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- 详细信息
- 文献和实验
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冷藏
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1年
- 库存:
643
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
DNA Marker I(100~600bp)销*(代"售")是高品质的核酸电泳和回收产品,由北京百奥莱博供应,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多DNA Marker I(100~600bp)等核酸电泳和回收产品请联系我司咨询订购。
名称:DNA Marker I(100~600bp)销*(代"售")
品牌:百奥莱博
规格:100T(2×250μl)
编号:RFT018
产地:国产|进口
本产品是由6条带状双链DNA条带组成的DNA Marker,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer,可根据实验需要,直接取2-5μl电泳,使用方便,电泳图像清晰。6条带的大小和含量分别为100bp(50ng/5μl),200bp(50ng/μl),300bp(50ng/μl),400bp(100ng/μl),500bp(50ng/μl),600bp(50ng/μl) 。该Marker适用于DNA片段大小的确定和对DNA含量的精确定量。
使用方法:
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中就行电泳。
注:根据电泳梳子的厚度和宽度确定上样量。每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl;窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl;宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl。如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子,可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件:凝胶浓度为2.0-2.5%,凝胶长度5-7cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间20-25分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注意事项:
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
我公司的DNA Marker I(100~600bp)销*(代"售"),性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·植物基因组DNA提取试剂盒
编号:RFT038
英文名称:Plant genomic DNA Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,能提取多种植物细胞/组织中的基因组DNA。离心吸附柱可以高效、专一吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | RFT038(50次) | 贮存方式 |
| 缓冲液AP1 | 25 ml | 室温 |
| 缓冲液AP2 | 10 ml | 室温 |
| 缓冲液AP3(浓缩液) | 15 ml | 室温 |
| 漂洗液PW(浓缩液) | 15 ml | 室温 |
| 洗脱缓冲液EB | 15 ml | 室温 |
| RNase A(10 mg/ml) | 300μl | -20℃ |
| 吸附柱CG(白色) | 50套 | 室温 |
| 过滤柱CF | 50套 | 室温 |
| 说明书 | 1份 |
提取获得效率:
| 材料 | DNA得量(μg/100mg) |
| 大麦 | 8-12 |
| 玉米 | 15-20 |
| 番茄 | 4-6 |
| 油菜 | 2-4 |
| 菠菜 | 5-10 |
| 烟草 | 20-25 |
| 小麦 | 25-30 |
准备工作:
1、准备液氮;65℃水浴;无水乙醇;1.5ml灭菌离心管。
2、按照标签所示在缓冲液AP3和漂洗液PW中加入无水乙醇,混匀后盖紧瓶盖后室温贮存备用。
3、每次使用前请检查缓冲液AP1,缓冲液AP2和缓冲液AP3是否有沉淀生成,如果出现沉淀,37℃温浴至沉淀溶解后再使用。
操作步骤:
如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1、取适量植物新鲜组织500mg-1g加入液氮充分研磨,取约100mg粉末置于1.5ml离心管中,加入400μl 缓冲液AP1和6μl RNaseA (10mg/ml),漩涡震荡1分钟。
2、将离心管放在65℃水浴10分钟,水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。
3、加入130μl 缓冲液AP2,颠倒混匀,冰浴5分钟。
4、12,000rpm离心5分钟。
注:此步骤离心去除去垢剂,蛋白以及多糖等杂质。
5、取上清(通常为400μl)转移到过滤柱CF中,12,000rpm 离心1分钟。
6、将滤出液转移到1.5 ml离心管中,加入1.5倍体积(例如400μl的上清液加600μl缓冲液AP3)缓冲液AP3(使用前请注意是否已经加入无水乙醇),立即颠倒混匀,简短离心以去除管盖内壁的水珠。
7、吸取步骤6中的混合液加入到吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中),12,000 rpm离心1分钟,倒掉废液,吸附柱CG放回收集管中。
注:离心吸附柱的最大容积是700μl,如果一次不能完全上柱,可以分次上柱离心,保证全部溶液全部加到离心柱中。
8、向吸附柱CG中加入500μl漂洗液PW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm离心1分钟,倒掉废液,吸附柱CG放入收集管中。
9、重复步骤8。
10、可选步骤:如果离心柱的吸附膜上有颜色,向吸附柱CG中加入500μl无水乙醇,12,000 rpm离心1分钟,倒掉废液,吸附柱CG放入收集管中。
11、将吸附柱CG放回废液收集管中,12,000 rpm离心2分钟。
注:此步骤非常重要,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。
12、将吸附柱CG转入一个干净的1.5ml离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100μl经65℃水浴预热的洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟,12,000 rpm g离心2分钟。
注意:
a.洗脱缓冲液体积最好不少于50μl,体积过小影响回收效率。
b.洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率。
13、DNA产物-20℃保存。
DNA浓度及纯度检测:
基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。提取的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。可配制0.8-1.0%琼脂糖凝胶,使用λ/HindIII判断基因组的大小,完整的基因组大小应在23kb以上。使用分光光度计检测时, OD260/OD280比值应为1.7–1.9之间,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水洗脱,比值可能偏低,但并不表明DNA纯度不高。
储存条件:室温,有效期12个月。
DNA Marker I(100~600bp)销*(代"售")关键词:RFT018,DNA Marker I,百奥莱博,100~600bp,DNA Marker I(100~600bp)
·5M甜菜碱溶液(PCR级)
编号:RFT160
英文名称:5M Betaine Solution(PCR Grade)
规格:5×1ml
甜菜碱,DMSO和甲酰胺有助于减少富含GC模板的二级结构和对这些模板扩增,甜菜碱的浓度通常是0.1M~3.5M,DMSO的浓度在2%~8%之间,而且10%的DMSO会使 Taq polymerase的活性降低达50%,甲酰胺通常使用浓度为1%~5%,根据我们经验,甜菜碱和DMSO联合使用的效果优于甲酰胺。
使用方法:
1、-20℃保存的甜菜碱溶液常温融化,混匀。
2、根据根据PCR反应体系,加入适量体积的5M甜菜碱溶液。
| 20μl 体系 | 反应体系终浓度 | |
| 10×PCR Buffer | 2μl | 1× |
| 5M Betaine* | 4μl | 1 M |
| 模板 | 0.05-0.5μg | as you wish |
| 上游引物 10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| 下游引物 10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| dNTP10mM | 0.5μl | 200μM |
| Taq | 0.5-1μl | 2.5-5 U |
| 灭菌水 | up to 20μl |
注:不同模板,不同片段的扩增可能需要不同浓度的甜菜碱,可以适当调节加入体积,找到适合自己反应的甜菜碱浓度。
储存条件:-20℃,有效期一年。
DNA Marker I(100~600bp)销*(代"售")关键词:RFT018,DNA Marker I,百奥莱博,100~600bp,DNA Marker I(100~600bp)
ARB13390 牛瘦素(LEP)elisa测定使用说明书
ARB12487 大鼠总补体(CH50)elisa检测操作说明书 Rat 50% complement hemolysis,ch50 ELISA KIT
酸性蓝1 Alizarin complexon 129-17-9
ARB13884 猪主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHCⅡ/SLAⅡ)含量检测 Swine major Histocomp*(代"a")tibility complexⅡ,mhcⅡ/slaⅡ ELISA KIT
ARB10167 人TU3A蛋白(TU3A)定量分析 Human tu3a protein ELISA KIT
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67-48-1 *化胆碱
ARB10595 人血小板衍化生长因子BB(PDGF-BB)ELISA检测服务 Human platelet-derived growth factor-bb,pdgf-bb ELISA KIT
ARB13531 兔一氧化*(代"氮")(NO)Elisa定量检测 Rabbit nitric oxide,no ELISA KIT
Pfu酶 TSPP decahydrate
BL1108 一抗稀释液
PY02-057 四硫*(代"磺")酸*煌绿增菌液基础(TTB)GB 250克
HEPES溶液(pH7.4) 1mol/L 100ml
北京百莱博科技有限公司专业生产核酸电泳和回收产品,欢迎来电咨询选购DNA Marker I(100~600bp)销*(代"售")。
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文献和实验1. Migration of marker dyes in native polyacrylamide non-denaturing gels Gel % Bromophenol blue (BP) Xylene cyanole (XC) 3.5 100 460 5.0 65 260 8.0 45 160 12.0 20 70 20.0
绝版分子生物学实用技术分享: I: 20 种用于各种DNA marker 制备的PLASMID: P1: 2k+1.5k+1k+800+700+600+500+400+300+200X2+100X4 (100BP ladder) P2: 3k+1.5k+1k+900+700+500+300X2 (200BP ladder 奇数) P3: 3k+2k+1.4k+1k+800+600+4X2 (200BP ladder 偶数) (P3\P4\P5 组合, 可拓展为1KB ladder
一、实验原理 DNA重组技术的第一步是从不同来源的DNA上将待克隆的DNA片段特异性切下,同时在载体DNA分子(一般为质粒DNA)上打开相应的缺口,然后将两者连接成重组DNA分子。这一特异性的切割过程常由特定的限制性核酸内切酶来完成。 目前在细菌中发现有600多种限制性核酸内切酶,根据其性质的不同可分为三大类,分别为I、II和III类:I类酶识别部位和切点不同,切断部位不定;III类酶的识别部位和切点不同
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