SYA143型巨细胞病毒荧光PCR检测试剂盒说明书

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北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括SYA143型巨细胞病毒荧光PCR检测试剂盒说明书在内的病毒PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：SYA143型巨细胞病毒荧光PCR检测试剂盒说明书
规格：48次/盒
产地：国产|进口
等级：科研试剂
编号：SYA143

关于SYA143型巨细胞病毒荧光PCR检测试剂盒说明书的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
*化乙酰胆碱 L-Histidine methyl ester dihydrochloride 60-31-1
PP1201 RIPA裂解液
ARB12663 大鼠碱性成纤维生长因子(bFGF)代做ELISA实验 Rat basic fibroblast growth factor,bfgf ELISA KIT
BTN71201 柱式动物RNAOUT Column Animal RNAOUT
BL1433 TE缓冲液，PH=8.0
BTN100848 ECL法杂交检测试剂盒 ECL DIG Detection Kit
人血纤维蛋白原 Sephadex G-25 9001-32-5
ARB11561 人流感病毒B(FLU B)ELISA代测服务 Human influenza viruses b,flu b ELISA KIT
ARB10350 人分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)elisa检测说明书 
PY01-120  D-泛酸*  25克  
改良Barth溶液(无*)   500ml
ARB10873 人抗透明带抗体(AZP)"
BL1100 30%丙*(代"烯")酰胺(29:1)
DNA尿素加样缓冲液(2×)   5ml
钼酸 PIPES 7782-91-4
(*并三氮唑-1-基氧基)二哌*(代"啶")碳六*磷酸盐 Ceftiofur Sodium 190849-64-0或206752-41-2
BTN131074 SDS-PAGE样品预处理试剂盒 Sample Preparation Kit for SDS-PAGE
F050302 人IgG抗体 Human IgG
BTN3190 水饱和酚 Water-Saturated Phenol
Nα-FMOC-Nω-PBF-L-精*酸 BOC-Leu-Gly-Arg?Pna?HC1 154445-77-9
L-脯*酸苄酯盐*(代"酸")盐 C12E10 16652-71-4
SYA143型巨细胞病毒荧光PCR检测试剂盒说明书关键词：百奥莱博,巨细胞病毒荧光PCR检测试剂盒,SYA143


·札如病毒/星状病毒/腺病毒三重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA218
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·恙虫病立克次体单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA131
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对恙虫病立克次体特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对恙虫病立克次体的核酸进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适合于检测全血等样本中的恙虫病立克次体，用于恙虫病立克次体感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
恙虫病立克次体反应液(qPCR MIX) 1管 720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
恙虫病立克次体阳性对照(PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列、MJ系列、Roche系列，博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。

六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品的采集
用注射器取血5mL至EDTA-2Na抗凝管。
6.2 样本前处理
取抗凝血下层血细胞50μL，加入100μL双蒸水吹匀。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液)，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX 参比荧光。

八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明恙虫病立克次体核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明恙虫病立克次体核酸阴性。
（3） 如果Ct值>35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行恙虫病立克次体qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明恙虫病立克次体核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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