RecJf核酸外切酶厂家现货

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百奥莱博专业生产供应RecJf核酸外切酶厂家现货，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：RecJf核酸外切酶厂家现货
编号：BTN130629
英文名：RecJf Exonulease
产地：国产|进口
规格：1000U
RecJf作用于单链DNA，沿5´→3´方向催化去除单磷酸脱氧核苷酸。RecJf与麦芽糖结合蛋白(MBP)融合表达。其催化特性与野生型RecJ相同。与MBP的融合，增强了RecJf的溶解度。当底物为5´端突出了22个核苷酸的DNA时，经RecJf酶切后可得到含有以下三种末端的混合产物：平齐末端、5´突出末端(1-5个核苷酸)和5´凹陷末端(1-8个核苷酸)。RecJf发挥活性时无需5´末端磷酸化。

产品特点：
1．特异性5´→3´单链DNA核酸外切酶；
2．从DNA上切下单磷酸脱氧核苷酸。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期半年。

活性定义：1单位指在50μl反应体系中，37℃条件下，30分钟内产生0.05nmol可溶于TCA的脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。

除RecJf核酸外切酶厂家现货外，我公司正在打折促销以下产品：
BOC-D-高*丙*酸 Procyanidin 82732-07-8
SJ0690 D2000
低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)检测试剂盒(Sol比色法)   50T|100T
ARB10314 人切除修复交叉互补基因1(ERCC1)酶联免疫定量检测 Human excision repair cross-complementation group 1,ercc1 ELISA KIT
3-*基*乙酮 Triethyl phosphite 99-03-6
F040305 猪IgG抗原 Pig IgG
BTN101112 柱式水样DNAOUT Column Water DNAOUT
幽门螺旋杆菌染色液(亚甲蓝法)   100ml
A3308-22 驴血清 100ml|500ml
ARB12226 大鼠血红素氧合酶2(HO-2)elisa检测 Rat heme oxygenase 2,ho-2 ELISA KIT
ARB12425 大鼠轴突生长诱向因子1(Ntn1)Elisa方法检测 Rat netrin-1,ntn1 ELISA KIT
BL0875 羊抗BSA免疫血清 0.5ml
9003-98-9 DnaseI(2000u/mg) 
ARB11875 人糖磷脂酰肌醇(GPI)定量分析 Human glycophosphatidylinositol,gpi ELISA KIT
叔丁氧羰基-L-谷*酸5叔丁脂 Antipyrine 13726-84-6
健那绿 D-Glucuronic acid 2869-83-2
RecJf核酸外切酶厂家现货关键词：BTN130629,RecJf核酸外切酶,RecJf Exonulease

BL0873 羊抗鸡IgG免疫血清
BTN120644 聚乙二醇 PEG
Hanks平衡盐溶液(含酚红)  1×HBSS|5×HBSS 500ml
ELISA稀释液   100ml
1-(3-二甲基胺丙基)-3-乙基碳二亚胺 CDI 1892-57-5
BL0821 HRP标记兔抗鸡IgG抗体
ARB10966 人免疫球蛋白E Fc段受体Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)elisa测定使用说明书 Human receptor Ⅱ for the fc region of immunoglobulin e,fcεrⅡ ELISA KIT
PY01-113  胃蛋白酶(1:3000)含糖  250克  
变性蛋白裂解液   50ml|100ml
BL0828 HRP标记兔抗亲和素抗体
F060101 艾滋抗原
D-山梨醇 Fucoidan 50-70-4
ARB14231 人髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)Elisa分析 Human Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein (MOG) ELISA Kit.
ARB11275 人骨桥蛋白(OPN)Elisa方法检测 Human osteopontin,opn ELISA KIT
ARB13224 小鼠脱*表雄酮(DHEA)酶免分析 Mouse dehydroepiandrosterone,dhea ELISA KIT
RecJf核酸外切酶厂家现货关键词：BTN130629,RecJf核酸外切酶,RecJf Exonulease


·PCR法DNA探针地高*(代"辛")标记试剂盒
编号：BTN90604C
英文名称：PCR DNA Labeling Kit(Digoxin)
规格：5次
PCR标记的原理是用带标记的dNTP进行PCR，最后得到的PCR产物将带有标记，可以直接用于杂交试验。其原理示意图如下：


产品特点：
1.一站式，本试剂盒提供经过优化的试剂，不需要用户自己摸索。
2. 足够10次50μl体系的常规PCR(用于制备标记反应的模板和设置对照反应)和5次50μl体系的标记反应。
3.一次标记可以得到μg级的双链DNA探针或约700ng的单链DNA探针，足够多次杂交实验用。
4. 既可用于制备双链探针，也可以用于单链探针。
5. 90604A需自备含标记核苷酸的dNTP，90604B和90604C分别含生物素和地高*(代"辛")标记的底物。自备的标记包括fluorescein-dUTP、hydroxycoumarin-dUTP、resorufin-dUTP和aminoallyl-dUTP等。
6. 本产品得到的探针参入率一般为4-5%(每100个核苷酸中有4-5个将带有非同位素标记)，有效降低了空间阻碍，检测效果最佳。
7.可以用于Southern和Northern Blot、原位杂交、菌落和斑点印迹杂交等分析。

试剂盒组成：

 

成分	规格
2×标记专用PCR Mix	500μl
dNTP，2mM each	50μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP	25μL(仅B有)
含DIG-11-dUTP的dNTP	25μL(仅C有)
超纯水	1ml
说明书	1份

注：标记专用PCR Mix不含dNTP。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：准备工作
1. 按常规的方法设计PCR引物，使探针长度在400-800bp之间。过短则标记参入少，探针杂交信号强度减弱；过长则非特异杂交增加，背景变强。
2. 根据PCR引物优化PCR条件。
3. 由于标记的dNTP比较珍贵，所以本试剂盒不推荐以基因组DNA或其他复杂DNA为模板直接进行PCR标记，而是建议采取下述的两步法标记来提高成功率，即先制备非标记PCR产物，再以之为模板制备标记的PCR产物。
二：非标记PCR产物的制备
4. 设置50μL PCR的反应体系：

成份	用量
2×标记专用PCR Mix	25μl
dNTP，2mM each	5μl
自备的探针引物一(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的探针引物二(10pmol/μL)	1μL(10μM)
自备的模板DNA	1μg基因组DNA或1ng质粒DNA
超纯水	补到50μL

5. 按已经优化的PCR参数进行PCR。
6.电泳检测和胶回收所需的PCR产物，并定量。用10 pmol引物一般能得到1μg左右的PCR产物(具体取决于PCR产物的长度)。注意：最好采取胶回收而不是PCR回收以避免残留引物干扰后续的标记PCR。
三：标记PCR反应(最好做一个不加标记的对照用于定量)
说明：在设置下面反应时，如果加一种引物，就得到单链标记的PCR产物；如果加两种引物，则得到双链标记的PCR产物。由于双链PCR探针在杂交前虽然要变性成单链后使用，但杂交时变性的双链彼此还会复性，这种复性会与探针-靶DNA杂交反应相竞争，降低杂交效率，因此强烈推荐使用单链标记的DNA探针。

成份	样品	对照
2×标记专用PCR Mix	25μl	25μl
含Biotin-11-dUTP的dNTP或 含DIG-11-dUTP的dNTP或 自备的含其他标记dUTP的dNTP	5μl	不加
dNTP，2mM	不加	5μl
双链标记：探针引物一和引物二 单链标记：探针引物一或引物二	每种50 pmol 一种50 pmol	每种50 pmol 一种50 pmol
上步胶纯化所得PCR产物 (单链标记可用100ng)	10 ng	10 ng
超纯水	补到50μL	补到50μL

 注意：本试剂盒提供的dNTP混合物中，标记底物与非标记底物的比例已经进过优化，如果自备标记dUTP，其与dTTP的最佳比例需要优化，标记不同，比例不同。对DIG-11-dUTP，最佳比例1：3；对BrdUTP，最佳比例为1：1。
7. 按第5步的PCR参数进行标记PCR，但需要进行下列修改：一是循环数增加到35-55个循环。由于模板为纯化后的PCR产物，探针对扩增长度完整性要求不高(长度不均的探针由于能形成网络结构，效果反而更好)，所以可以增加循环数；二是延伸时间增加15秒，因为标记dUTP参入到DNA的速度比常规的dTTP慢；三是降低复性温度5-7℃，因为标记核苷酸参入到DNA后，新模板的Tm值将降低。
8. 标记探针的定量：取标记反应和对照反应的产物1-5μl，在琼脂糖凝胶上跟浓度已知的DNA marker一起电泳，并判断探针的浓度。由于标记反应的PCR产物中额外带有非同位素的配体(生物素，地高*(代"辛")等)、因此其泳动速度将慢于非标记PCR产物(但同位素标记不能用此法)。
 注意：如果扩增的是单链DNA探针，其结合EB的能力远低于双链DNA(EB是嵌合到双链碱基对之间的，而单链DNA没有碱基对，只有一些局部区域折叠形成的有限双链区，因此能结合的EB很少)，因此EB染色的强弱不能准确反应DNA的浓度，可以采用银染定量(跟marker比较)。一般100ng模板按上述条件经过单链PCR扩增可得到700ng左右探针。
9. 剩余的PCR标记产物可以不经过纯化，直接加入(对单链PCR探针)杂或加热变性并急冷后加入(对双链PCR探针)到杂交液中使用。如果暂时不用请放-20℃长期保存。如果需要纯化，请使用乙酸铵/乙醇沉淀法。

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