试剂盒缓冲液和酶混合液中有RNase inhibitor，如果模板RNase污染严重，可能需要用户补加RNase inhibitor。
2、RNA产量低。最常见的原因是DNA模板序列。在转录序列的第一个和第二个碱基最好都是G，在前14个碱基内避免有U存在。
3、RNA长度比预期的短。可能是模板序列中有T3 RNA聚合酶的终止序列。可以改用SP6或T7体外转录试剂盒(启动子也必须改成SP6或T7启动子)。
4、RNA长度比预计的长。T3 RNA聚合酶跟Taq DNA聚合酶一样，有不依赖于模板的加尾功能，最多有一半的RNA可以带一个或两个碱基的尾巴。如果RNA长度比预计的长很多，使用的模板又是质粒DNA，则可能是质粒DNA线性化不彻底。
5、5´单磷酸还是三磷酸。如果使用GTP，则得到的RNA是三磷酸，体外转录时如果保温时间太长(如12小时)，则有50%的三磷酸会变成单磷酸。如果在转录体系中加入GMP，则T3 RNA聚合酶将优先使用GMP，所得RNA产物中5´端是单磷酸的比例将大大增加。


北京现货长效期SDS-PAGE上样液特价促销关键词：Stable SDS-PAGE Loading Buffer,长效期SDS-PAGE上样液,BTN100911

2650-17-1 Xylene Cyanol FF  二甲*青
ARB11186 人视黄醇结合蛋白4(RBP-4)elisa检测说明书 Human retinol binding protein 4,rbp-4 ELISA KIT
ARB12222 大鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)含量测试 Rat platelet-derived growth factor soluble receptor α,pdgfsr-α ELISA KIT
BL0939 生物素化羊抗人C3抗体
ARB13884 猪主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/SLAⅡ)含量检测 Swine major Histocomp*(代"a")tibility complexⅡ,mhcⅡ/slaⅡ ELISA KIT
L-苏*醇 DL-Phenylalanine 3228-51-1
饱和硫*(代"酸")铵溶液 SAS  500ml
ARB12306 大鼠抗精子抗体(AsAb)Elisa方法检测 Rat anti-sperm antibody,asab ELISA KIT
BTN60107 DNA粘转平试剂盒 DNA Polishing Kit
BL0796 鸡IgG抗原(液体)
植物线粒体膜蛋白提取试剂盒   50T|100T
PY01-044  胆固醇  25克  
北京现货长效期SDS-PAGE上样液特价促销关键词：Stable SDS-PAGE Loading Buffer,长效期SDS-PAGE上样液,BTN100911

免疫血清防腐剂  10× 50ml
ARB11109 人乳头瘤病毒18抗体(HPV18)代做ELISA实验 Human papillomavirus18,hpv18 ELISA KIT
J0308 兔抗大鼠IgG(H+L)抗血清 1ml/10ml
聚腺苷酸 α-D-Lactose monohydrate
ARB10384 人可溶性CD28(sCD28)酶联免疫定量检测 Human soluble cluster of differentiation 28,scd28 ELISA KIT
N-硝基-L-精*酸甲酯 Gallocyanine 51298-62-5
阿利新蓝染色液-A液(pH1.0)   100ml
ARB11409 人神经髓鞘蛋白(p2)酶免分析 Human myelin protein 2,p2 ELISA KIT
疏水硅烷 Xylene blue
PL2001 BAC/PAC大型质粒提取试剂盒(溶液型，转染级)
ARB13376 牛病毒性腹泻抗原(BVD Ag)酶联免疫定量检测 
ARB12188 大鼠白细胞介素5(IL-5)Elisa分析 Rat interleukin5,IL-5 ELISA KIT
ARB10256 人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ/CD26)酶标法分析 Human dipeptidyl peptldase Ⅳ,dppⅣ ELISA KIT
54010-71-8 葡萄糖-6-磷酸一* D-Glucose6-phosphate Sodium sslt

北京百莱博科技有限公司是蛋白质研究产品的专业生产供应销*(代"售")商，恭候您的咨询选购北京现货长效期SDS-PAGE上样液特价促销。