猪伪狂犬病毒荧光PCR检测试剂盒(PRV)特价促销

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猪伪狂犬病毒荧光PCR检测试剂盒(PRV)特价促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多猪伪狂犬病毒荧光PCR检测试剂盒(PRV)等动物疫病PCR检测试剂盒产品请联系我司咨询订购。

名称：猪伪狂犬病毒荧光PCR检测试剂盒(PRV)特价促销
产地：国产|进口
编号：SYA467
规格：48次/盒
品牌：百奥莱博
等级：科研试剂

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·转基因植物35S启动子单重荧光PCR检测试剂盒 
编号：SYA265
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·布氏杆菌(BS)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA574
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
本试剂盒适合于增菌培养物、疑似病料及组织、血液样本中布鲁氏菌(BS)的特异性检测，用于布鲁氏菌(BS)的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

本试剂盒用一对布鲁氏菌特异性引物，对布鲁氏菌DNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

试剂盒组成：

 

组份	数量	规格
布鲁氏菌PCR反应液(BS-PCR MIX)	1管	720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
阳性对照(BS-PTC)	1管	50μL/管

储存条件：-20℃以下，有效期6个月。

使用方法：

一、样品采集：
➤血清：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入无菌的干燥玻璃管，室温(22-25℃)放置30-60min，血标本可自发完成凝集析出血清，或直接使用水平离心机，3000rpm离心5min，吸取上层血清，转移至1.5mL灭菌离心管。
➤血浆：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，5-10min后即可分离出血浆，转移至1.5mL灭菌离心管。
➤粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
➤病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。

二、DNA提取：
可按常规方法提取，也可采用商品化DNA试剂盒提取
➤培养物：取培养物50μL(培养至一定浊度)或者挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
➤粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
➤其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

三、检测步骤：
1．试剂的准备
从试剂盒中取出PCR反应液(BS-PCR MIX)，室温融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
PCR反应液	15µL	N×15µL

向设定的N个PCR反应管中分别加入15μLPCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(BS-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
2．qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

预变性	1循环	94℃ for 2 min
PCR扩增	35循环	94℃ for 30 sec 58℃ for 30 sec 72℃ for 30 sec

四、结果分析：
➤称取1.5g琼脂糖放于250mL锥形瓶中，加入100mL 1×TAE电泳缓冲液，微波炉加热溶解，稍冷后加入10μL染色液混匀，倒入插有梳子的制胶板中。
➤待胶凝固后，取10μL Maker(推荐使用DL2000 Maker)点样于左侧凝胶孔中，取10μL PCR产物依次点样于凝胶孔中，电压值设定为电泳槽正负极距离(cm)与5(V/cm)的乘积。待*酚兰指示剂电泳至凝胶中部时停止电泳并使用凝胶成像仪或紫外透照台观察结果。

试验成立判定：
➤阴性对照(NTC)：无任何的条带(引物带除外)。
➤阳性对照(BS-PTC)：在260bp处有条带。
➤被检样品：在260bp处有条带为阳性样品，否则为阴性样品。
➤以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。


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2-*-4-硝基*(代"*")-α-L-岩藻糖苷 Boc-L-valine 157843-41-9
葡聚糖凝胶G-10 Syringaldehyde 9050-68-4
ARB14140 大鼠泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)酶标法分析 
ARB12096 大鼠双*睾酮(DHT)含量分析 Rat dihydrotestosterone,dht ELISA KIT
非变性蛋白裂解抽提液   50ml|100ml
D2000 plus DNA ladder（100-5000bp） 100次
BL1378 4×SDS-PAGE分离胶缓冲液(PH=8.8)
F050304 山羊IgG抗体 Goat IgG
"
BTN131230 DNase I干粉 DNase I Powder
CYB167002 羊抗人IgG
BL1154 质粒小量提取试剂盒
PY02-189  吲哚培养基  10克  
BTN80917 一步法96孔板质粒DNAOUT(离心法) One-Step 96 Microwell Plate Plasmid DNAOUT
F050301 兔IgG抗体 Rabbit IgG
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·猪源性成分单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA294
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对猪源性成分特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用荧光PCR技术对猪源性成分DNA进行体外扩增检测。本试剂盒中猪源性成分的探针报告基团为FAM。

二、用途：
该试剂盒适合于各种饲料及其它样品中猪源性成分的检测。

三、试剂盒组成：(40T/Kit)
组份 数量 规格
猪物种荧光qPCR反应液(Pork-qPCR MIX) 1管 720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(Pork-PTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Bio-Rad系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品采集与DNA提取
6.1 样品采集
样品的采集与预培养按照样品的采集按照国家标准《饲料中牛羊源性成分的定性检测定性聚合酶链式反应(PCR)法》(GB/T 20190-2006)要求进行。
6.2 DNA提取
可按常规方法提取，也可采用商品化试剂盒提取DNA。
6.2.1 动物组织、食品或饲料：直接取约50mg上述材料，匀浆后置入洁净的1.5mL离心管中，加50μl DNA抽提液充分混匀(提取液用前需室温溶解并充分混匀)后100℃15min，4℃降温5min，13000rpm离心5min，取上清液5μL进行PCR反应。
6.2.2 血液：取500μL摇匀的抗凝血转至一洁净的1.5mL离心管中，加入1mL双蒸水，剧烈震荡30s，8000rpm离心5min，弃上清。重复清洗至无明显红色沉淀。加入1mL生理盐水，剧烈震荡15s，10000rpm离心5min，弃上清。沉淀加50μl DNA抽提液并与沉淀混匀，100℃恒温15min，4℃降温5min。13000rpm离心5min，取上清5μL进行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Pork-qPCR MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Pork-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(Pork-PTC)：均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1)在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明猪源性成分核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明猪源性成分核酸阴性。
(3)如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行猪源性成分qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明猪源性成分核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
(3)PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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