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低温
- 英文名：
酵母转化试剂盒
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现货
酵母感受态细胞的制备：
1. 活化菌种。把-80℃保存的菌种在固体YPDA培养基上划线，在30 ℃培养2-4天。
2. 挑取酵母单菌落在固体YPDA培养基上划3-5 mm的短线，在30 ℃培养2-4天。待酵母单菌落长至2 mm长时，接种。
3. 首先把酵母细胞接种到3 ml液体YPDA培养基中，30 ℃过夜培养。
4. 第二天转接到含有30 ml液体YPDA培养基的三角瓶中继续培养，待OD600到0.4-0.5范围内。收集细胞，1000 g，离心5 min, 去上清。
5. 沉淀用30-50 ml的无菌的去离子水悬浮。1000 g，离心5 min，去上清。
6. 沉淀用合适体积的100 mM LiAc悬浮（30 ml的酵母菌最多用不超过1 ml的100 mM LiAc悬浮，通常100 μl的酵母细胞用于转化一个质粒，即一个反应）。
7. 把酵母细胞的悬浮液分装到1.5 ml的离心管中，每管分装100 μl，用于转化一个质粒即一个反应。1000 g，离心5 min，去上清。制备好的感受态细胞备用。
上海联硕生物科技有限公司
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文献和实验・ Yeast Transformation (Gietz Lab) LiAc/SS-DNA/PEG Transformation ・ Yeast Transformation (Breeden Lab) LiAc method ・ Large-Scale Yeast Transformation (Yale Yeast Analysis Center) Detailed
This protocol is generalized and not to be considered optimal for all strains, conditions, and applications. Some aspects of this protocol may have to be modified significantly to suit your particular needs. It works for simple transformation
Modified Yeast Transformation Inoculate cells from an overnight culture into 50 ml YEPD and incubate at 30°C with shaking. Typically, add 0.1 to 0.2 ml saturated culture in the evening to get an of OD600 = 1 to 2 the next morning. Transfer
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