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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
354
- 英文名:
EB staining solution
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
RT避光
- 规格:
10ml
特别提示:包括EB染色液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:EB染色液
英文名称:EB staining solution
产品货号:RFT152
产品规格:10ml
本品是EB的水溶液,浓度为10mg/ml。EB(溴化乙锭)能与核酸分子特异结合,用于观察琼脂糖或聚丙xī酰胺凝胶中DNA或RNA分子。广泛应用于核酸电泳前后的染色以及流式细胞仪的样品染色处理等。溴化乙锭(Ethidium Bromide;C21H20N3Br;分子量为394.32)含有一个可以嵌入DNA 碱基的三环平面基团。它与DNA 的结合没有碱基序列特异性。大约每2.5 个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后,紫外激发后呈现荧光,可以检测到10ng 的DNA 条带。
使用方法:
使用前,先离心快甩EB溶液至管底,以防开盖后EB造成的污染。
琼脂糖电泳凝胶的制备及染色(预染法):
1. 按照所需浓度称取琼脂糖,加入TAE或TBE缓冲液,在微波炉中加热至彻底溶解。
2. 等凝胶温度降至大约50-60℃以下时,加入10 mg/ml EB溶液至终浓度为0.5μg/ml (如100ml凝胶加入EB量为5μl);彻底摇匀后铺胶并插入梳子。
3. 凝固后,将梳子轻轻拔出。
4. 上样电泳,电泳结束后紫外观察。
琼脂糖电泳凝胶的制备及染色(后染法):
1. 按照所需浓度称取琼脂糖,加入TAE或TBE缓冲液,在微波炉中加热至彻底溶解。
2. 等凝胶温度降至大约50-60℃以下时,不要加入EB溶液,直接铺胶并插入梳子。
3. 凝固后,将梳子轻轻拔出。
4. 上样电泳。
5. 电泳结束后将凝胶浸泡在含有EB的TAE或TBE染色液中(染色液配制:100ml 缓冲液中加入150-200μl EB溶液,混匀)染色15-20分钟;TAE或TBE缓冲液中脱色10-15分钟。
6. 紫外观察结果。
储存条件:室温避光。
我公司销售的EB染色液报价,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验后放入电泳槽中,浸泡在4 ℃预冷的电泳液中解旋20分钟。 3. 玻片水平放置阳极端附近,4 ℃电泳20到25分钟(25 V,300 mA)。可在电泳槽周围加冰块以保持低温。 四、中和与染色: 1. 电泳结束,将胶板浸泡于中和液中,每次10分钟,共中和3次,每次要更换中和液。最后晾干。 2. 取出胶板,置于染色缸中,在2 μg/ml的EB染色液中,暗处染色5到10分钟。 3. 蒸馏水漂洗2次,每次5分钟。 稍晾干,滤纸
细胞(NVN),核染色质着橘红色并呈正常结构;晚期凋亡细胞(NVA),核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状。2、AO/EB染色及观察结果:取 20-100μl的1:100稀释的染色剂置于载玻片的贴壁细胞上室温下静置20min,PBS洗涤2-3遍,上覆盖玻片,荧光显微镜下观察结果并计数20-200个细胞。ym1051:1、能否提供具体实验步骤?2、您在文中所说的"1:100稀释的染色剂"是怎样稀释的?如何在载玻片上种上贴壁细胞?zhongyisheng:1、用1mlEP管稀释时,先取微量的染色剂,然后再取稀释
减短电泳时间,降低电压,增强凝胶浓度 EB染色的DNA,紫外光源不合适 应用短波长(254 nm),增强紫外灯灵敏度 DNA带缺失 小DNA带走出凝胶 减短电泳时间,降低电压,增强凝胶浓度 分子 大小相近的DNA带不易分辨
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