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-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Lysis Buffer for WB/IP Assays
- 库存:
989
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液特价优惠,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液特价优惠
编号:SY0318
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:Lysis Buffer for WB/IP Assays
本品细胞/组织裂解液,WB/IP裂解液,是一种非变性条件下的裂解液,含有sodiu*(代"m") pyrophosphate、β-glycerophosphate、EDTA、sodiu*(代"m") orthovanadate和leupeptin等多种抑制剂,可以有效抑制蛋白降解,并能维持原有的蛋白间的相互作用。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP和Co-IP等实验。
注意事项
1)需自备PMSF。
2)裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3) 用WB/IP裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
(一) 细胞样品
1)融解WB/IP裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2)贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成5×105~1×106个细胞/管,然后再裂解。因为大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。
3)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入100μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150μl或200μl。
(二)组织样品:
1)把组织剪切成细小的碎片。
2)融解WB/IP裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3)按照每20mg组织加入100-200μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4)用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
关于免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液特价优惠的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
F020225 兔抗鸭IgY IgG抗体 Rabbit Anti-Duck IgY
ARB12342 大鼠补体片断5A(C5A)elisa测定使用说明书 Rat complement fragment 5a,c5a ELISA KIT
L-赖*酸盐*(代"酸")盐 Myristic acid 657-27-2
B0201 特级新生牛血清(辐照灭菌) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
H0701 山羊血浆(去红细胞、无菌过滤) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
BTN90508 包涵体微量纯化试剂盒 Inclusion Body Miniprep Kit
乳酸银显影液 100ml
盐*(代"酸")壮观霉素 CMC 22189-32-8
F030304 胶体金标记小鼠抗HIS抗体 Monoclonal Mouse Anti-His*GOLD
ARB12273 大鼠红细胞生成素受体(EPOR)Elisa定量检测 Rat erythropoietin receptor,epor ELISA KIT
ARB13849 猪内皮型一氧化*(代"氮")合成酶3(eNOS-3)elisa检测 Porcine endothelial nitric oxide synthase 3,enos-3 ELISA KIT
BL1315 2×Pfu PCR MasterMix(含染料)
还原型谷胱甘肽 Nuclear fast red 70-18-8
ARB11462 人胰岛细胞抗体(ICA)Elisa方法检测 Human islet cell antibody,ica ELISA KIT
F020207 山羊抗小鼠IgA抗体 Goat Anti-Mouse IgA
ARB13107 小鼠骨保护素(OPG)代做ELISA实验 Mouse osteoprotegerin,opg ELISA KIT
改良Lowry法蛋白定量试剂盒 500T|1000T
NF-208 羊抗人IgM血清
ARB13308 小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体IgG(MPO-ANCA IgG)检测服务 Mouse myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody igg,mpo-anca igG ELISA KIT
PY02-177 *化*基础(无*化*) 100克
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·一步法(快速/无缝)克隆试剂盒
编号:SY0279
英文名称:One Step Pcr Cloning Kit
规格:25T
一步法(快速/无缝)克隆试剂盒是一款简单、快速、高效的DNA定向克隆产品,该试剂盒可以将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点,可高效克隆50 bp~10 kp片段。将载体在克隆位点进行线性化,并在插入片段PCR引物5’端引入线性化克隆载体末端序列,使得插入片段PCR产物5’和3’最末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的完全一致的序列 (15 bp~20 bp)。将这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合,在重组酶Exnase的催化下,仅需反应30 min即可进行转化,完成定向克隆。克隆阳性率可达95%以上。克隆载体酶切产物或PCR产物和插入片段PCR产物可以不进行DNA纯化直接用于重组克隆,极大的简化了实验步骤。
试剂盒中包含有重组反应所需缓冲液和重组酶Exnase,Exnase中添加了独特的重组增强因子,显著提高重组克隆效率,即便使用低效率感受态细胞 (107 cfu/μg)也可实现高效克隆 (100 cfu/ng Vector),而且Exnase还兼容常规酶切、PCR反应体系。
一步法(快速/无缝)克隆试剂盒可用于快速克隆、高通量克隆、无缝克隆和DNA定点突变。
产品组份:
5×CE Buffer——————100μl
Exnase——————50μl
500 bp control insert (25 ng/μl)——————5μl
pUC 19 control vector, linearized (50 ng/μl)————5μl
实验流程概览
1) 线性化克隆载体制备;
2) 插入片段扩增引物设计;
3) 插入片段PCR扩增;
4) 进行重组反应;
5) 反应产物转化、涂板;
6) 克隆鉴定。

图一 实验流程概览
注:插入片段PCR扩增时,引物5’端引入线性化克隆载体末端同源序列 (图中以蓝色和橙色标记),使得扩增产物5’和3’最末端序列分别和线性化克隆载体两末端序列完全一致。
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·ATF1-GF报告基因质粒
编号:SY0207
英文名称:ATF1 GFP Reporter Plasmid
规格:1μg
ATF1-GFP报告基因是用于检测ATF1转录活性水平为目的的报告基因。ATF1(Cyclic AMP-dependent transcription factor)是一种活化转录因子,主要通过上调和下调靶基因来影响细胞的生理活动,如细胞的生长和存活等。
ATF1-GFP报告基因主要应用于cAMP/PKA信号通路研究、药物筛选、基因调控和功能的研究等。
pGMATF1-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个ATF1结合位点,可以高效地检测ATF1的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得ATF1-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱

pGM ATF1 -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMATF1-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
·NTP套装(100 mM each)
编号:SY0056
英文名称:NTP Set (ATP, CTP, UTP, GTP, 100 mM each)
规格:4×1mL
本品为ATP、UTP、GTP和CTP共4种溶液的套装,可用于分子生物学中多种相关应用,如体外转录、RNA扩增,siRNA合成等。还可作为多种酶的反应底物或辅酶。
本品为纯度≥99%的ATP、UTP、GTP和CTP的三*盐配制所得的无色透明水溶液,pH (25℃)= 7.0±0.1,浓度为100mM,且无DNase和RNase污染。
产品组份:
| 组分名称 | 规格 | 保存 |
| ATP(100mM) | 1ml | -20℃保存 |
| UTP(100mM) | 1ml | -20℃保存 |
| CTP(100mM) | 1ml | -20℃保存 |
| GTP(100mM) | 1 ml | -20℃保存 |
注意事项
1) 可以室温溶解,溶解后需置于冰上,使用完毕后宜立即置于-20℃保存。
2) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
我公司生产供应销*(代"售")的蛋白质研究正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液特价优惠。
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