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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
573
- 英文名:
T4 Polynucleotide Kinase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
T4聚核苷酸激酶促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多T4聚核苷酸激酶等工具酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:T4聚核苷酸激酶促销
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:T4 Polynucleotide Kinase
编号:BTN120506
规格:250U
T4聚核苷酸激酶能够催化ATP的γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5´-羟基末端以及3´-单磷酸核苷上。本产品还具有3´磷酸酶活性,将3´-磷酸基团从寡核苷酸的3´磷酸末端、脱氧3´-单磷酸核苷和脱氧3´-二磷酸核苷上水解掉。其反应示意图如下:

产品用途:
1.DNA或RNA的末端标记,用作寡核苷酸探针和进行DNA测序。
2.寡核苷酸5´末端的磷酸化,以便进行连接反应。
3.除去3´磷酸基团。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| T4聚核苷酸激酶,10U/μL | 25μl |
| 10×反应缓冲液 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1 单位指在37℃条件下,30分钟内催化 1nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量。
1×反应缓冲液:[70mM Tris-HCl(pH7.6@25℃),10mM MgCl2,5mM DTT],37℃温育。
热失活:65℃加热20分钟。
来源:重组E.coli菌株,克隆有T4多聚核苷酸激酶或修饰的T4多聚核苷酸激酶基因。
自备试剂:0.5M EDTA(pH8.0)、[γ-³²P或γ-³³P]-ATP或0.1mM ATP、DNA纯化试剂盒。
使用方法:
一、DNA 5´末端标记:
1.参考如下表格设置反应体系:
| 待磷酸化DNA | 1~50 pmol(5´末端) |
| 10×反应缓冲液 | 5μL |
| 自备的[γ-³²P或γ-³³P]-ATP(3000Ci/mmol) | 50pmol |
| 补充无核酸酶的去离子水 | 至48μL |
| T4聚核苷酸激酶,10U/μL | 2μL |
2.按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
3.37℃孵育30分钟。
4.加入自备的1μL 0.5M EDTA(pH8.0)混匀,以终止反应。
5.后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA,也可以使用适当的DNA 纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒可以向我公司订购。
二、DNA 5´末端磷酸化:
1.参考如下表格设置反应体系:
| 待磷酸化DNA | 1~50 pmol(5´末端) |
| 10×反应缓冲液 | 5μL |
| 自备的0.1mM ATP | 3μL |
| 补充无核酸酶的去离子水 | 至48μL |
| T4聚核苷酸激酶,10U/μL | 2μL |
2.按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
3.37℃孵育30分钟。
4.加入自备的1μl 0.5M EDTA(pH8.0)混匀,以终止反应。
5.后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA,也可以使用适当的DNA 纯化试剂盒进行纯化。
关于T4聚核苷酸激酶促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
ARB13243 小鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)elisa检测说明书 Mouse high sensitivity c-reactive protein,hs-crp ELISA KIT
BTN131101 生物素化蛋白L Biotin-Protein L
抗蛋白酶 EDTA-MgNa2 37682-72-7
*丁酸 Carboxypeptidase B 1821-12-1
F020212 兔抗鸡IgY IgG抗体 Rabbit Anti-Chicken IgY
*盐染色液(茜素红S法) 2×50ml
25322-68-3 PEG3350 聚乙二醇
17372-87-1 伊红Y(水溶) Eosin Y
ARB12759 小鼠E选择素(E-SelectIn/CD62E)定量分析 Mouse e-selectin ELISA KIT
ARB10213 人β半乳糖苷酶(βGAL)酶联免疫定量检测 Human α-galactosidase,αgal ELISA KIT
ARB12837 小鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)含量测试 Mouse macrophage inflammatory protein 2,mip-2 ELISA KIT
*酚蓝* D-Ornithine HCL 34725-61-6
18883-66-4 链脲佐菌素 Streptozocin (STZ)
BL0905 FITC标记羊抗鸡IgG抗体
T4聚核苷酸激酶促销关键词:T4 Polynucleotide Kinase,BTN120506,T4聚核苷酸激酶
·沉淀型TMB显色试剂盒
编号:BTN101106
英文名称:Precipitated TMB Chromogenic Kit
规格:100mL
TMB因其灵敏度较高及无致癌性而得到广泛应用。本产品采用稳定敏感的配方,辣根过氧化物酶接物反应时产生一种深蓝色的沉淀产物,适用于Western Blot及其适用于蛋白质杂交和免疫化学,以及原位杂交染色等。即开即用,性能稳定,操作便捷,敏感度高,显色清晰,重复性好。
产品特点:
1.相对于DAB来说,灵敏度高。
2.色泽稳定,无须避光显色。
3.色带为蓝色,便于观察。
4.无毒环保,可以放心使用。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 100ml |
| 溶液B | 100ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃避光保存,有效期一年。
使用方法:
一、免疫印迹染色
1.准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤
2.加入1滴溶液A和1滴溶液B,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
3.置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2-5分钟,直至深蓝色沉淀出现。
4.用镊子夹起固相膜,放入去离子水中清洗。
5.空气中晾干。
6.拍照记录。
二、免疫化学染色
1.准备好含有待测蛋白的组织切片:包括固着、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。
2.加入1滴溶液A和1滴溶液B,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。
3.室温下,小心加入上述显色工作液使其铺满整个切片样品表面。
4.室温下孵育5-10分钟,或直至样本出现深蓝色。
5.小心移去切片上显色工作液。
6.室温下,小心将切片置入50 毫升PBS缓冲液中浸泡5秒。
7.小心移去切片上的PBS缓冲液。
8.放上盖玻片或封片。
9.(选择步骤)进行甲基绿复染。
10.立即在一般光学显微镜下观察:阳性呈现深蓝色。
注意事项:
1.加入1滴溶液A和1滴溶液B,可按比例增减
2.如果封闭欠佳,易造成背景颜色过深
3.固相膜显色后数小时将会褪色,不能永久存在。
4.该显色液只能用于辣根过氧化酶(HRP)标记的杂交和沉淀反应。
5.染色后可用甲基绿或苏木素复染,增强对照。
疑难解答:
Q:在ELISA底物反应过程中,为何有些孔呈蓝色,而另外的孔呈蓝绿色?
A: 这是TMB底物反应过程中的正常现象,不影响实验结果。这是由于辣根过氧化物酶的浓度过高引起的,建议降低二抗的浓度。
Q:ELISA 显色时为何孔中会出现沉淀?
A:HRP浓度过高,建议降低二抗-HRP浓度或加入100μL 冰醋酸以溶解沉淀。
Q:如何降低背景读数?
A:建议降低一抗或二抗浓度,延长封闭时间。
T4聚核苷酸激酶促销关键词:T4 Polynucleotide Kinase,BTN120506,T4聚核苷酸激酶
·填入法DNA末端标记试剂盒
编号:BTN120653A
英文名称:Fill-in DNA End Labeling Kit
规格:5次
本试剂盒是基于Klenow DNA聚合酶填平DNA片段能力的填入法标记试剂盒,该反应的示意图如下:
产品特点:
1.快速,15分钟即可完成标记反应。
2.可用于标记5´突出的双链DNA。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
4. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。
试剂盒组成:
| 组份 | BTN120653A | BTN120653B | BTN120653C |
| 填入法标记缓冲液,5× | 50μl | 50μl | 50μl |
| Klenow DN聚合酶(1U/μL) | 5μl | 5μl | 5μl |
| dNTP(2mM) | 25μl | - | - |
| 含Biotin-dUTP的dNTP | - | 25μl | - |
| 含DIG-dUTP的dNTP | - | - | 25μl |
| 超纯水 | 1ml | 1ml | 1ml |
| 说明书 | 一份 | 一份 | 一份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
北京百莱博科技有限公司是工具酶产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购T4聚核苷酸激酶促销。
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T4聚核苷酸激酶促销
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