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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
阴凉干燥
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Protease inhibitor cocktail for fungal and yeast extracts
- 库存:
880
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖蛋白酶抑制剂混合物(真菌或酵母蛋白提取用)厂家价格在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:蛋白酶抑制剂混合物(真菌或酵母蛋白提取用)厂家价格
规格:1ml|5×1ml
产地:国产|进口
英文名:Protease inhibitor cocktail for fungal and yeast extracts
本品是一种用于真菌或酵母蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物(100mM AEBSF,1.5mM E64,2mM Pepstatin A,500mM Phenanthroline in DMSO)。一个包装的本产品通常足够用于100ml裂解液的配制。
真菌或酵母提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等,容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰,从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。
本产品为经优化和测试的用于真菌或酵母蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物,包含了广谱的丝*酸、半胱*酸和酸性蛋白酶抑制剂、以及金属蛋白酶抑制剂。
本产品使用便捷,通常以1:100的比例把蛋白酶抑制剂混合物加入裂解液中,即可用于真菌或酵母蛋白的提取,并有效抑制蛋白降解。
本产品可以有效抑制真菌或酵母提取物中的各种蛋白酶活性,如丝*酸蛋白酶、半胱*酸蛋白酶、苏*酸和天冬*酸蛋白酶、金属蛋白酶等。其中AEBSF是一种水溶性的丝*酸蛋白酶不可逆抑制剂,其抑制常数与PMSF和DFP的抑制常数相似,可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纤溶酶(plasmin)、激肽释放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶,作为PMSF和DFP的替代物,AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液稳定性更好。E64是半胱*酸蛋白酶不可逆抑制剂;Pepstatin A是天冬*酸蛋白酶可逆抑制剂;Phenanthroline是金属蛋白酶的可逆抑制剂。
使用方法:
1、本蛋白酶抑制剂混合物为100×的储存液,使用时按照1:100的比例加入到裂解液中(例如,1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制剂混合物),混匀后即可使用。含有蛋白酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配,不宜配制后冻存待后续使用。
2、待所需的抑制剂添加完毕混匀后,就可以开始进行常规细胞或组织的裂解和蛋白提取。
储存条件:-20℃,有效期12个月。
蛋白酶抑制剂混合物(真菌或酵母蛋白提取用)厂家价格极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·Long Taq DNA聚合酶
编号:RFT098
英文名称:Long Taq DNA Polymerase
规格:500U|5×500U
本品是由pfu DNA 聚合酶和Taq DNA聚合酶按照一定的比例混合而成。两种酶协同作用实现了扩增效率、合成速度和延伸性能的完美统一,可以合成超长的DNA片段。当扩增具有复杂的二级结构(GC rich等)的模板或具有重复序列的模板时,使用GC buffer进行PCR扩增将非常有效。另外,此酶具有比Taq DNA聚合酶约5倍的PCR可信度。该酶的大多数PCR产物3’端带碱基A,可以通过TA克隆法进行克隆。
产品组分:
Long Taq DNA Polymerase(5U/μl)————————100μl
2×GC buffer(含Mg2+)—————————————1ml
活性定义:1单位(U) Long Taq DNA Polymerase活力定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
贮存液:50 mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 50 mM KCl ; Stabilizers; 50% glycerol
使用方法;
1. 按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
| 成分 | 体积 | 终浓度 |
| Template | 0.1-1μg | as you wish |
| Primer 1(10μM) | 1μl | 200nM |
| Primer 2(10μM) | 1μl | 200nM |
| 2×GC buffer | 25μl | 1× |
| dNTP Mixture(10 mM) | 1μl | 200μM each |
| Long Taq (5 U/μl) | 0.5-1μl | 2.5-5U |
| ddH2O | up to 50μl | - |
2. 混匀后,离心快甩将反应液收集到管底。
3. PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
4. PCR仪上执行以下程序:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 初始变性 | 94℃ | 1-5 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 30 sec | 25-40* |
| 退火 | Tm-5℃* | 30 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 1 min/kb | |
| 最后延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
注:PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
储存条件:-20℃,有效期一年。
蛋白酶抑制剂混合物(真菌或酵母蛋白提取用)厂家价格关键词:真菌或酵母蛋白提取用,Protease inhibitor cocktail for fungal and yeast e,RFT197,蛋白酶抑制剂混合物(真菌或酵母蛋白提取用)
BL0323 弗氏完全佐剂 Freund "s Adjuvant Complete
60-18-4 L-Tyrosine L-酪*酸
CYB161068 人血清IgM(液体)70~80%纯度,4mg/ml浓度
CYB163021 羊抗人纤维蛋白原-RBITC
TRNzol总RNA提取试剂
53-84-9 NAD 氧化型辅酶Ⅰ
ARB11987 大鼠L*丙*酸解*酶(PAL)Elisa方法检测 Rat l-phenylalanine ammonla-lyase,pal ELISA KIT
ARB14050 猴白介素2(IL-2)ELISA代测服务 Monkey interleukin 2,IL-2 ELISA KIT
HC0149 大龙吸头
ARB13285 小鼠横纹肌辅肌动蛋白α(sm ActInIn-α)酶免分析 Mouse skeletal muscle actinin-α,sm actinin-α ELISA KIT
585-99-9 蜜二糖 Melibiose
乳酸* Reactive brilliant red 867-55-0
过氧化物酶染色液(联*(代"*")*(代"胺")法) 4×10ml|4×20ml
BL1042 胰蛋白胨大豆琼脂TSA
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·2×Taq PCR MasterMix
编号:RFT095
规格:500μl|5×500μl
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂和优化剂以及稳定剂,浓度为2×。使用时,只需补加实验所需的引物和模板后即可进行PCR反应,可最大限度的减少人为误差,具有快速简便、稳定性好等优点。适用于常规PCR反应、复杂模板(如GC含量高,有二级结构)的扩增以及大规模基因检测。使用该产品得到的PCR扩增产物末端含有一个A碱基,可以直接用于TA克隆。以50μl PCR反应体系为例,每次使用25μl 2×MasterMix,500μl可做20次 50μl PCR反应。
质量控制:经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余基因组DNA;能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。
使用方法;
1、冰浴中彻底融化2×MasterMix,混匀后Minispin将溶液收集到管底。
2、按照下表在0.2ml PCR管中制备反应体系:
| 50μl反应体系 | 终浓度 | |
| 2×MasterMix | 25μl | 1× |
| 上游引物 10μM | 1-5μl | 0.2-0.8μM |
| 下游引物 10μM | 1-5μl | 0.2-0.8μM |
| 模板 | ×μl | 10pg-1μg |
| 水 | 补至50μl |
3、快甩离心将反应液收集到管底。
4、PCR仪如果没有热盖加热的话,补加25μl矿物油。
5、PCR仪上执行以下程序:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 初始变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 30 sec | 25-40* |
| 退火 | Tm-5℃* | 30 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 1 min/kb | |
| 最后延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
*注: PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异。在实际操作中需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物的长短等具体情况,设定最佳的反应条件(温度、时间等)。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
我公司正在打折促销蛋白质研究全系列产品,恭候您的咨询选购蛋白酶抑制剂混合物(真菌或酵母蛋白提取用)厂家价格。
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文献和实验【原创】Western Blot技术交流第一期 蛋白样品的获得
究者需要对其进行细胞结构中蛋白质组分定位检测就需要用到此方法提取蛋白质,此方法是通过裂解液的裂解强度不同来分别提取同一细胞样本中不同结构的蛋白,这对于研究目的蛋白主要存在细胞于哪个结构中提供必要的技术。 在蛋白的提取过程中,因为实验样本如细胞、组织中本来就存在的各种蛋白酶在裂解过程中被液释放出来降解相应的蛋白质,所以在提取过程中不可避免的要使用到蛋白酶抑制剂,目前蛋白酶抑制剂的种类很多,最常用的是PMSF,最有效的是蛋白酶抑制剂混合物,其包含多种蛋白酶抑制剂,可以有效的防止蛋白在提取过程中蛋白的降解
问:请问各位高手,我想让酵母蛋白酶A失活,决定采用PCR进行DNA序列的突变,此法行的通吗?可有前人研究过? 答:国外有了"蛋白酶缺失"的用于重组蛋白表达的菌株。国内也许也有,小龙对于上游不大懂,不知道自己构建蛋白酶缺失的酵母菌是否有技术上的难度。参见一篇综述《生命的化学》2003 年23 卷1 期CHEMISTRY OF L IFE 2003,23(1) 酵母表达系统及其应用研究。 假如只是为了降低重组蛋白表达时被水解的可能,在提取液中加入蛋白酶抑制剂如PMSF可以部分解决。
/L CaCl2、0.24 mol/L 蔗糖、0.5 mmol/L 亚精胺(Sigma)、0.15 mmol/L 精胺(Sigma)、0.02% 叠氮钠,并加入蛋白酶抑制剂混合物,见 7.2.1。 ( 3 ) 这种缓冲液能够被贮存在 4°C 条件下数月,需要防止真菌污染。蛋白酶抑制剂在使用之前方可加入,不要在准备溶剂的时候加入。 2.3 细胞核蛋白质的分离和提取 所有溶液都使用蛋白酶抑制剂。 ( 1 ) 含有膜和残留细胞骨架(图 8-1,泳道 M):第一份馏分用 NSB
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