大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)北京厂家现货

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产供应大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)北京厂家现货，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)北京厂家现货
产地：国产|进口
编号：SY0369
规格：100U
品牌：百奥莱博
重组肠激酶（rEK）是高纯度的牛肠激酶轻链亚基，它有着和天然提取的肠激酶同样特异的切割酶活性，切割位点AspAspAspAspLys，可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合标签，本rEK具有比天然酶更高的切割活性。

本品为采用重组大肠杆菌分泌表达的高纯度、高活性、高特异的牛肠激酶，适用范围广，并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。本品不含标签，由于具有极高酶切活性，酶切反应使用量少，不影响下游蛋白应用，故后续不需将其去除。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。
来源：E. Coli
分子量：25.850 kDa 
外观：无菌液体
酶浓度）：10000U/ml，相当于10U/ul
活性定义：一个活性单位定义为25 ℃，12~16h，在25mM Tris-HCl，pH8.缓冲体系下，将500μg带有肠激酶酶切位点的融合蛋白切开95%所需要的酶量。
内毒素检测：用LAL法测定内毒素含量小于1EU/μg
质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；本制品中不含有非特异性的蛋白酶切活性。
常见影响肠激酶活性的因素：>2M 尿素，>200mM NaCl，>20mM β-ME，>0.1% SDS，>50mM 咪唑，或>5% 甘油
【注】：如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种，为获得理想的酶切结果，请先将样品透析到25mM Tris-HCl 8.0缓冲液中，然后再进行酶切实验；若不方便透析，可将样品稀释，使得各组分低于干扰浓度后再酶切，酶的用量与蛋白比例不变；若干扰因素很多，且不便去除，需要适当增加酶量或延长酶切时间，有助于得到理想的酶切效果。

1）反应体系（1000μl）

融合蛋白———0.5-1mg（蛋白浓度：0.1-1mg/ml）
Enterokinase——————————————1-2U
10×rEK Reaction Buffer————————100μl
补DDW（超纯水）——————————To 1000μl

2）反应条件： 25 ℃过夜酶切（注：完全酶切需要16-24h）。
【注】该酶效力高且待切蛋白结构性质不同，建议先进行预实验摸索酶使用浓度及酶切反应时间。
【注】重组肠激酶可使用25mM Tris-Hcl pH8.0稀释成每1μl含0.1单位的溶液使用。

特别注意事项
1）磷酸盐对Enterokinase有很强的抑制作用，痕量的磷酸盐都会严重影响Enterokinase的活性，因此在酶切体系内不能存在磷酸盐。
2）本品是具有高酶活力重组肠激酶，切割蛋白使用量少，可不考虑除去。
3）蛋白酶切效果不好，可适当增加酶量，或适当延长酶切时间。
4）本品仅作科研用途！为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

除大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)北京厂家现货外，我公司正在打折促销以下产品：

·牛饱和铁转铁蛋白
编号：SY0458
英文名称：Bovine Transferrin, HOLO
规格：100mg
饱和铁转铁蛋白（holo transferrin）持续地释放铁离子，并形成脱铁转铁蛋白(apo transferrin)。研究表明，饱和铁形态的转铁蛋白对于促进细胞生长是最有效的形态。对于杂交瘤，黏连细胞和悬浮细胞系，在细胞培养过程中，应保持培养基中转铁蛋白浓度在0.5-100μg/ml。针对不同的细胞系，需要选择最合适的浓度。

Bovine Transferrin（牛转铁蛋白）是一种广泛使用的生物可利用铁来源，细胞和组织培养中重要的促生长营养物。采用新西兰来源的牛血浆，利用亲和色谱层析技术制备而得，保证了产品的高纯度、蛋白完整性、无辛酸残留及提取过程无热或溶剂引起的变性效应，符合ISO质量体系，确保了高质素的产品安全标准。

Bovine Transferrin（牛转铁蛋白）以高纯度、热处理、冻干粉状态提供，并有脱铁（apo）或饱和铁（holo）两种形式。

转铁蛋白冻干粉需要保存在冷藏状态下，使用之前再溶解。一般用PBS或者纯水在室温下将转铁蛋白冻干粉溶解成储液，浓度为2 mg/ml，然后用无菌滤膜进行过滤，滤液可在无菌条件下4℃保存5-10天。

英文别名：Serum transferrin; beta-1-Metal-combining protein; Siderophilin
来源：牛血浆
含铁量：不少于1000 ppm
分子量：约76,000-81,000
外观：浅红色冻干粉
纯度：≥95%（w/w总蛋白）
溶解性：溶于水（10 mg/ml），在20-25℃完全溶解约20min
储存条件：4℃

·耐热逆转录酶I
编号：SY0289
英文名称：Reverse Transcriptase I
规格：2000U
本产品是在M-MLV (RNase H-) Reverse Transcriptase基础上经过多点突变得到的全新逆转录酶。本产品热稳定性提高，在50℃下活性最高，且可耐受高达55℃的反应温度，适用于具有二级结构的RNA模板的逆转录，能稳定可靠地合成cDNA。该酶与模板的亲和力增强，可获得更多全长的cDNA，并可检测到低至1 pg的总RNA，特别适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。此外，本品降低了逆转录过程的错配率，提高了克隆的保真度。

产品组份：
5×Reaction Buffer——————100μl
Reverse Transcriptase I (200 U/μl)————10μl

活性定义：以Poly(rA) Oligo(dT)为模板/引物，在37℃，10分钟内，掺入1 nmol的dTTP为酸不性溶物质所需要酶量定义为1个活性单位（U）。

质量控制
核酸外切酶残留检测：200 U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在37 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测：200 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在37 ºC下孵育1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
RNase残留检测：200 U本品和1 μg小鼠肝脏总RNA在37 ºC下孵育1小时，RNA电泳谱带不发生变化。
功能检测1：逆转录体系中加入200 U本品，以500 ng Hela cell total RNA为模板，Oligo(dT)18为引物，50 ºC反应45分钟。取10% cDNA产物进行PCR扩增DNCH基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的5.6 kb条带。
功能检测2：逆转录体系中加入200 U本品，以100 pg Hela cell total RNA为模板，Oligo(dT)18为引物，50 ºC反应30分钟。取10% cDNA产物进行PCR扩增β-actin基因。琼脂糖凝胶电泳，EB染色，可见有单一的550 bp条带。

注意事项
1）请保持实验区域洁净；操作时需穿戴干净的手套、口罩；实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证RNase free，以防止RNase污染。
2）为保证逆转录成功，建议使用高质量的RNA样本。
3）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。



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·XL10-Gold化学感受态细胞
编号：SY0018
英文名称：XL10-Gold Chemically Competent Cell
规格：100μl×10管
XL10-Gold化学感受态细胞是经特殊工艺处理得到的感受态细胞，特别适合于大分子量DNA的高效转化。具有四环素和*霉素抗性，使用Puc19质粒测得其转化效率达108cfu/μg，

本品基因型：TetrΔ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F´proAB lacIqZΔM15 Tn10 (Tetr) Amy Camr]。

主要具有如下特点：
① Hte表型可增强较大分子量质粒和连接产物的高效转化；
② 具有限制性内切酶缺陷性，更利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取；
③ 更适于质粒文库的构建；
④ 具有lacIqZΔM15，可用于蓝、白斑筛选。

注意事项

1）感受态细胞应保存在-80℃，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2）整个转化操作，严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3）为确保最高转化效率，整个操作过程应尽量轻柔，并保持低温，且每次转化感受态使用量，不低于100μl。
4）为防止转化不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，最低化实验可能遇到的风险。

使用方法

1）取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2）向100μl感受态细胞悬液中加入0.1-50ng（＜10μl /100μl感受态）目的DNA或2μl连接产物，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置30min。
3）置于42℃水浴中热激30s，然后快速将管转移到冰浴中，冷却2-3min，该过程不要摇动离心管，否则会降低转化效率。
4）向离心管中加入900μl 42℃预热的无菌NZY+培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床振荡培养1h（225-250rpm），目的是促使菌体复苏。
【注】：此步也可用LB培养基（不含抗生素）进行菌体复苏。
5）取上述≤200μl转化产物涂至含有相应抗生素的LB固体平板上，将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
【注】：如需做蓝白斑筛选，需至少孵育17h，以充分显色。

储存条件：-80℃


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BL1336 通用引物 ITS5
BTN100881 SDS溶液(10%,电泳级) SDS Solution,EG
ARB12038 大鼠一氧化*(代"氮")(NO)检测服务 Rat nitric oxide,no ELISA KIT
632-99-5 碱性品红 Magenta Red
CYB164051 兔抗FITC-HRP
ARB13079 小鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)elisa检测说明书 Mouse retinol-binding protein 4,rbp-4 ELISA KIT
核酸检测试剂盒(定磷比色法)   50T
53597-25-4 Protamine sulfate sale 硫*(代"酸")鱼精蛋白
ARB14131 人磷酸化磷酸肌醇3激酶(P-PI3K)Elisa方法检测 
F050303 人IgM抗体 Human IgM
缩二脲 3-O-Methylglucose 108-19-0
草酸铵结晶紫染色液   100ml
BTN130601 DNA修复混合液 DNA Repair Mix

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