- ¥5888
- Chondrex
- 美国
- 3014
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20 C
- 英文名：
Bacterial Collagenase Kit
- 库存：
1
- 供应商：
北京博蕾德生物科技有限公司
- 规格：
1 kit
胶原酶（Collagenases），基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase, MMP）家族的成员之一，属于内肽酶类，在三螺旋区降解天然胶原，参与结蹄组织的生理和病理周转过程。胶原是动物基质结蹄组织的主要纤维成分。胶原酶可能在肿瘤细胞转移的多个阶段中，对肿瘤细胞侵袭穿透细胞外基质的过程起到促进作用。胶原酶已被支持用于临床治疗杜普征氏掌挛缩（Dupuytren's contracture），佩罗尼氏病（Peyronie's disease）和伤口愈合。
胶原酶活性检测方法很多，传统的方法包括胶原酶谱法（Collagen Zymography），该法首先将样本加入含胶原的SDS-PAGE凝胶中电泳，然后在适当缓冲液中复性12-16h，最后染色。当底物被酶降解，在整个黑色的背景中能看到清晰透明的降解条带，从而来判断是否存在胶原酶活性。该方法不仅费力费时，且很可能因复性不完全逆转，导致酶活性降低，结果出现较大偏差。
Rapid Collagenase Assay Kit (I) and (II)（Chondrex, Inc）
1. 试剂盒优势
含有测定胶原酶活性的所有必要成分包括重组人MMP-8（用作对照）和两种类型的胶原酶活化剂。
不同于抗体为基础的ELISA试剂盒仅能检测酶蛋白的存在，这些试剂盒目的在于测定酶活性。
试剂盒使用FITC标记的可溶性牛I型胶原或II型胶原为底物，只需2h就能完成测试。
比底物凝胶分析法（酶谱法）快10倍，检测灵敏度比放射同位素标记胶原法更灵敏。
2. 特异性
哺乳动物胶原酶
1.3 工作原理
哺乳动物胶原酶切割胶原分子上的所有三个α链，产生3/4和1/4大小的胶原片段，TCA和TCB，这两个片段的变性温度分别为34-35℃和28-29℃，而所有完整胶原（天然胶原）的变性温度是40℃。因此，35℃下这些切割片段能选择性变性为随机的螺旋构象，能够被一种有机溶剂提取出来。为了缩短变性过程（通常需60min），一种蛋白酶被引入用来进一步消化胶原酶降解后的产物。
1.4 反应步骤
1.5 试剂盒订购
| 货号 | 名称 | 规格 |
| 3014 | Bacterial Collagenase Assay Kit | 100 assays |
| 3001 | Rapid Collagenase Assay Kit with Type I Collagen Substrate | 100 assays |
| 3002 | Rapid Collagenase Assay Kit with Type II Collagen Substrate | 100 assays |
| 3003 | MMP-13 Inhibitor Assay Kit | 100 assays |
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文献和实验, the enzymes discussed here have been found satisfactory for a wide variety of tissues from many different species of various ages. Collagenase Bacterial collagenase is a crude complex containing a collagenase more accurately referred
悬液，传代培养时也需要将贴壁细胞从瓶壁上消化下来，常用的消化液有胰酶(Trypsin)溶液和EDTA溶液，有时也用胶原酶(collagenase)溶液。 1.胰酶溶液：胰酶活性可用消化酪蛋白的能力表示，常见有1：125和1：250，即一份胰酶可消化125或250份酪蛋白。组织培养用胰酶溶液一般配制成0.1-0.25%浓度，配制时要用不含Ca2+、Mg2+及血清的平衡盐溶液(如前面的D-Hank"s)，因为这些物质会对胰酶产生抑制作用。胰酶作用及溶解的最佳pH是8-9，配制胰酶溶液应将液体调至
℃下消化20分钟经洗涤后用营养液分散，制成悬液，剩余未消化的小组织块经洗涤后用胰酶于4℃下过夜，次日再提取细胞，分散成悬液，分瓶培养。（2） 胶原酶（Collagenase）消化法胶原酶是一种从细菌中提取出来的酶，对胶原有很强的消化作用。适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织，它对细胞间质有较好的消化作用，对细胞本身影响不大，可使细胞与胶原成分脱离而不受伤害。该酶分离效果好，即使有钙、镁离子存在仍有活性，故可用PBS和含血清的培养液配制，即操作简便又可提高细胞成活率，最终浓度200u/mL
