Furin蛋白酶北京厂家

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百奥莱博专业生产销*(代"售")Furin蛋白酶北京厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：Furin蛋白酶北京厂家
编号：BTN130867
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：50U
本产品浓度为2000U/mL的Furin蛋白酶溶液，Furin蛋白酶是一种类似枯草杆菌蛋白酶的蛋白质前体转化酶。它是分泌途径中的主要加工酶，定位于高尔基体反面的网状结构部位。其底物包括：凝血因子，血清蛋白和生长因子受体(如：胰岛素样生长因子受体)。最短的切割识别位点是：Arg-X-X-Arg。然而，该酶倾向作用于Arg-X-(Lys/Arg)-Arg位点。在 P6 位置的额外精*酸似乎能增强切割效率。Furin活性受 EGTA、α1-抗胰蛋白酶硅酸盐和聚精*酸化合物抑制。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指30℃条件下，1分钟内从荧光肽BOC-RVRR-AMC上释放1pmol AMC所需要的酶量。

注意：底物的三维结构以及切割位点周围的*基酸类型会影响 Furin蛋白酶的切割特异性。

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·烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(AAG)
编号：BTN130643
英文名称：Alkyladenine DNA Glycosylase
规格：500U
人类烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(hAAG)作用于烷基化和氧化了的DNA 损伤位点，包括3-甲基腺嘌呤、7-甲基鸟嘌呤、1,N6-乙*(代"烯")基腺嘌呤和次黄嘌呤。hAAG催化 N-糖苷键的水解断裂，释放受损碱基。其反应示意图如下：


产品特点：
1．单细胞凝胶电泳(彗星试验)；
2．碱洗脱；
3．碱解旋。

产品组成：

 

组份	规格
hAAG(10000U/mL)	50μL
10×Buffer	1mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位是指在10μl反应体系中，37℃条件下，1小时从1pmol含有单一脱氧次黄嘌呤核苷位点的34bp寡核苷酸双链产生一个AP位点所需的酶量。

热失活：65℃,20分钟。

·大提柱式细菌RNA提取试剂盒
编号：BTN80905
英文名称：Bacterial RNA Column large-scale extraction kit
规格：5次
本试剂盒是在本公司柱式细菌RNA提取试剂盒(BTN80103)基础上开发的大提升级产品，用于快速从各种常见的革氏阴性和革氏阳性细菌中大量提取总RNA。跟柱式细菌RNA提取试剂盒相比，它具有下列特点:
1. 单次样品处理量大，最多可以处理 30mL细菌培养物。
2. 操作简单快速，一次提取只需要 20分钟左右。
3. 所得 RNA 纯度高，OD260/OD280一般在2.0左右。一般不含基因DNA污染。
4.适用于各种革氏阴性和革氏阳性细菌。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
大提离心吸附柱	5套
通用洗柱液	100ml
通用预洗脱液	5ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
下面的操作步骤是针对在 50mL塑料离心管中进行的大量提取的。

1.在 50mL塑料离心管中离心收集10-30mL新鲜细菌。注意:由于细菌RNA 半衰期十分短，所以，必须使用最新鲜的、处于对数生长期的细菌。
2. 吸尽液体培养基，加入10mL溶液A，用枪充分吹打细菌沉淀，确保细菌全部裂解，没有块状物。
3. 加入0.2倍体积的自备*仿(10mL溶液A需2mL*仿)，振荡器上充分振荡混均 30秒。
4. 5000-7000 rmp室温离心 3～5分钟。
5. 将上清液(约5-6mL的无色透明水相，有时水相比重大时，水相在下层，有机相即蓝相在上层，吸取时应吸取透明水相)转移到一个干净的50mL塑料离心管中。注意：离心后下层有机相和中间层含有 DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下少许上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行，否则容易吸出交界面的不可见的丝状 DNA。
6. 加入等体积的溶液B，充分颠倒混匀。加入溶液B后，溶液为乳白色。
7. 将溶液转移到离心吸附柱中，5000-7000rpm室温离心 1分钟，弃穿透液。
8. 加 10mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，室温离心 1分钟，弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
9. 加 10mL 通用洗柱液，室温离心 1分钟，弃穿透液。此步可以省略。
10.室温 5000-7000rpm离心 2分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响 RNA的使用。
11. 加入1mL 通用预洗脱液，5000-7000rpm离心 1分钟。
12. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中，加入1mL RNA 洗脱液。
13.室温 5000-7000rpm离心 2分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
14. 重复 14-15 步一次，我司的大提离心吸附柱吸附能力较强，一般第二次洗脱还能洗脱较多的RNA。
15. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做 Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
16. RNA产量产率测定：将5-10μL RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在 OD260的光吸收。通过光吸收可以得出 RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出 RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
17. RNA 纯度测定：无污染的总 RNA的OD260/OD280一般在 1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响 RT-PCR等反应。

疑难解答：
Q：上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗？
A：不是。用 TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳 RNA时容易产生此现象，初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用 TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象，建议最好使用甲醛变性胶电泳和RNA 专用上样液(如百奥莱博的RNAload)。


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·酿酒酵母Y187感受态细胞
编号：BTN140389
英文名称：E.coli Y187 Rosetta Competent Cell
规格：10×100μL
 Y187菌株是Clontech公司开发的GAL4系统酵母单杂，双杂实验用菌株，MATα型，可直接转化质粒或与MATa型酵母菌株(Y2HGold，AH109等)通过mating 操作进行筛库试验。Transformation marker 为: trp1，leu2，报告基因为：lacZ，MEL1。Y187-GAL4 酵母双杂系统需要两种质粒配套使用：PGBKT7和PGADT7。质粒PGBKT7的筛选标志为TRP1，用于表达DNA-BD(来自酵母转录因子GAL4N 端1～ 174 位*基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白；质粒PGADT7的筛选标志为LEU，用于表达AD(GAL4 C 端768～881 位*基酸)与目标蛋白(Prey)的融合蛋白。GAL4 系统原理：一个完整的酵母转录因子GAL4可分为功能上相互独立的两个结构域：位于N 端1～174 位*基酸区段的DNA 结合域(DNA-BD)和位于C端768～881 位*基酸区段的转录激活域(AD)。DNA-BD能够识别GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS，并与之结合。而AD可以启动UAS下游的基因进行转录。BD和AD 单独存在不能激活转录，但当二者接近时，则呈现完整的GAL4活性，使含有UAS的启动子下游基因转录表达。正常条件下，BD 不与AD结合，将要检测的蛋白质分别与BD和AD 融合，形成 bait 融合蛋白(bait -BD)和prey融合蛋白(prey-AD)，如果 bait和prey发生相互作用，就会促使 BD和AD的相互接近，形成完整的GAL4，从而激活报告基因的转录。Y187 有两个报告基因：lacZ，MEL1，分别由两种不同的启动子(G1，M1)启动，这两种启动子只有GAL4 识别的17bp 核心区相同，其余部分均不同，大大降低了酵母双杂假阳性发生的概率。

 Y187感受态细胞是实验室常用酵母双杂用菌株，本产品经特殊工艺制作而成，经PGADT7质粒检测转化效率为104 cfu/μg DNA。

菌株基因型：MATα，ura3-52，his3-200，ade 2-101，trp 1-901，leu 2-3，112，gal4Δ，met–,gal80Δ，URA3: :GAL1UAS-GAL1TATA-lacZ，MEL1

产品组成：

成分	规格
Y187感受态细胞	0.1ml×10支
PGADT7(control vector)，10 ng/μL	10μl
Carrier DNA，5μg/μL	100μl
PEG/LiAc	5ml
说明书	1份

储存条件：感受态细胞干冰运输、-80℃保存，Carrier DNA -20℃保存；PEG/liAC、PGADT7质粒4℃保存；有效期半年。

自备试剂：目的DNA、YPDA、SD培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中依次加入预冷的目的质粒2-5μg，CarrierDNA(95-100℃ 5分钟，快速冰浴，重复一次)10μL，PEG/LiAc 500μL，吹打混匀，30℃水浴30分钟(15分钟时翻转6-8次混匀)。
3. 42℃水浴15分钟(7.5分钟时翻转6-8次混匀)。
4. 5000rpm离心 40秒，弃上清。取400μL ddH2O 重悬沉淀，5000rpm离心 30秒，弃上清。
5. 取 50μL ddH2O 重悬沉淀，涂板，29℃培养48-96小时。

注意事项：
1. 酵母在缺陷培养基中生长速度比YPDA培养基慢，培养基中缺陷成分越多，生长越慢，以转化涂板为例：涂YPDA 平板29℃，48h培养可见直径1mm 克隆；涂SD 单缺平板29℃，48-60h培养可见直径1mm 克隆，涂SD 双缺平板29℃，60-80h培养可见直径1mm 克隆，涂SD 三缺或四缺平板29℃，80-90h培养可见直径1mm 克隆。
2.菌落变粉不是污染，是酵母细胞生长中一个常见现象。当细胞在平板培养几天后，平板上的Adenine 被酵母消耗完毕，酵母试图通过自身代谢途径合成 Adenine以供利用，然而，有些菌株的ADE2基因被破坏，Adenine 合成途径受阻；又由于其ADE4,5,6,7,8基因均正常，所以造成中间产物P-ribosylamino imidazole(AIR)在细胞中积累而使菌落变为粉红色。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4. 同时转化 2-3 种质粒时可增加质粒的用量。


Furin蛋白酶北京厂家关键词：Furin Protease,Furin蛋白酶,BTN130867

BTN100811 质谱兼容型蛋白银染试剂盒 MS-Comp*(代"a")tible Silver Stain for Protein
肾上腺酮 Fmoc-Phe-OH 50-22-6
玻璃纤维 N6-Benzoyladenine 65997-17-3
BTN100882 电泳级*酚蓝溶液 Bromophenol Blue Solution, EG
ARB12568 大鼠脑红蛋白(NGB)含量分析 Rat neuroglobin,ngb ELISA KIT
链霉蛋白酶 Sucrose Phosphorylase 9036-06-0
F020115 兔抗荧光素FITC抗体 Polyclonal Rabbit Anti-FITC
癸酸* 2,4-D sodiu*(代"m") salt 1002-62-6
BFD031 恩诺沙星快速检测试剂盒
L-苏*酸甲酯盐*(代"酸")盐 Estradiol 39994-75-7
豆固醇 Protein protectant DSP50 83-48-7
CYB168017 小鼠血清 100ml/瓶
Acr-Bis(45%,43.4:1.6)   500ml
加替沙星 5′-AMP 112811-59-3
尿苷二磷酸酶 Tween 65

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