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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
348
- 英文名:
E.coli JM110 Chemical Competent Cell
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
干冰运输、-80℃保存
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")大肠杆菌JM110化学感受态细胞 克隆与表达,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:大肠杆菌JM110化学感受态细胞 克隆与表达
产地:国产|进口
英文名:E.coli JM110 Chemical Competent Cell
规格:10*100μl
品牌:百奥莱博
本产品是采用大肠杆菌JM110菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测本产品,转化效率可达106。本产品为dam-,dcm-的菌株,排除dam,dcm甲基化的影响。
菌株基因型为:dam dcm supE44 hsdR17 thi leu rpsLlacY galK galT ara tonAthrtscΔ(lac-proAB)F-[traD36 proAB+ lacIq cZΔM15]
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
除大肠杆菌JM110化学感受态细胞 克隆与表达外,我公司正在打折促销以下产品:
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10127-02-3 吖啶橙 Acridine Orange
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*检测试剂盒(甲基麝香草酚蓝微板法) 100T
117-39-5 槲皮素 Meletin或Sophretin
1-乙基-3-(3-二甲*丙基)碳二亚胺盐*(代"酸")盐 D-Arginine 25952-53-8
直接胆红素(TBIL)检测试剂盒(BOD比色法) 50T
大肠杆菌JM110化学感受态细胞 克隆与表达关键词:E.coli JM110 Chemical Competent Cell,大肠杆菌JM110化学感受态细胞,BTN130511
·柱式凝固血液DNA提取试剂盒
编号:BTN71204
英文名称:Coagulated blood DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是凝固血液DNA提取试剂盒(BTN71002)的升级产品,专门用于从新鲜或冻存的凝固全血(包括人和禽类)中提取基因组DNA。
产品特点:
1. DNA更加纯净,OD260/280在1.8-2.0之间,可直接用于PCR、酶切、杂交等。
2. 操作更加简单快捷,比凝固血液DNA提取试剂盒快十分钟以上。
3. 每克新鲜凝固全血DNA产量为20-50μg DNA。
4. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 50ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,取1mL到10mL或15mL塑料离心管中并将离心管放置于65℃待用。
2. 称取凝固血液0.1-0.5 g,加入到预热的溶液A中短暂匀浆。匀浆过程中将产生大量泡沫,属于正常现象。
注意:如果是干的血块,用量不要超过0.2g,但需将干血块剪成微小的碎片。
3. 将匀浆液置于65℃水浴保温5分钟,然后将不超过0.75mL的匀浆液上清转移到新的1.5mL离心管中。
注意:尽量不要转移凝固血液碎片。
4.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀后冰浴5分钟。
5. 12000~15000g室温离心3分钟,将上清液转移到新的1.5mL离心管中。
注意:如果上清液呈红色,属于正常现象。
6. 加入0.2mL的自备*仿,震荡器上充分振荡30秒混匀。
7. 12000~15000g室温离心3分钟,两相交界面将有白色膜状物。将不超过0.6mL的上清液小心转移到新的1.5mL离心管中。
8. 加入1.5倍体积的溶液C,上下颠倒30秒混匀后分两次转移到离心吸附柱中,每次转移后需要12000~15000g离心半分钟并弃穿透液。
9.在离心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液,12000~15000g离心半分钟。
10.在离心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液,12000~15000g离心半分钟(此步为第二次洗涤,一般可以省略)。
11. 12000~15000g离心半分钟以去除残留通用洗柱液。注意:此步不能省略,否则残留的通用洗柱液会影响DNA的后续反应。
12. 将离心吸附柱转移到一新的离心管中,加入100μL 通用洗脱液,12000~15000g离心半分钟,管底溶液即DNA溶液,可立即使用或放冰箱长期保存。
大肠杆菌JM110化学感受态细胞 克隆与表达关键词:E.coli JM110 Chemical Competent Cell,大肠杆菌JM110化学感受态细胞,BTN130511
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