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- 文献和实验
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- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
SYBR Green II
- 库存:
948
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括RNA/单链DNA染料(SYBR Green)价格在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:RNA/单链DNA染料(SYBR Green)价格
产地:国产|进口
编号:JN0061
规格:500μl
品牌:百奥莱博
英文名:SYBR Green II
本品是一种高敏感的核酸染色试剂,可以对RNA或者是单链的DNA进行染色。使用300nm透射光显影的情况下,非变性凝胶中检测核酸的灵敏度可以达到5×10-7克。与传统的EB染料相比,SYBR Green II RNA染料的灵敏度更高,可以应用于杂交前RNA质量的检测,同时不会影响后续的转膜,还可应用于变性梯度凝胶电泳(DGGE)和单链构象多态性分析(SSCP)等实验。
本品可以代替银染和EB染色,消除了银染复杂、费时的缺点;与EB染色相比,形成的SYBR Green II -RNA复合物所激发的荧光是EB-RNA复合物激发荧光的7倍。SYBR Green II RNA染料并不是特异性的结合RNA或者DNA单链,但是其对单链的结合效率是双链的约2倍,可广泛应用于RNA的质量分析。
产品特点:
1、高灵敏:至少可检出20pg ssDNA或RNA,高于EB染色法25-100倍。
2、信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
3、操作简单:无须脱色或冲洗。
4、适用范围广:可适用于多种电泳分析。
5、使用方便:不影响其它修饰酶作用。
6、经济:价格比银染便宜。
使用建议:
胶染法(推荐方法):
制胶时加入SYBR Green II核酸染料。待胶冷却至50℃左右,每100ml胶中加入3~5μl SYBR Green II核酸染料。
按照常规方法进行电泳即可。
注:
(1)用此方法染色可以准确确定核酸片段分子量。染料用量相对较少,1ml染料大约可以做300块100ml的胶。
(2)由于SYBR Green II热稳定性较差,不能在热的胶溶液中直接添加,需要等待溶液冷却至50℃左右才能添加。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。
泡染法:
按照常规方法进行电泳。
用pH7.0~8.5的缓冲液(如:TAE,TBE或TE),按照10000﹕1 的比例稀释SYBR Green II浓缩液,混匀后制成染色溶液。
将染色溶液倒入合适的聚丙*(代"烯")容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光,室温振荡染色10~30 分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙*(代"烯")酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的稀释溶液轻轻地倒在胶板上,让稀释液均匀地覆盖整个胶板,并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
注:此方法可以精确确定核酸片段分子量,但染料用量较多。
储存条件:-20℃
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·糖苷内切酶S
编号:JN0169
英文名称:BalbGlyc Endo S
规格:1000U
BalbGlyc糖苷内切酶是一种高特异性糖苷内切酶,可以特异性水解去除抗体Fc片段上的N型糖链,酶活受到高甘露糖和半聚糖的抑制。酶切反应的最
佳pH值为7.4,最佳反应温度为37℃。许多反应缓冲液的pH值处在6-8之间,建议客户针对不同的蛋白提前进行预实验,以确定最佳反应条件。BalbGlyc糖苷内切
酶带有His标签,易于从反应中去除。
BalbGlyc 糖苷内切酶反应缓冲液的最适pH值为6.0-8.0(下表)。
可供选择的反应缓冲液及pH:
| 兼容 Buffers | pH |
| PBS | 6.5-8.0 |
| Tris Buffer | 7.0-8.0 |
| Sodium Acetate Buffer | 6.5* |
*pH在6.0以下,需要增加酶的用量。
活性定义:在10 mM sodiu*(代"m") phosphate, 150 mM NaCl,pH 7.4反应体系内,37℃反应1小时,一个单位的酶能将1μg的人源IgG切割95%以上。
质量控制:
The activity of BalbGlyc endoglycosidases on mAb.
mAb经BalbGlyc去糖基化(37度30分钟)并经FabCutter II加工为Fc和F(ab′)₂ 非还原电泳检测结果显示,Fc片段糖基化已经去除(泳道3,右下)。
1: mAb; 2: mAb+FabCutter II; 3: mAb+FabCutter II +BalbGlyc; M: Protein Marker
溶解方法:
1、溶解前低速离心,使冻干粉末聚集于管底。
2、用无菌ddH2O溶解,1000U酶加入50μl无菌ddH2O,5000U酶加入250μl无菌ddH2O,配制成为酶活性为20U/μl的溶液。
3、低速离心,使溶液汇聚于管底。
操作方法:
1、按照溶解说明将冻干粉溶解,配制成为20U/μl的溶液。
2、待酶切的抗体溶解在反应缓冲液里,建议浓度为0.5-10mg/ml。
3、按照1U酶切1μg IgG的量将酶加到反应缓冲液里,通常在中性的条件下。
4、37℃酶切1小时,取部分样品跑SDS-PAGE检测切割效果。
注意:可使用本品中的Human IgG抗体做为底物测试酶切效果,用70μl ddH2O配制成1mg/ml的蛋白溶解,取50μl加入1μl的酶。酶切前后取样跑SDS-PAGE。
储存条件:-20℃。
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文献和实验SYBR Green Quantitative PCR Protocol
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SUPER Green Ⅰ(10,000× DMSO溶液,电泳级) SUPER Green Ⅰ核酸染料特点 ● 无毒性:属花箐类染料,容易生物降解,无致癌毒性。 ● 灵敏度高:至少可检出20pg DNA,高于EB染色法25~100倍。 ● 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。 ● 操作简单:无须脱色或冲洗,即可直接用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观察。 ● 适用范围广:可适用于多种凝胶
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