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- P2825
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- 2025年12月11日
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99
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3个月
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北京诺博莱德科技有限公司
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已收到实际货物为准
蛋白银染试剂盒
产品简介：
蛋白银染试剂盒(Protein Silver Stain Kit)是一种比较快速的可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白银染染色的试剂盒，该试剂盒含有增敏步骤，可明显降低背景。其优点还在于：1、操作简单、快速；2、可用于2D凝胶的银染，并可进行后续的质朴检测；3、目的条带清晰；4、不含甲醇。Protein Silver Stain Kit与Protein Fast Silver Stain Kit相比，前者检测灵敏度更高，尤其是在检测小分子量蛋白质的时候，但后者操作速度更快。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成：
| 编号 名称 |
P2825 20T |
Storage |
| 试剂(A): Silver Fixaton buffer(5×) | 100ml | RT 避光 |
| 试剂(B): Sil ilver Stain Sensitizer(5×) | 100ml | RT 避光 |
| 试剂(C): Silver Stain | 2×250ml | RT 避光 |
| 试剂(D): Silver Stain Enhancer(25×) | 2×10ml | RT 避光 |
| 试剂(E): Silver Stain Developer(5×) | 100ml | RT 避光 |
| 试剂(F): Silver Stain Stop Buffer(10×) | 100ml | RT |
| 使用说明书 | 1份 | |
自备材料：
1.水平摇床或侧摆摇床
2.去离子水(超纯)、乙醇、冰乙酸
蛋白银染试剂盒
操作步骤(仅供参考)：
1.准备工作：以下操作以8.5×5.5cm、厚度为1.0mm的凝胶为例，以凝胶全部浸没到溶液为准，一般用量是25～50ml，对于凝胶体积较大的，各溶液的使用量需按凝胶体积比例放大。整个银染过程均应在摇床上持续摇动进行，摇床转速控制在60～70rpm。提前配制固定液，固定液A按无水乙醇:冰乙酸:去离子水=5:1:4的比例配制，固定液B按无水乙醇:冰乙酸:去离子水=1:1:18的比例配制。
2.水洗：电泳结束后，取凝胶放入去离子水中，摇床上清洗2次，每次5min。
3、固定：弃液，取凝胶放入50～100ml固定液A中，在摇床上室温摇动1h；取凝胶放入50～100ml固定液B中，在摇床上室温摇动2h至过夜；取凝胶放入50～100ml去离子水中，在摇床上室温摇动5min；取凝胶放入25ml1×Silver Fixaton buffer中，在摇床上室温摇动30min。(1×Silver Fixaton buffer，即取Silver Fixaton buffer (5×)5ml加入到20ml去离子水中，混匀，即1×Silver Fixaton buffer，一般应24h内用完。)
4、水洗：弃固定液，取凝胶放入50～100ml去离子水中清洗32次，每次10min。
6、增敏：弃液。配制银染增敏工作液，即取Silver Stain Sensitizer 5×)5ml加入到20ml去离子水中，混匀，即1×Silver Stain Sensitizer，一般应2h内用完。室温下用1×Silver Stain Sensitizer孵育凝胶2次，每次30min。立即用去离子水清洗凝胶4次，每次15min。
7、银染：配制银染工作液，即取1ml Silver Stain Enhancerl加入到24m Silver Stain中，混匀，即得银染工作液，一般应2h内用完。取凝胶入银染工作液，在摇床上室温摇动30min。
8、水洗：弃液，在摇床上用去离子水清洗凝胶4次，每次4min。
9、显影：配制银染显影工作液，即取Silver Stain Developer(5×)5ml加入到20ml去离子水中，混匀，即1×Silver Stain Developer，一般应30min内用完。清洗凝胶后，立即置于1×Silver Stain Developer中，室温孵育5～10min，直至蛋白条带清晰可见。一般显色30s后就会出现棕色沉淀，继续显影2～3min，亦可延长至5min以上，如果显影效果不佳，可重新更换1×Silver Stain Developer继续显影。
注意事项：
1、背景过深：①显色时间过长；②洗涤不充分；③凝胶中残留物质未去除干净；④去离子水的纯度过低。
2、蛋白条带较浅：①蛋白的半胱氨酸含量过低；②银染后水洗时间过长；③蛋白量较低；④固定后的洗涤时间不够，导致乙酸残留。
3、凝胶上出现杂质或非蛋白的印迹：①凝胶没有被充分浸没，应加入足量溶液；②容器没有清洗干净；③凝胶接触金属物质；④指纹或其他压迹。
4、本染色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。
蛋白银染试剂盒
有效期： 3个月有效。
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【求助】新手 请问western-blot测NF-KB、FLT3是用总蛋白提取试剂盒吗
xungufeng820 各位大侠： 小弟是新手，师兄们也没做过的，不知western-blot测NF-KB、FLT3是用总蛋白提取试剂盒吗？急盼回复！万分感谢！ snowxyh 我用过总蛋白提取试剂盒提蛋白，之后western-blot检测NF-KB，但是感觉这样得到的蛋白浓度很稀，需要比较大的上样量才能检测出来，个人感觉，还是用传统的细胞匀浆裂解，离心提取上清，这样得到的蛋白浓度大，做试验结果好
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