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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent
- 库存:
244
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括G250蛋白快速染色试剂特价优惠在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:G250蛋白快速染色试剂特价优惠
编号:WE0290
英文名:ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent
品牌:百奥莱博
该产品是以考马斯亮蓝G-250染料为基础,应用于SDS-PAGE凝胶的快速蛋白染色试剂。灵敏度高,最低可检测到20ng蛋白。染色过程简单,快速,无需孵育,染色后直接水洗,即可产生清晰背景。
注意事项:
1、若要获得最佳的脱色效果,可多次重复脱色步骤或在去离子水中脱色过夜。
2、将凝胶加入染色液后加热至沸腾,继续在脱色摇床上摇动5分钟,可增强染色效果。
3、本产品可重复使用2-3次,染色效果会随使用次数增加有所减弱。
4、本产品有轻微腐蚀性,请带手套操作。
操作步骤:
1、将电泳后的 PAGE 胶取出放入容器中,加入适量纯水(以充分覆盖PAGE 胶为宜),加热至沸腾后停止,弃去液体。
2、加入适量快速染色液(液面覆盖凝胶即可),加热至沸腾后停止,弃去染色液。
3、加入适量蒸馏水,加热至沸腾后停止,倾去蒸馏水,重复此步骤脱色至背景清晰。
实验图例
使用ShowProtein-G250蛋白快速染色试剂对SDS-PAGE染色后,不同浓度蛋白染色结果
储存条件:-20℃
更多有关G250蛋白快速染色试剂特价优惠的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·SDS-PAGE上样缓冲液(还原,5×)
编号:WE0288
英文名称:SDS-PAGE Loading Buffer(Reducing, 5×)
规格:5×2ml
SDS-PAGE上样缓冲液(还原,5×)是以*酚蓝为染料,5倍浓缩的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液,应用于还原型SDS-PAGE的蛋白样品制备和上样。该缓冲液中含有DTT,可使蛋白质分子的链内二硫键和链间二硫键断裂,通过二硫键连接的各蛋白亚单位彼此分离,经考马斯亮蓝染色以后在电泳凝胶上显现清晰蛋白条带。
注意事项:
1、加样前在室温或37-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀,以确保溶液混合均匀。
2、本试剂含有DTT,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
3、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、将SDS-PAGE上样缓冲液(还原,5×)与蛋白样品按照1:4的比例混匀。
2、将蛋白样品置于沸水浴中加热3-5分钟。
3、待蛋白样品充分变性后冷却至室温,以小于3000 rpm的条件离心30秒。
4、离心后,以取适量上清,直接加入SDS-PAGE凝胶加样孔内, 进行常规电泳。
储存条件:-20℃
·新型植物基因组DNA提取试剂盒
编号:WE0174
英文名称:NewPurify Plant Genomic DNA Extraction Kit
规格:50次|200次
本试剂盒采用高效、专一结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲系统,适合从各种不同的植物新鲜或冻存组织中提取基因组DNA,并可最大限度地去除植物组织中的杂质。本试剂盒无需使用酚/*仿抽提,操作安全。提取的基因组DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠,适用于PCR、荧光定量PCR、分子标记、文库构建等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer LP1 | 25ml | 100ml |
| Buffer LP2 | 10ml | 40ml |
| Buffer LP3(浓缩液) | 21ml | 84ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml | 75ml |
| Buffer GE | 15ml | 60ml |
| RNase A(10 mg/ml) | 300μl | 1.25ml |
| 吸附柱DM及收集管 | 50套 | 200套 |
自备试剂:无水乙醇
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer LP3和Buffer GW2中加入无水乙醇。使用前请检查Buffer LP1和Buffer LP2是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer LP1和Buffer LP2于56℃水浴重新溶解。
操作步骤:
1、取植物新鲜组织100 mg左右或干重组织约20 mg,加入液氮充分研磨。
2、将研磨后的粉末收集到离心管(自备)中,加入400μl Buffer LP1和6μl RNase A(10 mg/ml),涡旋振荡1分钟,室温放置10分钟,使其充分裂解。
注意:
1)使用涡旋振荡或移液器吹打,充分裂解组织,组织裂解不完全会影响最终的DNA得率。
2)请勿在使用前将Buffer LP1与RNase A混合。
3、加入130μl Buffer LP2,混匀,涡旋震荡1分钟。
4、12000rpm(~~13400×g)离心5分钟,将上清移至新的离心管(自备)中。
5、加入1.5倍体积的Buffer LP3(使用前检查是否已加入无水乙醇),充分混匀(如500μl滤液加入750μl Buffer LP3)。
注意:加入Buffer LP3后应立即混匀,可能会产生沉淀但不影响后续实验。
6、将上步所得溶液和沉淀全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如吸附膜呈现绿色,向吸附柱中加入500μl无水乙醇,12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、重复步骤7.
9、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱放到一个新离心管(自备)中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤10;若洗脱体积小于100μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少DNA的总产量。如果所得DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE进行洗脱。
4)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
G250蛋白快速染色试剂特价优惠关键词:G250蛋白快速染色试剂,WE0290,ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent
·HRP标记抗His标签单克隆抗体
编号:WE0335
英文名称:HRP Conjugated Anti His-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:100μl
该抗体可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端和内部的六个连续组*酸标签,而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的His-Tag融合蛋白。产品经HRP直接标记,无需使用二抗,可直接用相应酶底物显色或化学发光法检测目的蛋白,减化了实验步骤,避免由二抗交叉反应引起的非特异性条带。
抗体类型:鼠IgG
免疫原:人工合成多肽
标记物:HRP
应用范围:WB(1:500-3000)、ELISA(1:1000-20000)
·RNase A溶液(100mg/ml)
编号:WE0225
英文名称:RNase A(100mg/ml)
规格:1ml
该抗体可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端和内部的六个连续组*酸标签,而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的His-Tag融合蛋白。产品经HRP直接标记,无需使用二抗,可直接用相应酶底物显色或化学发光法检测目的蛋白,减化了实验步骤,避免由二抗交叉反应引起的非特异性条带。
抗体类型:鼠IgG
免疫原:人工合成多肽
标记物:HRP
应用范围:WB(1:500-3000)、ELISA(1:1000-20000)
·FastStar热启动DNA聚合酶
编号:WE0122
英文名称:HotStar DNA Polymerase
规格:500U|2500U
HotStar DNA Polymerase是抗Taq酶单克隆抗体和WE0101 Taq DNA Polymerase的混合制品,适用于Hot Start PCR。使用Taq酶抗体进行PCR扩增时,高温变性前由于Taq酶抗体与Taq酶结合抑制DNA聚合酶活性,能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。Taq酶抗体在PCR反应最初的DNA变性步骤中变性,DNA聚合酶活性恢复,达到热启动效果。使用本品无需特殊地对Taq酶抗体失活处理,可以在常规PCR反应条件下使用。
HotStar DNA Polymerase具有5"→3"DNA聚合酶活性和5"→3"外切酶活性,无3"→5"外切酶活性,酶延伸速度2 kb/min,可以扩增长度达5 kb的片段。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高的特点,主要适用于PCR法扩增DNA片段、DNA序列测定等实验。
产品组成:
| 组份 | 500U | 2500U |
| HotStar DNA Polymerase, 5 U/μl | 100μl | 5×100μl |
| 10×PCR Buffer | 1.8ml | 5×1.8ml |
注意:本产品的10×PCR Buffer中含有15 mM*离子。
活性定义:用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制:
1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
2、经检测无外源核酸酶活性;
3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 10×PCR Buffer | 5μl | 1× |
| dNTP Mix,10 mM each | 1μl | 200μM each |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| HotStar DNA Polymerase,5U/μl | 0.25-0.5μl | 1.25-2.5 U/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:可以在室温下配制反应液,须将试剂置于冰上。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 25-35个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 30 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 2 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
G250蛋白快速染色试剂特价优惠关键词:G250蛋白快速染色试剂,WE0290,ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent
F030621 FITC标记兔抗山羊IgG抗体 Rabbit Anti-Goat IgG*FITC
虎红 Merrifield resin 632-69-9
乙酰螺旋霉素 Cytosine 24916-51-6
ARB12524 大鼠核因子κB(NF-κB)含量分析 Rat nuclear factor-kappa b,nf-κb ELISA KIT
6409-77-4 核固红 Nuclear fast red
RPMI 1640 Medium(含双抗) 500ml
磷酸铵 DAB 25447-33-0
BTN60910 非冻型血液DNA保存液 Blood DNALOCKER
F030626 FITC标记兔抗大鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Rat IgG*FITC
ARB13450 鸡白介素9(IL-9)Elisa分析 Chicken interleukin 9,IL-9 ELISA KIT
ARB13153 小鼠神经营养因子4(NT-4)Elisa定量检测 Mouse neurotrophin 4,nt-4 ELISA KIT
糖原D-PAS染色液(淀粉酶消化法) 5×50ml|5×100ml
ARB11159 人周期素依赖性激酶7(CDK-7)酶标法分析 Human cyclin-dependent kinase 7,cdk-7 ELISA KIT
ARB10376 人甘露糖受体(MR)含量测试 Human mannose receptor,mr ELISA KIT
磷酸缓冲盐溶液(无**) 1×PBS|10×PBS 500ml
ARB13619 兔子促卵泡素(FSH)ELISA代测服务 Rabbit follicle-stimulating hormone,fsh ELISA KIT
BOC-L-高*丙*酸 2,6-Diaminopimelic acid 100564-78-1
ARB13458 鸡网状内皮增生症(Chicken REV)酶免分析
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文献和实验摘要: 考马斯亮兰G250与蛋白质结合,在0-1000ug/ml范围内,于波长595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比,可用于蛋白质含量的测定。考马斯亮兰G250与蛋白质结合迅速,结合产物在室温下10分钟内较为稳定,是一种较好的蛋白质定量测定方法。 1. 实验部分 1.1 仪器 与 试剂 : Labtech UV POWER紫外
不管是临床医生和科研工作者,我觉得二者的共同敌人都是一致的,那就是时间。作为一个临床医生,没(zen)事(me)儿(ke)的(neng)时候搞搞科研,必须想尽一切办法对付(挤出)时间。在开始 WB 之前的蛋白定量耗费时间有点长,如果用 BCA 法的话光孵育就需要半个小时,整个过程耗时接近 1 小时。因此为了配合快速 WB,我们同样需要一个快速蛋白定量的方法。因此今天我们来聊聊如何 1 分钟测出蛋白浓度。蛋白定量法开始之前我们有必要复习一下理论知识。蛋白定量至少有 5 种方法: BCA
一. 实验原理SDS-PAGE是对蛋白质进行量化,比较及特性鉴定的一种经济、快速、而且可重复的方法。该法是依据混合蛋白的分子量不同来进行分离的。SDS是一种去垢剂,可与蛋白质的疏水部分相结合,破坏其折叠结构,并使其广泛存在于一个广泛均一的溶液中。SDS蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。在样品介质和凝胶中加入强还原剂和去污剂后,电荷因素可被忽略。蛋白亚基的迁移率取决于亚基分子量。二. 试剂和器材试剂:1. 5x样品缓冲液(10ml):0.6ml 1mol/L的Tris-HCl(pH
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