甲酰胺嘧啶-DNA糖基化酶(FPG)供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应甲酰胺嘧啶-DNA糖基化酶(FPG)供应，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：甲酰胺嘧啶-DNA糖基化酶(FPG)供应
编号：BTN130644
产地：国产|进口
规格：500U
品牌：百奥莱博
Fpg(甲酰胺嘧啶[fapy]-DNA糖基化酶)也称作8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶(OGG)，既有N-端糖基化酶活性也有AP-裂解酶活性。N-端糖基化酶活性可以切下双链DNA上受损的嘌呤碱基，产生一个脱嘌呤(AP)位点。AP-裂解酶活性可以切割AP位点的3´或5´端，因此可以除去AP位点，产生一个具有3´和5´磷酸的碱基缺口。被Fpg识别并切除的受损碱基包括：7,8-二羟基-8-氧代鸟嘌呤(8-氧代鸟嘌呤)、8-羟基腺嘌呤、fapy-鸟嘌呤、甲基-fapy-鸟嘌呤、fapy-腺嘌呤、黄曲霉毒素B1-fapy-鸟嘌呤、5-羟基-胞嘧啶和5-羟基尿嘧啶。

产品特点：
1．单细胞凝胶电泳(彗星试验),彗星试验的推荐稀释倍数,1:10³～10⁴；
2．碱性析出；
3．碱解旋；
4．修饰的切刻平移技术。

产品组成：

 

成份	规格
Fpg(8000U/mL)	62.5μL
10×Buffer	1mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指在10μl反应体系中，37℃ 1小时，能够切割1pmol含单个与胞嘧啶配对的8-氧代鸟嘌呤的34bp寡核苷酸双链所需要的酶量。


除甲酰胺嘧啶-DNA糖基化酶(FPG)供应外，我公司正在打折促销以下产品：
14306-25-3 Phytic acid sodiu*(代"m") salt hydrate 植酸*
305-53-3 Sodium iodoacetate 碘代乙酰胺*盐
DNA转染试剂 
ARB10460 人生长激素结合蛋白(P)酶联免疫定量检测 Human growth hormone binding protein,p ELISA KIT
ARB14054 猴载脂蛋白A1(Apo-A1)定量分析 Monkey apoprotein a1,apo-a1 ELISA KIT
*基琼脂糖凝胶CL-4B Water-DEPC treated
ARB12339 大鼠补体3A(C3A)含量测试 Rat complement fragment 3a,c3a ELISA KIT
碳酸*水溶液(1%)   500ml
聚乙*(代"烯")醇 Sodium 1-decanesulfonate 9002-89-5
KP201 Pfu PCR MasterMix
ARB12431 大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)elisa检测说明书 Rat bone morphogenetic protein 7,bmp-7 ELISA KIT
Taq DNA Polymerase 
ARB11162 人疟原虫裂殖子表面蛋白1(MSP-1)酶联免疫定量检测 Human merozoite surface protein-1 ,msp-1 ELISA KIT
ARB11747 人嗜酸性白血球相关之RNA水解酵素家族成员1(EAR1)定量分析 Human eosinophIL-associated ribonuclease a family member 1,ear1 ELISA KIT
齐墩果酸 G418 sulfate 508-02-1
ARB13805 豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)含量测试 Guinea pig transforming growth factor β1,tgf-β1 ELISA KIT
Clarke固定液   500ml
甲酰胺嘧啶-DNA糖基化酶(FPG)供应关键词：FPG,Formamidopyrimidine DNA Glycosylase,甲酰胺嘧啶-DNA糖基化酶,BTN130644,甲酰胺嘧啶-DNA糖基化酶(FPG)


·Flemming固定液
编号：BTN140410
英文名称：Flemming Fixative Solution
规格：250mL
本产品为铬酸-锇酸-醋酸混合固定液，现配现用。该固定液对脂肪组织既有固定作用，又有染色作用，对有髓神经纤维也有固定兼染髓鞘的作用。该液不适合做HE的染色。应用该液固定的组织，切片不能太大过厚，一般1-2毫米。固定时间1-3天，后经水洗，保存于80%酒精中。可用于各种植物组织的固定。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·Cre重组酶
编号：BTN130665
英文名称：Cre Recombinase
规格：50U
Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶，催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子，Cre介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡。loxP识别元件是一个34bp序列，其两端是两个13bp的反向重复序列，中间是起定向作用的8bp间隔区。重组产物根据 loxP位点的位置和相对方向而不同，两个含单loxP 位点的DNA将被融合。两个正向重复 loxP位点间的DNA将以环状形式切割，而两个反向loxP位点间的DNA序列将被翻转。


产品用途：
➤ 两个loxP位点之间DNA的切割。
➤含loxP位点DNA分子的融合。
➤ loxP位点之间DNA序列的翻转。

产品组成：

成分	规格
Cre重组酶，1000 U/mL	50μl
10× Reaction Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指在50μl反应体系，37℃条件下，30分钟使0.25μg的pLox2+对照DNA产生最大位点特异性重组所需要的酶量。最大重组可以通过琼脂糖凝胶电泳分析或通过反应物转化后行*苄抗性平板筛选。

热灭火：70℃加热10分钟。

使用举例：
1．按下列组份配制反应液：

DNA溶液	-
10×Reaction Buffer	5μl
Cre重组酶	1μl(1U)
超纯水	Up to 50μL

2．37℃孵育30分钟。
3．70℃孵育10分钟，灭活酶活。

注意事项：
1．建议进行琼脂糖凝胶电泳前，将Cre重组酶反应混合物于70℃温育10分钟。
2．由于Cre重组酶反应是一个动态平衡过程，用loxP2+对照底物仅有20-30%发生重组。由于重组产物的量较少，故*化乙锭染色后呈现微弱条带，同时伴有底物染色强度相应减弱。
3．延长温育时间不会提高重组效率，相反，还可能导致大分子量重组产物的生成。
4．反应中增加Cre重组酶量将形成loxP依赖性Cre-DNA复合物，从而抑制重组反应。


甲酰胺嘧啶-DNA糖基化酶(FPG)供应关键词：FPG,Formamidopyrimidine DNA Glycosylase,甲酰胺嘧啶-DNA糖基化酶,BTN130644,甲酰胺嘧啶-DNA糖基化酶(FPG)


·一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(低pH)
编号：BTN81212C
英文名称：One-Stop Protein Native PAGE Pack(C)
规格：30次
非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(Native PAGE)是目前电泳法分离活性蛋白的主要方法之一，跟SDS-PAGE根据分子量大小分离蛋白质不同，它是根据蛋白质分子大小、形状、电荷密度三个主要参数分离蛋白质。由于蛋白质的pI各不相同，所以对不同蛋白质需要选用具有不同pH的电泳体系。单独配制不同pH的Native PAGE电泳胶十分繁琐，为此本公司开发了本产品。

产品特点：
1．即开即用，不需单独准备各种成分，十分方便。还免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺
2．非变性，电泳过程中蛋白质保持天然的构象和亚基之间的相互作用，得到的蛋白质一般都具有生物活性(而SDS-PAGE得到的蛋白没有活性)。
3．可用于分析蛋白质和DNA或RNA的相互作用、蛋白修饰、蛋白构型改变、回收有活性蛋白质等试验。
4．电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
5．提供具有3种不同pH的缓冲液套装，便于客户选择最适合的缓冲液体系。

产品组成：

成分	规格
丙*(代"烯")酰胺干粉	60g
甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉	3g
TEMED	1.5ml
过硫*(代"酸")铵干粉	1g
高中低缓冲液套装选一	ABC之一(见下)
说明书	1份
高pH缓冲液套装(只有BTN81212A有此成分)
高pH浓缩胶配胶液(pH6.7)，4×	100ml
高pH分离胶配胶液(pH8.9)，4×	200ml
高pH电泳液(pH8.3)	10L(干粉)
高pH上样液，5×	1ml
中pH缓冲液套装(只有BTN81212B有此成分)
中pH浓缩胶配胶液(pH5.5)，4×	100ml
中pH分离胶配胶液(pH7.5)，4×	200ml
中pH电泳液(pH7.0)干粉A	55.2g
中pH电泳液(pH7.0)干粉B	10g
中pH上样液，5×	1ml
低pH缓冲液套装(只有BTN81212C有此成分)
低pH浓缩胶配胶液(pH6.7)，4×	100ml
低pH分离胶配胶液(pH4.3)，4×	200ml
低pH电泳液(pH4.5)	10L(干粉)
低pH上样液，5×	1ml

注：高、中和低pH缓冲液套装里面均含100mL浓缩胶配胶液、200mL分离胶配胶液、10 L电泳液(干粉)和1mL上样液，只是pH不同。

储存条件：常温运输和保存(上样液需-20℃保存)，保存期为一年。

使用方法：
如何选择缓冲液?
高pH浓缩胶，高pH分离胶，高pH电泳液和高pH上样液一定要配套使用。中pH和低pH系列也是如此，绝不能高pH的成分跟其他pH的交叉使用。选择适当pH的缓冲液(包括上样液，电泳液，配胶液等)对蛋白质非变性PAGE非常重要，缓冲液的最佳pH又跟目的蛋白质的pI值密切相关。如果pH远离pI，则蛋白质分子带电多(电荷密度大)，电泳速度快，分辨率高。但过酸过碱又容易使蛋白质结构变性，失去活性，所以最佳pH条件就是在电泳分辨率和维持活性之间寻找平衡，需要针对每种蛋白质进行摸索或通过滴定曲线来确定，没有通用的电泳缓冲体系。由于有近半数的蛋白质pI在4-6.5，所以在不知道目标蛋白的pI时，可以先选用高pH缓冲系统。

一、配制分离胶
1．确定浓度。对分子量在100Kd以上的蛋白质，可选用3-5%的胶；对分子量在20-150KD之间的蛋白质，可选用5-10%的胶；对分子量在10-80KD之间的蛋白质，可选用10-15%的胶。对未知样品，建议使用7.5%的胶。
2．配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵)：按每0.1克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL去离子水的比例配制10%的APS溶液，该溶液可以在4℃存放一周。
3．配制30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液:在本产品提供的装有60克丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水和3g甲叉双丙*(代"烯")酰胺,充分摇晃直到溶解(约需10-20分钟)即得200mL 30%丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液。此溶液最好在一个月内用完，必须4℃避光保存。
4．配10mL分离胶(如果配制其他体积,请按比例调节各成分用量):在一个25mL的三角瓶中，先加入4.2mL去离子水、3.3mL 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19：1)溶液和2.5mL 4×分离胶配胶液。
5．摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应，不去除的话将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
6．加入50μL新配制的10%APS和10μL TEMED(这是配制10mL胶的用量，配制更大体积的胶则按比例增加)，迅速摇匀后倒胶。注意：如果购买的是低pH缓冲系统，由于在低pH缓冲液中PAGE聚合速度降低，所以需要增加上述两成分的用量。
7．在胶面距离顶部1-1.5 cm的时候停止灌胶。然后覆盖一层1-5 mm厚的水，使胶顶部液面平整。由于比重不同，水和丙*(代"烯")酰胺溶液不会混合。
8．室温聚合30-60分钟后，用1×分离胶配胶液洗涤凝固的胶的顶部，待用。

二、配制浓缩胶(浓缩胶可以提高分辨率，适合于成分复杂的样品，一般使用浓度为4%。使用浓缩胶时蛋白质泳动速度主要跟其尺寸和形状相关。因浓缩胶pH跟分离胶pH不同，蛋白质可能会发生聚合和沉淀。对成分单一的样品，可以不用浓缩胶，此时蛋白的泳动速度主要跟其电荷密度，尺寸和形状相关。)
1．配10mL浓缩胶(如果配制其他体积,请按比例调节各成分用量):在一个25mL的三角瓶中，先加入6.2mL去离子水、1.3mL 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19：1)溶液和2.5mL 4×浓缩配胶液。
2．摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应，不去除将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
3．按上表用量加入50μL 10%APS和15μL TEMED(这是配制10mL胶的用量，配制更大体积的胶则用量需按比例增加)，迅速摇匀后在已经凝固的分离胶上倒胶。
4．在液面达到顶部时停止灌胶，插入梳子。
5．室温聚合30-60分钟，拔出梳子，用1×电泳液冲洗加样孔。

三、电泳
1．将凝胶板固定在电泳装置上，往上槽和下槽加入足够1×电泳液。注：本产品提供10升的三种不同pH的电泳液干粉中的一种，低PH和高PH值电泳液用前需将所有干粉溶解在1 L水中得10×电泳液，可以室温放置，用时再稀释成1×电泳液。一般不需要再调节pH，但保险起见，可以用pH试纸测试一下1×电泳液。高中低pH电泳缓冲液的pH分别是8.3，7.0和4.5。
 注意：中pH值的电泳液干粉只能配1x电泳液，否则不溶解。称取中pH电泳液(pH7.0)干粉A，5.52g,中pH电泳液(pH7.0)干粉B 1g混匀，加去离子水至彻底溶解，调PH7.0，定容至1L。客户根据可实际需要量按比例增减。
2．连接电极。如果浓缩胶和分离胶的pH高于目标蛋白pI，目标蛋白将带负电荷并向阳极移动，可以按标准的SDS-PAGE方法接通电极(上阴极下阳极)；如果浓缩胶和分离胶pH低于目标蛋白pI，目标蛋白将带正电荷并向阴级移动，此时应该下阴极上阳极。
3．300V预电泳直到电流不再降低(约需要30分钟)以去除残留过硫*(代"酸")铵。
4．换电泳液。
5．在液体蛋白质样品中加入5×上样液(16μl液体样品加4μL上样液)后上样。0.75 mm厚的胶可以上10μl，1.5 mm厚的胶可以上20μl。在未用加样孔中也要加1×上样液以防有样品的空道的样品扩散。注意：如果用考染检测，每个孔的蛋白最好在50-100μg总蛋白，如果银染则只需要1ug即可。样品如果是蛋白质沉淀，可用1×上样液直接溶解蛋白质沉淀后再上样。蛋白质溶液或沉淀中不能含有能够改变上样液pH的残留成分(如蛋白质沉淀剂TCA)，用前最好用pH试纸测试一下，不在上样液的pH范围时就用酸或碱调到正常范围。大量样品可用透析法调pH。
6．上样自备的天然PAGE蛋白质标准或等电电泳的标准品(如果有的话)。
7．用15 mA(对0.75 mm厚的胶)或30mM(对1.5mm厚的胶)的电流电泳直到染料移动到分离胶底部。微型胶一般需要1-2小时。注意：电泳过程最好在冷室或有冷却系统，以免电泳产热使蛋白质变性。
8．终止电泳，取出凝胶进行后续的实验处理(如染色或酶活性检测)。

北京百莱博科技有限公司专业生产工具酶产品，欢迎来电咨询选购甲酰胺嘧啶-DNA糖基化酶(FPG)供应。