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人源化肝脏小鼠

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      北京维通达生物技术有限公司

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    将人肝细胞移植到肝损伤的免疫缺陷小鼠体内建立的人肝嵌合小鼠模型,称为人源化肝脏小鼠(humanized liver mice)。小鼠肝脏人源化可以解决乙型肝炎病毒(HBV),丙型肝炎病毒(HCV)和疟疾(Malaria)等人类传染病缺乏动物感染模型的难题,为这些疾病的病理研究、疫苗和新药研发以及人肝细胞代谢功能的体内研究提供可靠的研究平台  维通达自主研发了VITALSTAR Tet-uPA小鼠模型,该模型借助Tet-on基因表达调控系统,可以通过强力霉素(Dox)诱导,在小鼠肝脏特异表达尿激酶(Urokinase plasminogen activator,uPA),引起小鼠肝脏损伤。是可调控的高效肝损伤模型。Tet-uPA小鼠与免疫缺陷小鼠Rag2null/γcnull或NOD/SCID/γcnul交配,获得免疫缺陷的诱导型肝损伤模型。这种小鼠通过移植人的肝脏细胞,可以获得真正意义上的人源化肝脏小鼠模型。
      VITALSTAR Tet-uPA小鼠克服了世界上已有uPA小鼠的不足:新生小鼠死亡率高,繁殖困难;肝细胞移植手术需要在小鼠出生后二周内进行,技术难度大,死亡率高等缺点,而具有以下显著优点:1. Tet-uPA小鼠可正常生长,正常繁殖;2. 强力霉素(Dox)诱导肝损伤,诱导和肝细胞移植手术的窗口期可根据实验需要选定;3. 人源化肝脏小鼠重建的时间短,人肝细胞嵌合程度高。
         人肝细胞移植后4-6周,人血清白蛋白(HSA)含量可以达到3mg/ml以上(见图1)。 免疫组化和流式分析表明,小鼠肝脏中人源化程度可达80%以上。如图2所示,85%的细胞人主要组织相容性复合物I类抗原HLA-A,B,C表达阳性。 

     
     
    产品细节图片1
    1.人肝细胞移植后4-6周,HAS含量可以达到3mg/ml以上。
     
               产品细节图片2
     2.高嵌合人源化肝脏小鼠,肝脏中85%的细胞HLA-A,B,C表达阳性。
     

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    • 小鼠肝脏DNA提取与鉴定

      (24:1V/V) 10mol/LNH4AC ,配制后高压灭菌, 4 ℃贮存 ⑦ 无水乙醇 (AR) ⑧ 70 %乙醇 2 .器材 玻璃匀浆器;离心机;电泳仪;电泳槽;紫外透射反射分析仪。 实验操作 1 .组织 DNA 的提取 ① 取小鼠新鲜肝组织,去除结缔组织,用剪刀剪成细小碎块 ② 加 10 倍体积 TE 缓冲液,用玻璃匀浆器在冰浴中中速匀浆,并将匀浆液转入 10ml 离心管以 4000rpm 离心 10 分钟,弃上清 ③ 加 10 倍体积 TE 洗一遍

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