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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Immunol Fluorescence Staining Kit with with FITC-Labeled Goat Anti-Human IgG
- 库存:
988
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖FITC标记抗人免疫荧光染色试剂盒打折促销在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:FITC标记抗人免疫荧光染色试剂盒打折促销
编号:KFS036
英文名:Immunol Fluorescence Staining Kit with with FITC-Labeled Goat Anti-Human IgG
规格:300T
产地:国产|进口
适用于细胞或组织切片的免疫荧光染色。在有适当的一抗检测特定的目标蛋白时,就可以使用免疫荧光染色试剂盒检测到红色、绿色或蓝色等荧光。含有FITC标记的山羊抗人IgG (H+L)抗体,可以用于检测人来源的相应一抗,观察到的颜色为非常鲜艳的绿色。
FITC(Ex/Em:492nm/520nm)是一种常用的绿色荧光探针。
本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液,可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月,并且在6个月内至少可以重复使用10次。
本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液,可以使荧光更加持久。
本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片,至少可以检测300个样品。
注意事项:
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭,但仍宜尽量避光,特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭,染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存,但存放时间通常不宜超过一周,随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
4. 如果观察时发现荧光过弱,可以适当提高一抗的浓度;如果荧光还是比较弱,可以适当提高荧光标记抗体的浓度。
5. 需自行配制用于免疫荧光染色的相关试剂,需自备盖玻片和载玻片。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
想要了解更多关于FITC标记抗人免疫荧光染色试剂盒打折促销的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
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FITC标记抗人免疫荧光染色试剂盒打折促销关键词:KFS036,Immunol Fluorescence Staining Kit with with FITC-L,FITC标记抗人免疫荧光染色试剂盒
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FITC标记抗人免疫荧光染色试剂盒打折促销关键词:KFS036,Immunol Fluorescence Staining Kit with with FITC-L,FITC标记抗人免疫荧光染色试剂盒
·p27蛋白检测试剂盒
编号:KFS238
英文名称:p27 Detection Assay(Western Blot)
规格:50T
本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白, 用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液LysisBuffer 匀浆裂解组织或细胞,作用温和,提取过程简便高效。获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀等后续研究(本试剂盒包含兔抗p27抗体),但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究,因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂。
·喜树碱 Camptothecin
编号:KFS275
英文名称:Camptothecin
等级:1mg/mL in DMSO
规格:100μl|500μl
浓度:1mg/mL in DMSO
分子式:C20H16N2O4
分子量:348.4
纯度:>98%(TLC)
储存:-20℃,有效期12个月
·细胞膜橙红色荧光探针(DiI)
编号:KFS151
英文名称:DiI
等级:1mg/mL in DMSO
规格:10mg
长链二烷基羰花青化合物,特别是Dil(分子量933.88),广泛应用于固定和非固定的组织与细胞中,进行顺行或逆行的神经示踪分析。
Dil 不会影响细胞的活力、生长以及基本生理特性。Dil 标记运动神经元,可在培养基条件下持续跟踪长达四周,在体内长达一年。染料通过在质膜中的缓慢横向扩散均匀标记神经元,0.2~0.6mm/每天/固定标本,在活体组织里,可以达到6mm/每天。经过醛固定的组织,Dil 的扩增可以持续长达1~2 年。一般情况下未标记的染料不会向非标记的细胞转移,除非质膜被破坏,比如切片部位。
储存:-20℃,避光,有效期12个月。
·细胞凋亡形态学检测试剂盒
编号:KFS285
英文名称:Apoptotic/Necrotic Cell Detection Kit
等级:1mg/mL in DMSO
规格:100T
形态学检测是研究细胞凋亡的最基本方法。细胞凋亡的形态学变化是多阶段的,起初,细胞间连接和微绒毛消失,细胞体积缩小,胞浆凝缩,内质网变疏松并与胞膜融合,形成一个个空泡,核糖体与线粒体等细胞器聚集,结构尚无明显改变,细胞核内的染色质逐渐凝聚成新月状附在核膜周边,细胞核固缩呈均一的致密物,进而断裂成碎块,此时细胞膜仍保持完整:然后,胞膜及核膜不断出芽、脱落,一个细胞变成数个大小不等的有膜包裹的凋亡小体:最后凋亡小体被周围具有吞噬能力的细胞吞噬、消化。上述这些形态学的变化,可以通过本试剂盒中的染色及光学显微镜观察。
试剂盒组分:
Dye Reagent 1×10mL
Dye Reagent 2×1mL
Buffer A×10mL
注意事项:利用血球计数板进行该项操作时,不要用血计板配套的质地较硬的盖玻片,而用普通的盖玻片反而更利于结果的观察。
操作方法
1. 用适当的方法诱导细胞凋亡,消化收集细胞;
2. 用PBS 洗涤细胞二次,并调成浓度为1×106cells/ml 细胞悬液;
3. 吸取50~100μL 的细胞悬液均匀涂布于载玻片(A 片)上或用离心涂片机制片,室温晾干,甲醇固定5min;
4. 在A 片上滴加数滴100μL 的Dyes Reagent 1 室温染色1 min,用水轻轻洗去染液;
5. 在含体积分数为1%盐*(代"酸")的80%乙醇中分化10 s,流水冲洗1 min,晾干,显微镜下观察细胞的形态。
6. 在另一张涂有细胞并已于无水乙醇固定2min 的载玻片(B 片)上滴加100μL 染色液2(Dyes Reagent2 :Buffer A=1:9 的混合液),室温染色5~20min,用水轻轻洗去染液,室温晾干;
7. 二甲*浸泡3 min,以去除杂质,使载玻片透明,最后树脂封片,显微镜下观察细胞形态;
8. 观察200-500 个细胞,计数凋亡细胞所占的比例。
结果分析A 片:凋亡细胞皱缩,胞膜完整。染色质凝聚,嗜碱性增强,染成深蓝色,呈环状或新月状附在核膜周围,或细胞核固缩碎裂成数个圆形颗粒,核膜消失。而坏死细胞体积增大,染色质变稀疏成网状,嗜碱性减低,染成淡蓝色,胞核破碎,细胞膜不完整。
B 片:凋亡细胞皱缩,胞膜完整。胞浆稀少或缺乏,染成淡红色,染色质凝聚,染成深紫色,细胞核固缩碎裂成数个圆形颗粒。
计算细胞凋亡率和死亡率:
细胞凋亡率=凋亡细胞/细胞总数×100%
细胞死亡率=坏死细胞/细胞总数×100%
储存:RT,避光,有效期12个月。
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文献和实验常规片断级的选择指南: 所谓常规级,即回收片段大小介于100bp和10kb之间,在这个范畴内包含了一般的质粒或者克隆片段的回收。主流方法是柱回收试剂盒。1. Qiaquick Gel Extraction Kit品牌:Qiagen回收范围:70bp-10kb特点:高达80%回收率操作快速简单,3步完成70bp-10kb片段的回收提供三色指示剂的电泳上样loading Buffer,方便判断和操作回收产物纯度高,可用于同位素或荧光测序、芯片分析、连接转化、酶切、标记、PCR、显微注射、体外
物。一般SP三步法二抗选择Biotin标记的二抗,以与后面的SP结合反应;而免疫荧光染色就需要购买不同荧光素标记的二抗,如罗丹明、FITC、Cy3等常用荧光素。这主要与后面有无三抗和三抗种类有关。(3)选择IgM还是IgG。一般一抗是IgM,那么二抗就选择IgM;反之,一抗是IgG,则二抗选择IgG。(4)生产厂家。一般SP三步法我们实验室选择中杉金桥的二抗染色试剂盒,内含有工作液的二抗,故试验中只需摸索一抗的浓度即可,效果还可以;而免疫荧光的二抗我一般选择Jackson ImmnoResearch公司
而不去做间接标记。3 流式抗体荧光标记的选择:如果实验中检测单一指标:不同荧光标记在不同的仪器上强度不同。FACS Calibur仪器为例:PE >APC >PE-Cy5 >PerCP >FITC >PerCP-Cy5.5,通常来说,PE最强,适用于弱表达抗原。FITC强度较弱,适用于强表达抗原,使用范围比较广。用户需根据检测的目标蛋白进行具体选择。如果同时检测多个指标:确认流式细胞仪能检测多少个通道:流式抗体每个通道只能选择1种荧光素。各个通道之间的荧光素可以随意搭配。如:实验者同时检测三个指标
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