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- 百奥莱博
- BTN130931-RTL
- 北京
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
405
- 英文名：
Blood DNA extraction kit(Southern Grade)
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
2～8℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")Southern级血液DNA提取试剂盒现货供应，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
名称：Southern级血液DNA提取试剂盒现货供应
编号：BTN130931
规格：10次
品牌：百奥莱博
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Southern级血液DNA提取试剂盒现货供应关键词：Southern级血液DNA提取试剂盒,Blood DNA extraction kit(Southern Grade),BTN130931
·白细胞裂解液
编号：BTN130989
英文名称：White Cell Lysis Solution
规格：250mL
本品为即用型白细胞裂解溶液，可以用于裂解分离纯化好的血液白细胞，用于DNA提取、RNA提取等后续实验。
储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。
使用方法：(以DNA提取为例)
1. 取新鲜抗凝血5mL，在10mL或15mL的塑料离心管中用红细胞裂解液裂解红细胞(红细胞裂解液有几种配方，用户需要根据所选产品的使用手册进行操作，这里不列出每种的详细步骤)，也可以直接2500rpm离心5分钟后取白细胞层到一新的10mL或15mL的塑料离心管中。
2.在所得的白细胞沉淀中或所得白细胞层溶液中加自备的生理盐水使得白细胞的终体积为2mL。
3. 加1mL的本产品，混匀后55℃ 保温3小时，其间轻轻振摇数次。
4. 加入3mL自备的Tris饱和酚，轻轻震摇5分钟，使得水相和酚相充分分开。
5. 3500rpm离心15分钟，上层水相含DNA，中间白色层为蛋白质，下层为酚相。
6. 将非常粘稠的含DNA的上清液转移到一干净的10mL或15mL的塑料离心管中。
7. 再用Tris饱和酚重复上面的抽提步骤，直到离心后中间层没有白色的蛋白出现为止。
8.在上清液中加入等体积的自备的*仿，轻轻震摇5分钟，3500rpm离心5分钟，转移上清液到一干净的10mL或15mL的塑料离心管中。此步可以除去残留的酚。
9.在上清液中加入0.1倍体积的自备的3 M 乙酸*溶液(pH5.2)和2倍体积的无水乙醇，轻柔颠倒混匀，将出现絮状的DNA沉淀。
10. 用移液枪头将DNA沉淀挑取出来，转移到1.5mL的塑料离心管中，用75%的乙醇浸泡2次。此操作可以去除DNA中残留的盐离子。
11.转移DNA沉淀到一个1.5mL的塑料离心管中，空气中放置10分钟左右待乙醇挥发后，加入0.5mL自备的TE缓冲液溶解DNA，4℃放置待用。
Southern级血液DNA提取试剂盒现货供应关键词：Southern级血液DNA提取试剂盒,Blood DNA extraction kit(Southern Grade),BTN130931
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文献和实验，观察浓度。 2．转化子 DNA 的小量酶切鉴定 同质粒 DNA 的小量酶切鉴定，见本节 一（三）。 （五）重组子 DNA 的进一步鉴定 可用Southern印迹杂交法或斑点杂交法等进一步鉴定，详见本节 四。 [附]电泳洗脱法回收酶切 DNA 片段 （1）用合适的酶切割 DNA 并电泳。 （2）于紫外灯下从凝胶上切下所要的 DNA 带，装入含1×TBE缓冲液的透析代内，用夹子封好袋口，并检查有无漏孔。
同质粒的小量酶切鉴定，见本节 一（三）。 （五）重组子的进一步鉴定 可用Southern印迹杂交法或斑点杂交法等进一步鉴定，详见本节 四。 [附]电泳洗脱法回收酶切片段 （1）用合适的酶切割并电泳。 （2）于紫外灯下从凝胶上切下所要的带，装入含1×TBE缓冲液的透析代内，用夹子封好袋口，并检查有无漏孔。 （3）将透析袋（纵长）与两极间的边线垂直放于电泳槽内电泳，4～5V/cm电泳至贴紧袋壁。 （4）取出透析袋，挤出凝胶块，吸出袋内液体放入1.5ml的离心管内，10000rpm离心
选择省时、省成本、省纯化工艺的操作流程。所有的操作都应该能够放大到每批生产克级甚至千克级的质粒。最重要的是，所有过程要有重复性，这样才能使生产出的质粒一直符合产品规格。一般的，质粒的大规模纯化包括下面几个或所有步骤：细胞裂解，沉淀，酶消化，柱层析（一步或多步），脱盐或着改变缓冲液，以及无菌过滤。质粒的大规模生产纯化的大致流程如下图所示[66]： 4.1 细胞收集 细胞培养结束后，必须通过连续流或者微过滤[67]对培养菌体进行浓缩，这不仅仅是要对菌体进行浓缩，而且是为了去除对接下来的纯化有影响
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