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-20℃
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长期
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601
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货2kb DNA Marker供应在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京现货2kb DNA Marker供应
产地:国产|进口
规格:100次(500μl)|500次(5×500μl)
2 kb DNA Marker由6条DNA片段组成,分别为2000bp、1000bp、750 bp、500 bp、250 bp和100 bp。本产品为已含有1×Loading Buffer的DNA溶液,可取5μl直接电泳,使用十分方便;电泳时750 bp的DNA片段量约为150ng,显示亮带,其他条带的DNA量约为50ng。
注意事项:
1、本产品可直接化冻混匀使用,无需加热。
2、请及时更换电泳缓冲液并使用新制琼脂糖凝胶,以免影响电泳结果。
3、DNA琼脂糖凝胶电泳时,凝胶的纯度对DNA条带的清晰度影响很大,因此尽量选用质量好的琼脂糖,推荐凝胶浓度为1%-2%,电压4-8 v/cm。
4、凝胶浓度与DNA片段的分离性能关系密切。凝胶浓度越大,对短片段DNA分离性能越好;反之,凝胶浓度越小,越有利于长片段DNA的分离。
使用方法:
取5μl 加入琼脂糖凝胶的加样孔中(如果加样孔较宽,大于6mm时,须适当增加上样量),进行电泳。
1%琼脂糖凝胶电泳图(5μl)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期24个月。
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北京现货2kb DNA Marker供应关键词:百奥莱博,2kb DNA Marker,WE0246
·抗VSV-G标签单克隆抗体
编号:WE0340
英文名称:Anti VSV-G-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:20μl
疱疹性口炎病毒(VSV)属于弹状病毒家族,在出芽过程中从宿主细胞的细胞膜中释放出来,糖蛋白(VSV-G)包含一个区域,该区域的细胞膜外近端是作为VSV病毒出芽所必需的结构。VSV-G标签抗体能识别C末端,内部以及N末端的VSV-G标签(YTDIEMNRLGK)融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成多肽(YTDIEMNRLGK)
应用范围:WB(1:500-5000)、ELISA(需摸索最佳稀释度)
·蛋白标准溶液BSA
编号:WE0274
英文名称:Protein Standard Solution(BSA)
规格:5ml
疱疹性口炎病毒(VSV)属于弹状病毒家族,在出芽过程中从宿主细胞的细胞膜中释放出来,糖蛋白(VSV-G)包含一个区域,该区域的细胞膜外近端是作为VSV病毒出芽所必需的结构。VSV-G标签抗体能识别C末端,内部以及N末端的VSV-G标签(YTDIEMNRLGK)融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成多肽(YTDIEMNRLGK)
应用范围:WB(1:500-5000)、ELISA(需摸索最佳稀释度)
·6×DNA上样缓冲液
编号:WE0221
英文名称:6×DNA Loading Buffer
规格:10ml
疱疹性口炎病毒(VSV)属于弹状病毒家族,在出芽过程中从宿主细胞的细胞膜中释放出来,糖蛋白(VSV-G)包含一个区域,该区域的细胞膜外近端是作为VSV病毒出芽所必需的结构。VSV-G标签抗体能识别C末端,内部以及N末端的VSV-G标签(YTDIEMNRLGK)融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成多肽(YTDIEMNRLGK)
应用范围:WB(1:500-5000)、ELISA(需摸索最佳稀释度)
·miRNA cDNA第一链合成试剂盒
编号:WE0157
英文名称:miRNA cDNA Synthesis Kit
规格:25次
本试剂盒采用在miRNA 3’末端加多聚A尾的方法来使miRNA具有Poly(A)尾,之后再使用Oligo(dT)-Universal tag通用逆转录引物进行逆转录反应,最终合成miRNA对应的第一链cDNA。
miRNA cDNA第一链合成试剂盒包含miRNA 3’末端Poly(A)尾修饰过程及修饰后逆转录过程需要的全部试剂。该试剂盒具有非常高的Poly(A)修饰和逆转录效率,可以从1ng-2μg的total RNA中有效获得miRNA对应的cDNA第一链。并且操作简便、快捷,可以用于从一个反应合成的cDNA中同时检测多种miRNA,不仅减少了误差、节约了样品,同时还实现了检测的高通量。
试剂盒组成:
| 组份 | 25次 |
| Tris-Hcl,1 mM,PH 8.0 | 1ml |
| E.coli Poly(A)Polymerase,5U/μl | 15μl |
| 10×Poly(A)Polymerase Buffer | 80μl |
| ATP,10 mM | 15μl |
| RT Primer,25μM | 90μl |
| 5×UltraRT Buffer | 120μl |
| UltraPure dNTP Mix,10 mM each | 30μl |
| UltraRT | 15μl |
| RNase-Free Water | 1ml |
备注:本试剂盒须与miRNA荧光定量检测试剂盒(WE0158)配套使用。
自备实验材料:1ng-2μg的总 RNA,或0.1ng-1μg的小分子RNA。
注意事项:
预防RNase污染,应注意以下几方面:
1、使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
2、玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
3、配制溶液应使用无RNase的水。
4、操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
使用方法:
A.miRNA加Poly(A)尾的过程:
1、首先根据所用RNA的量,按如下公式,用1 mM Tris(PH8.0)来稀释10 mM ATP:
ATP稀释系数=5000/__ng的总RNA
例:如果总RNA的起始用量为100ng,那么ATP稀释系数=5000/100=50。即将ATP稀释50倍(1μl的10 mM ATP加49μl的1 mM Tris,PH8.0)。
2、向冰浴中预冷的无RNase反应管中加入以下试剂至总体积25μl。
| 试剂 | 25μl反应体系 | 终浓度 |
| total RNA | Xμl | 可达2μg |
| 10×Poly(A)Polymerase Buffer | 2.5μl | 1× |
| 第“1”步中稀释好的ATP | 1μl | — |
| E.coli Poly(A)Polymerase, 5U/μl | 0.5μl | 2.5 U |
| RNase-Free Water | up to 25μl | — |
注意:反应中使用的total RNA必须含有小分子RNA。
此过程也可以直接使用小分子RNA(建议加入量为2-5μl。请根据目的miRNA的丰度来确定加入量)。
3、轻轻混匀上述反应液,短暂离心将液体收集于管底。37℃,孵育15分钟。此过程结束后,立刻进行第一链cDNA的合成,或于-20℃暂存。如需长期保存,建议存放于-80℃。
B.修饰后的miRNA cDNA第一链合成的过程:
1、向冰浴中预冷的无RNase反应管中加入下表中试剂,至终体积20μl:
| 试剂 | 20μl反应体系 |
| 上述Poly(A)反应液 | 4μl |
| UltraPure dNTP Mix,10 mM each | 1μl |
| RT Primer,25 μ M | 3μl |
| 5×UltraRT Buffer | 4μl |
| UltraRT | 0.5μl |
| RNase-Free Water | 7.5μl |
2、轻轻混匀上述反应液,短暂离心将液体收集于管底。42℃,孵育50分钟。
3、85℃,孵育5分钟,终止反应。合成的cDNA反应液可以直接进行荧光定量检测实验,也可以于-20℃保存备用。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
北京现货2kb DNA Marker供应关键词:百奥莱博,2kb DNA Marker,WE0246
·TMB底物显色试剂盒(可溶型,20×)
编号:WE0309
英文名称:Soluble TMB Kit(20×)
规格:100ml
TMB(3", 3", 5", 5", -四甲基联*(代"*")*(代"胺"))是辣根过氧化物酶(HRP)显色底物,是目前HRP系统ELISA实验的常用显色试剂。TMB显色底物工作液在HRP的催化下,形成蓝色的阳离子产物,在370 nm和652 nm处有主要吸收峰。加酸终止反应后,蓝色转变为黄色,可以在450 nm波长下测定。本试剂盒使用方便,灵敏度高,效果稳定,颜色产物为可溶性,适用于ELISA,不推荐用于IHC实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 100ml |
| 20×T MB-A | 5ml |
| 1×TMB-B | 2×50ml |
注意事项:
1、显色工作液应即用即配,放置超过10分钟会影响显色效果。
2、TMB颜色底物显色后,随着时间的延长,颜色会逐渐消退,因此显色并终止反应后应尽快读值,否则会影响检测的准确性。
3、以96孔酶标板每孔用量100μl显色工作液计算,5ml 20×TMB Kit 可完成1000孔样品的检测。
4、本产品仅限于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、TMB显色工作液配制:
根据实验需用量,将20×TMB-A和1×TMB-B以1:19的比例均匀混合,即配制成为TMB显色工作液。
2、显色:
1)经HRP标记物孵育并充分洗涤后,酶标板每孔中加100μl TMB显色工作液。
2)室温避光孵育25-30分钟,反应产物呈蓝色。
3)每孔加50μl 0.5M H2SO4 终止显色,此时蓝色产物变为亮黄色。
4)将酶标板置于酶标仪中,450 nm波长下读取数据。
储存条件:2~8℃
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