半胱胺酸蛋白酶蛋白3Caspase-3

英文名称Caspase-3
中文名称活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗体
别    名Caspase-3 P22亚基；apopain casp3；caspase-3；凋亡相关半胱氨酸蛋白酶；Caspase3；CPP32；cpp32b；半胱氨酸蛋白酶CPP32；人半胱氨酸蛋白酶CPP32 mRNA亚型αCDS PARP完全解理；蛋白酶；SCA 1；SCA1解理SREBP活性；1；casp3 _阎罗王；人；caspase-3；CASP 3apopain；蛋白质；阎王解理SREBP活性；1；Sca-1。
文献有引用：

背景：
半胱氨酸蛋白酶家族的caspase家族在细胞凋亡中起着关键的作用。半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3是胱天蛋白酶家族成员中最广泛研究的凋亡蛋白。Caspase 3被合成为非活性前体酶，该酶在通过自身蛋白酶水解和/或由其它上游蛋白酶（例如Caspase 8, 9和10）裂解的细胞中进行处理。Caspase 3的处理形式由大（17kDa）和小（12kDa）亚基组成，它们共同形成活性酶。在ASP28 Ser29和ASP175 Ser176中裂解Caspase 3。活性Caspase 3蛋白水解裂解并激活其他胱天冬酶（例如胱天蛋白酶6, 7和9），以及细胞中的相关靶（例如PARP和DFF）。该基因的选择性剪接导致两个转录变体，编码相同的蛋白质。在免疫组织化学研究中，半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达已被广泛存在，但不存在于所有细胞类型中（例如，通常在皮肤上皮细胞、肾近端小管和集合管中报道）。Caspase 3水平的差异已被报道在短寿命性质的细胞（如生发中心B细胞）和长寿命的细胞（如地幔B细胞）中。Caspase 3是主要的半胱氨酸蛋白酶，参与了淀粉样蛋白β4A前体蛋白的裂解，这与阿尔茨海默病的神经元死亡有关。
与Caspase-3亚基p17和前体反应。

功能：
参与激活细胞凋亡的半胱氨酸天冬氨酸酶级联反应。在凋亡开始时，它在216’ASP-γ-GLY-217’键上裂解聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）。裂解和激活甾醇调节元件结合蛋白（SREBPS）之间的基本螺旋-环-螺旋-亮氨酸拉链域和膜附着域。裂解并激活cas-6，- 7和- 9。参与了亨廷顿的解理。通过RET切割触发交感神经元的细胞粘附。

Subunit：
异四聚体，由两个反平行排列的异源二聚体组成，每一个由17 kDa（p17）和12 kDa（p12）亚基构成。与BiC6/布鲁斯互动。

亚细胞定位：
细胞质。

组织特异性：
高表达于肺、脾、心、肝、肾。脑和骨骼肌中等水平，睾丸低。在许多细胞系中也发现，免疫系统中细胞的最高表达。

翻译后修饰：
颗粒酶B、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶6、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶8和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶10裂解产生两个活性亚基。前肽的额外加工很可能是由于活化蛋白酶的自催化活性。Caspase-7蛋白酶亚基和Caspase-3大亚基之间也存在活性异二聚体，反之亦然。
S-亚硝基化在其催化位点半胱氨酸在未刺激的人细胞系中，并且在激活Fas凋亡途径时脱硝，与细胞内caspase活性的增加相关。因此，Fas不仅激活Caspase-3的活性，而且还通过刺激其活性部位巯基的脱氮作用来激活胱天蛋白酶酶原。

相似性：
属于肽酶C14A家族。

瑞士：
P42574

Gene ID：
八百三十六

数据库链接：
Enter Z基因：836人
Entrez Gene：12367只老鼠
Entrez Gene：397244头猪
Entrez Gene：100008840只兔子
Entrez Gene：25402只老鼠
Omim：600636个人
SwissProt：P42574人
SwissProt：P7067小鼠
SwissProt：Q95ND5猪
SwissProt：Q8MJC3兔
SwissProt：P55 213大鼠
Unigne：141125人
Unigene：34405只老鼠
Unigene：10562只老鼠


重要注意事项：
所提供的产品仅用于研究用途，不用于人体、治疗或诊断应用。
Caspase3广泛分布于各种不同类型的细胞中，是Caspase家族中最重要的凋亡执行者之一，激活的Caspase-3能使许多与细胞结构、细胞周期及DNA修复等相关蛋白或激酶失活，从而使细胞凋亡.

Protein:Lung(Mouse) lysate at 30ug; 
Primary: Anti-caspase-3 (bs-0081R) at 1:300 dilution; 
Secondary: HRP conjugated Goat-Anti-Rabbit IgG(bse-0295G) at 1: 5000; 
Predicted band size : 17/28 kD
Observed band size : 28 kD


Sample: 
Kidney (Mouse) Lysate at 40 ug
Primary: Anti-Caspase-3 (bs-0081R) at 1/300 dilution
Secondary: IRDye800CW Goat Anti-Rabbit IgG at 1/20000 dilution
Predicted band size: 28 kD
Observed band size: 17 kD


Sample: 
Liver (Mouse) Lysate at 40 ug
Primary: Anti-Caspase-3 (bs-0081R) at 1/500 dilution
Secondary: IRDye800CW Goat Anti-Rabbit IgG at 1/20000 dilution
Predicted band size: 28 kD
Observed band size: 28 kD


Sample: Raji Cell lysate;
Primary: Anti-Caspase-3 (bs-0081R) at 1:300; 
Secondary: HRP conjugated Goat-Anti-rabbit IgG(bs-0295G-HRP) at 1: 5000; 
Predicted band size: 17/28 kD
Observed band size: 26 kD

Sample:Liver(Sheep)Lysate at 40 ug
Primary: Anti-Caspase-3(bs-0081R)at 1/300 dilution
Secondary: IRDye800CW Goat Anti-RabbitIgG at 1/20000 dilution
Predicted band size: 28kD
Observed band size: 30kD


Tissue/cell: rat brain tissue; 4% Paraformaldehyde-fixed and paraffin-embedded; 
Antigen retrieval: citrate buffer ( 0.01M, pH 6.0 ), Boiling bathing for 15min; Block endogenous peroxidase by 3% Hydrogen peroxide for 30min; Blocking buffer (normal goat serum,C-0005) at 37℃ for 20 min; 
Incubation: Anti-Caspase-3 Polyclonal Antibody, Unconjugated(bs-0081R) 1:200, overnight at 4癈, followed by conjugation to the secondary antibody(SP-0023) and DAB(C-0010) staining


Tissue/cell: rabbit pancreas tissue; 4% Paraformaldehyde-fixed and paraffin-embedded; 
Antigen retrieval: citrate buffer ( 0.01M, pH 6.0 ), Boiling bathing for 15min; Block endogenous peroxidase by 3% Hydrogen peroxide for 30min; Blocking buffer (normal goat serum,C-0005) at 37℃ for 20 min; 
Incubation: Anti-Caspase-3 Polyclonal Antibody, Unconjugated(bs-0081R) 1:300, overnight at 4癈, followed by conjugation to the secondary antibody(SP-0023) and DAB(C-0010) staining


The figure annotation: 
The blue histogram is unstained cells
. The Orange histogram is cells stained with Rabbit IgG/FITC (bs-0295P-FITC).
The green histogram is cells stained with Rabbit Anti-Caspase-3/FITC Conjugated antibody (bs-0081R-FITC).
Controls
Positive control: HepG 2 cells
Isotype control: Cell lines treated with Rabbit IgG/FITC (bs-0295P-FITC) instead of the primary antibody to confirm that primary antibody binding is specific. 2μg in 1 00μL1 X PBS containing 0.5% BSA.

Blank control: Mouse spleen. 
Primary Antibody (green line): Rabbit Anti-Caspase-3 antibody (bs-0081R) 
Dilution: 1μg /10^6 cells; 
Isotype Control Antibody (orange line): Rabbit IgG .
Dilution: 1μg /test. 
Protocol
The cells were fixed with 4% PFA (10min at room temperature)and then permeabilized with 90% ice-cold methanol for 20 min at-20℃. The cells were then incubated in 5%BSA to block non-specific protein-protein interactions for 30 min at at room temperature .Cells stained with Primary Antibody for 30 min at room temperature. Acquisition of 20,000 events was performed.

The figure annotation:
The blue histogram is unstained cells.
The Orange histogram is cells stained with Rabbit IgG/FITC (bs-0295P-FITC).
The green histogram is cells stained with Rabbit Anti-Caspase-3/FITC Conjugated antibody (bs-0081R-FITC).
Controls
Positive control: A549 cells
Isotype control: Cell lines treated with Rabbit IgG/FITC(bs-0295P-FITC) instead of the primary antibody to confirm that primary antibody binding is specific. 3μg in 1 00 μL 1 X PBS containing 0.5% BSA.