2×Long Taq PCR MasterMix批发

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括2×Long Taq PCR MasterMix批发在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：2×Long Taq PCR MasterMix批发
规格：500μl|5×500μl
编号：RFT092
产地：国产|进口
本品包含Long Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂，浓度为2×。使用时，只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应，可最大限度的减少人为误差，具有快速简便、稳定性好等优点。用于短链和长链DNA扩增，特别适合于长片段DNA的扩增。使用该产品得到的PCR扩增产物末端含有一个A碱基，可以直接用于TA克隆。

质量控制：经检测无外源核酸酶活性；PCR方法检测无宿主残余基因组DNA；能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。

使用方法;
1、冰浴中彻底融化2×MasterMix，混匀后Minispin将溶液收集到管底。
2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:

	50μl反应体系	终浓度
2×MasterMix	25μl	1×
上游引物 10μM	1-5μl	0.2-0.8μM
下游引物 10μM	1-5μl	0.2-0.8μM
模板	×μl	10pg-1μg
水	补至50μl

3、快甩离心将反应液收集到管底。
4、PCR仪如果没有热盖加热的话，补加25μl矿物油。
5、PCR仪上执行以下程序：

三步法：

步骤	温度	时间	循环数
初始变性	94℃	1-5 min	1
变性	94℃	30 sec	25-40*
退火	Tm-5℃*	30 sec
延伸	72℃	1 min/kb
最后延伸	72℃	5 min	1

两步法：

步骤	温度	时间	循环数
初始变性	94℃	1-5 min	1
变性	94℃	30 sec	25-40*
退火和延伸	68℃	1 min/kb
最后延伸	72℃	5 min	1

注： PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况，设定最佳的反应条件(温度、时间等)。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

关于2×Long Taq PCR MasterMix批发的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：
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14726-29-5 Fast Blue RR Salt 固蓝RR盐
92-32-0 吡啰红G派洛宁G(Y) PyroninG(Y)
二氧化硅 Lithium Carbonate 60676-86-0
79-57-2 Teffamycin 土霉素
ARB12304 大鼠抗胰蛋白酶(AT)Elisa方法检测 Rat anti-trypsin,at ELISA KIT
J0311 兔抗鸭IgY(H+L)抗血清 1ml/10ml
594-43-4 EMS 甲基磺酸乙酯
ARB10036 人I型前胶原羧基端肽(PICP)定量分析 Human procollagen Ⅲ n-terminal Peptide,pⅢnt ELISA KIT
50-23-7 
ARB13415 鸡B因子(BF)尿液中含量检测 Chicken factor b,bf ELISA KIT
2×Long Taq PCR MasterMix批发关键词：RFT092,百奥莱博,2×Long Taq PCR MasterMix


·PCR产物纯化试剂盒
编号：RFT031
英文名称：PCR product purification kit
规格：100次|200次
本试剂盒采用离心吸附柱结合独特的缓冲液系统，从酶切、PCR等反应溶液中纯化DNA片段，同时除去蛋白质、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒可回收100bp–10kb的DNA片段，回收率大于80%(<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率为30－50%)。每个吸附柱每次最多可吸附的DNA量约为10μg。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、测序、文库筛选、连接和转化等实验。

试剂盒特点：
1、结合液PB为亮黄色，便于观察体系的pH是否合适。
2、操作快捷，单个样品操作少于10分钟。

操作步骤：
如非指出，所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

1、在PCR反应液中直接加入5倍体积的PB液，颠倒混匀后，全部加入到吸附柱CA2中，10000g离心30-60秒，到掉收集管中的废液，将吸附柱CA2重新放入收集管中。
注意：
a.如果PCR反应体系使用了石蜡油，无需去除，但要使用10倍体积的PB液。
b.如果反应体系小于50μl，用水补至50μl体系，再加入PB液。
c.如果体系体积大于700μl，请分次上柱，保证全部溶液均加入到吸附柱中。
2、向吸附柱CA2中加入700μl漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇)，10000g离心30-60秒，倒掉废液，将吸附柱重新放入收集管中。
3、向吸附柱CA2中加入500μl漂洗液PW，10000g离心30-60秒，倒掉废液。
4、将离心吸附柱CA2放回收集管中，10000g离心2分钟，尽量除去漂洗液。
注意：此步必不可少！如果漂洗液有残留，将会影响回收效率和DNA质量，进而影响下游实验；离心后将吸附柱盖子打开，室温放置2分钟，这样将有助于彻底挥发残余乙醇。
5、将吸附柱放到一个干净离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加适量洗脱缓冲液EB，室温放置2分钟。10000g离心2分钟收集DNA溶液。
注意：
a.可将洗脱缓冲液EB预热到60-70℃后再加到吸附膜上，这样可以提高洗脱效率。
b.CA2柱的洗脱体积不应少于20μl，体积过小将会降低回收效率。
c.洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率
6、DNA产物-20℃保存。

储存条件：室温，有效期12个月。


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