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- 百奥莱博
- BTN80203-SLP
- 北京
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
851
- 英文名：
miRNA column recovery kit for PAGE gel
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
常温运输,4℃保存(RNA 洗脱液最好
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京PAGE胶miRNA柱式回收试剂盒价格，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称：北京PAGE胶miRNA柱式回收试剂盒价格
品牌：百奥莱博
编号：BTN80203
产地：国产|进口
英文名：miRNA column recovery kit for PAGE gel
本试剂盒是miRNA聚丙*(代"烯")酰胺凝胶回收产miRNArc(BTN70604)的柱式升级产品，可用于回收200nt以下的小片段RNA，尤其是20nt左右的microRNA(miRNA)分子。
产品特点：
1.可以回收15-3000nt 范围内的各种长度的RNA，包括 100nt以下的miRNA片段。
2. 柱式回收法，比沉淀法更见简单快捷。
3. miRNA 回收率在 70%左右。
4.一站式，即开即用，操作简单，用户不需要自备任何试剂。
5.扩容性好，可小规模操作，也可以大规模操作。
试剂盒组成：
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 15ml |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 15ml |
| 溶液D | 40ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA 洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件：常温运输,4℃保存(RNA 洗脱液最好 4℃保存)，有效期一年。
使用方法：
1. 切取含 miRNA片段的PAGE凝胶(100mg左右，尽可能多地把多余的胶切除，否则会影响回收效率)，放入1.5mL塑料离心管中，用移液枪头尽可能将其捣碎(最好先在酒精灯上将枪头的口烧密闭再用于捣碎)，捣得越细越好。
2. 加入300μL溶液A。
3. 将离心管水平放置并室温摇晃3小时以让 miRNA从 PAGE凝胶中扩散出来。如果回收的RNA片段长度超过100nt，摇晃时间应适当延长。提高温度到45-65℃，RNA扩散速度会增加。
4. 12000～15000g室温离心 1-2分钟，将含RNA的上清液转移到一个新的5mL的塑料离心管中。
5. 加入300μL溶液B、300μL溶液C和750μL溶液D混合均匀将离心管中的溶液分两次转移到离心吸附柱中，每次转移后都先静置3分钟，然后再12000～15000g离心1分钟，倒掉收集管中的液体。
6. 加入700μL通用洗柱液于离心吸附柱中。12000～15000g离心1分钟，倒弃收集管中的废液。
7. 12000～15000g离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
8. 将离心吸附柱置于一新的干净的离心管(自备)中，加入25-50μL RNA洗脱液，静置3分钟。
9. 12000～15000g离心1分钟，离心管底部所得溶液即为纯化的miRNA溶液，可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
10.可以PAGE电泳检查回收效率，最好使用百奥莱博的高灵敏的超快核酸银染试剂(BTN81104)染色以节约miRNA样品的用量。
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文献和实验可以采取现在比较常用的TRIzol一步法。不要使用带柱子的RNA提取试剂盒，因为除了专门用于提取miRNA的试剂以外，绝大部分柱子无法捕获20nt左右的miRNA。 2、电泳 （1）配制15%的尿素变性PAGE胶，可以先用预冷的0.5XTBE缓冲液作为电泳缓冲液，60V预跑30min。 （2）将样品与RNA loading buffer按比例混合，70℃预热5min，立即放置冰上。 （3）上样前，用缓冲液冲洗点样孔，防止点样孔中的杂质影响电泳。 （4）点样时，使样品均匀铺在点样孔底部
。用于纯化标记反应是不错的选择，方法和PCR产物回收试剂盒是一样的，很方便。除了这种膜吸附的柱子，还有一种凝胶过滤原理的柱子也可以用于分段收集不同大小的产物，那个在建库等实验中用的比较多，也有用于纯化标记反应中的未标记分子或者核苷酸的。很小的DNA 片断常常会用PAGE胶电泳。PAGE胶好像还没有很好的溶解方法，除了我们前面提到的电洗脱，Qiagen还提供一些私人方法，在应急的时候可以尝试。将切割下来的PAGE条带冲洗后加入指管中，加入2倍体积的分散缓冲液（0.5M醋酸胺、10mM的醋酸镁，1mM
公司的Geba小管子可以专门对付PAGE胶电泳，用的是电洗脱的原理，能令操作容易得率提高，不过还是需要耗时甚久。加上这以色列公司已经几经转手，负责销售此产品的基因有限公司的员工显然也不太熟悉这可爱的小东西，每每出现一问三不知的情况，使得购买相当不方便。 实验人员的智慧是无穷的。一众Qiagen的拥趸们在“享受”了QiaQuick Gel Extraction Kit的畅快使用感后，等来等去又等不到厂家推出PAGE胶专用的试剂盒，于是开始自行摸索用这个琼脂糖凝胶回收试剂盒来回收PAGE胶
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