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- 详细信息
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大量
- 英文名:
T4 DNA连接酶预混液(Ligation Mixture)
- 保质期:
见说明书
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件:
保存温度:4-8 ℃ 保存于20%乙醇溶液中
- 规格:
15μl
Ligation Mixture为本公司经优化配方以后,特别研发的含有T4 DNA连接酶及连接反应所需各组分的制剂,其中还含有增强连接反应的成分,可以高效方便的将载体和外源片段进行连接,反应产物可以直接用于转化。
T4 DNA连接酶预混液(Ligation Mixture)保存条件
保存温度:-20℃
T4 DNA连接酶预混液(Ligation Mixture)注意事项
1. Ligation Mixture溶液请于冰水浴中溶解,混匀后再使用。
2. 连接反应请在16℃以下进行,温度升高较难形成环状DNA。连接时间控制在4℃反应过夜或者16℃反应2小时至4小时。对于较难连接的反应,可以4℃过夜和16℃连接2小时交替连接。反应时间过短或者温度高较难筛选得到阳性克隆。
3. 为提高克隆鉴定的效率,尽量减少假阳性,保证鉴定克隆为正向插入克隆,在用PCR方法进行阳性克隆鉴定时,应采用载体上游引物和扩增片段的下游引物进行鉴定或者采用载体下游引物和扩增片段的上游引物进行鉴定。
T4 DNA连接酶预混液(Ligation Mixture)产品目录
| 货号 | 产品名称 | 规格 | 报价(元) |
| XY05003MS | T4 DNA连接酶预混液(Ligation Mixture) | 15μl | 30 |
| XY05003M | T4 DNA连接酶预混液(Ligation Mixture) | 30μl | 60 |
| XY05003L | T4 DNA连接酶预混液(Ligation Mixture) | 150μl | 150 |
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文献和实验【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
连接酶,反应10分钟。平滑末端连接:在20µl反应体系中加入1µl T4 DNA 连接酶反应2小时,或者加入1µl高浓度T4 DNA 连接酶反应10分钟。 另外,NEB的快速连接试剂盒 (Quick Ligation Kit, NEB #M2200V [15个反应])是独有的可以在室温5分钟条件下连接平滑末端和粘性末端的试剂盒。 图1:在25°C条件下,用1 unit(1:400稀释后取1 µl)T4 DNA连接酶连接λDNA/Hind Ⅲ片段(4-碱基粘端)不同反应时间的结果。 图
相关专题 重组DNA技术工具酶 T4 DNA Ligase即T4 DNA连接 酶,可以催化粘端或平端双链DNA或RNA的5’-P末端和3’-OH末端之间以磷酸二酯键结合,该催化反应需ATP作为辅助因子。同时T4 DNA连接酶可以修补双链DNA、双链RNA或DNA/RNA杂合物上的单链缺刻(single-strand nicks)。
Ligation of DNA with T4 DNA Ligase
recombination and DNA synthesis. DNA ligase from E. coli is a polypeptide with a molecular weight of 74,000 and is NAD-dependent. T4 DNA ligase is the product of gene 30 of the T4 phage, has a molecular weight of 68,000, and is ATP-dependent. Both enzymes
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