- ￥1350
- iCell（赛百慷）
- 上海
- iCell-m045
- 2025年12月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
P-815
- 库存：
500
- 供应商：
镜像绮点
- 肿瘤类型：
肥大细胞瘤
- 细胞类型：
详见说明
- 品系：
细胞系
- 组织来源：
肥大组织
- 相关疾病：
肥大细胞瘤
- 物种来源：
小鼠
- 免疫类型：
否
- 细胞形态：
上皮样细胞
- 是否是肿瘤细胞：
是
- 器官来源：
肥大组织
- 运输方式：
冻存/复苏
- 年限：
长期
- 生长状态：
轻微贴壁生长
- 规格：
1ml/T25
细胞介绍
P815细胞吞噬小粒乳汁但不吞噬酵母聚糖或卡介苗。 没有抗体依赖的细胞毒作用。 硫酸右旋糖苷、LPS或PPD不能抑制细胞生长。 检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。 在本库通过支原体检测。
细胞特性
1） 来源：小鼠 肥大细胞；肥大细胞瘤
2） 形态：悬浮，部分轻微贴壁生长。贴壁细胞可用刮刀刮下后继续培养
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5） 用途：仅供科研使用。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1） 准备1640（推荐iCell-0002）基础培养基; 10%优质胎牛血清; 1%P/S.
注意事项：
1.复苏的P815活细胞收到之后，细胞多数呈悬浮状态，可能有些许细胞贴壁。请将全部细胞悬液转移到离心管，将剩下贴壁的细胞吹打脱壁后（刮刀刮下）一并收集，1000rpm离心5min，加入10-15ml培养液重悬后移植到2个T25培养瓶内培养。
2.传代周期：以20万细胞/ mL密度开始培养，并在培养过程中维持细胞密度在10万细胞/毫升到100万细胞/mL。
3.传代比例：以20万细胞/毫升密度开始培养，并在培养过程中维持细胞密度在10万细胞/ mL至100万细胞/ mL。
2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。
该细胞轻微贴壁和悬浮培养的细胞，传代可以参考以下方法：
1. 收集：将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3. 将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3） 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
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