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原核蛋白表达纯化
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福因德科技
高品质的重组蛋白,可以有效地节约您的成本和科研时间!
福因德科技基于抗体生产需求建立的高效重组蛋白表达纯化平台,拥有多种真核原核表达系统可供选择,为您提供不同需求的实验服务。凭借专业的蛋白优化表达技术,还可为您提供高纯度高活性的蛋白定制服务。
将目的基因插入合适载体后导入大肠杆菌用于表达大量蛋白称为原核表达。这种方法在蛋白纯化、定位及功能分析等方面都有应用。大肠杆菌用于表达重组蛋白有以下特点:易于生长和控制;成本低;背景信息清楚;周期短。 福因德科技(Frdbio)原核表达服务优势: ①有多种表达系统供客户选择,多种纯化策略综合运用,保证蛋白纯度及活性; ②先进的生物信息分析系统帮客户设计设计选取不同结构域及位点; ③根据物种不同做密码子优化,定点突变等修饰,力求达到最佳表达量和表达状态。 服务要求 ①客户需提供含有目的基因片段的质粒或菌液,或者目的基因所在组织的cDNA,(注:客户若提供的是质粒,则需注明质粒的载体名称及抗性,若提供的是菌液则需注明载体名称,抗性及菌株名称;) ②提供基因的基本信息包括DNA序列或氨基酸序列; ③注明所需表达蛋白的用途和具体要求。 服务基本流程 ①项目评估:项目启动前根据客户项目要求作一个简单的评估,同时验证客户所提供的材料和信息的准确性; ②方案设计:为客户设计一个客观的技术实施方案,并需得到客户的确认; ③项目实施: Ø 载体的构建; Ø 蛋白的小量诱导检测; Ø 大量诱导表达蛋白,并优化筛选蛋白表达方案; Ø 结合各种策略优化蛋白的纯化方案并大量纯化蛋白; Ø 对纯化获得的蛋白进行后处理包括透析及浓缩,浓度测定,活性分析等,并出具质检数据; ④项目数据分析整理; ⑤出具实验报告; 服务报告内容 项目实验详细的实验报告:所表达蛋白核酸信息、氨基酸信息、所用引物、酶切位点、标签、SDS-PAGE图片、实验所依据进行的操作方案、试剂、蛋白浓度等。 提交实物 提交整个项目的最终材料,包括: 1、包含目的基因的质粒; 2、包含目的基因质粒的DH5a菌液; 3、包含目的基因质粒的表达菌液; 4、纯化得到的蛋白(约5mg)。
Ø 重组蛋白抗原介绍:
重组蛋白抗原制备常用的有原核表达系统、酵母表达系统、真核表达系统,真核表达系统主要有昆虫细胞-杆状病毒表达和哺乳动物细胞表达系统;这种方式表达制备的抗原一般来说量比较大,并且在构建的时候一般会加上一个融合标签便于下游纯化,常用的标签主要有GST、6*His、Myc、MBP、Flag、Fc等,根据下游对蛋白质的使用需求,如果不需要标签可以切除,如果不切除标签,后期制备的抗体的时候可以用标签蛋白去中和高免血清。重组蛋白与天然蛋白相比较,在构象和修饰和蛋白活性上跟天然提纯蛋白还是有差距的,一般来说真核比原核在蛋白构象和修饰上又进步了一大截,更加接近于天然蛋白;这类抗原制备的抗体一般适合于ELISA、免疫层析和免疫比作抗体的制备,只不过制备的过程中需要用实体标本交车验证。
福因德科技(FrdBio)提供重组蛋白制备服务和重组蛋白制备过程中需要的所有试剂
您可能还会需要以下其他服务:
蛋白纯化服务:
拥有先进的的蛋白纯化仪器可以帮助客户获得各种高纯度的重组蛋白;
多肽合成服务:
一流的合成和纯化设备,更有经验丰富的技术人员为您提供多肽设计服务;
单克隆抗体制备:
可为科研客户和医药诊断企业提供不同需求抗体,可提供工业级腹水生产和抗体纯化;
多克隆抗体制备:
多种动物可供选择,多种类型抗原可供制备;抗体效价高,普遍高于同行1-2个数量级;
免疫学实验服务:
协助客户对抗体应用进行全方位技术支持、协助客户开发免疫检测试剂盒;
抗体纯化服务:
多种纯化系统供客户选择:离子盐析沉淀法,亲和纯化(ProteinA、ProteinG和ProteinL)及抗原配体特异性纯化;
抗体修饰服务:
包括片段化、生物素标记、HRP标记、FITC偶联及Cy3标记…
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