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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
384
- 英文名:
Southern Blocking Buffer (NC)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输、-20℃保存
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN120676型Southern封堵液(NC专用)打折促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:BTN120676型Southern封堵液(NC专用)打折促销
产地:国产|进口
编号:BTN120676
英文名:Southern Blocking Buffer (NC)
规格:100mL
品牌:百奥莱博
本产品为专门针对NC膜的核酸杂交封堵液,用于降低检测时的非特异性信号,降低背景,增强信噪比。经过反复优化配方,即开即用,方便快捷。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
关于BTN120676型Southern封堵液(NC专用)打折促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·β-半乳糖苷酶活性检测试剂盒
编号:BTN130599
英文名称:β-galactosidase Assay Kit
规格:24样
本产品是分光光度法测定β-GAL活力的,测定原理为β-GAL分解对-硝基*(代"*")-β-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基*(代"*")酚,后者在400nm有最大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算β-GAL活性。
β-半乳糖苷酶广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,能够催化β半乳糖苷化合物中的β半乳糖苷键水解,此外还具有转半乳糖苷的作用。β-GAL不仅可为植物的快速生长释放储存的能量,还能在正常的多糖代谢、细胞壁组分代谢以及衰老时细胞壁降解过程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖残基的水解,释放自由的半乳糖。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 酶提取液 | 50ml |
| 溶液A | 粉剂1瓶 |
| 溶液B | 15ml |
| 溶液C | 50ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,4℃保存,其中试剂A需-20℃保存,有效期半年。
使用方法:
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
一、酶液提取
1.细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):酶提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL酶提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200 W,超声3秒,间隔10秒,重复30次);15000g 4℃离心10分钟,取上清,置冰上待测。
2.组织:按照组织质量(g):酶提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1 g组织,加入1mL酶提取液),进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10分钟,取上清,置冰上待测。
二、 测定操作步骤
1.分光光度计预热30分钟以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。
2.取出试剂A,临用前向试剂瓶中加入5mL蒸馏水,充分溶解备用,制备成溶液A工作液(用不完的溶液A仍需-20℃保存)。
3.样本测定(在EP管中依次加入下列试剂):
| 试剂名称 | 对照管(μl) | 测定管(μl) |
| 样本 | 50 | 50 |
| 蒸馏水 | 200 | 0 |
| 溶液A工作液 | 0 | 200 |
| 溶液B | 250 | 250 |
| 迅速混匀,放入37℃准确水浴30分钟 | ||
| 溶液C | 1000 | 1000 |
| 充分混匀,400nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定-A对照。每个测定管需设一个对照管。 | ||
三、酶活性计算公式
标准条件下测定的回归方程为y=0.00543x -0.0027;x为标准品浓度(nmol/mL),y为吸光值。
注:V反总:反应总体积,0.5mL;V样:反应中样本体积,0.05mL;V样总:加入酶提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万;T:反应时间,30分钟。
1.按照样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:每mg 组织蛋白每分钟产生1nmol对-硝基*(代"*")酚定义为一个酶活力单位。
β-GAL活力(nmol/min/mg prot)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(V样×Cpr)÷T=61.39×(ΔA+0.0027)÷Cpr
如果需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。
2.按照样本鲜重计算:
酶活性定义:每g组织每分钟产生1nmol对-硝基*(代"*")酚定义为一个酶活力单位。
β-GAL活力(nmol/min/g鲜重)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(W×V样÷V样总)÷T=61.39×(ΔA+0.0027)÷W
3.按细菌或细胞密度计算:
酶活性定义:每1万个细菌或细胞每分钟产生1nmol 对-硝基*(代"*")酚定义为一个酶活力单位。
β-GAL活力(nmol/min/104cell)=[(ΔA+0.0027)÷0.00543×V反总]÷(500×V样÷V样总)÷T=0.123×(ΔA +0.0027)
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亚甲基蓝 Oxalacetic acid 7220-79-3
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