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- 百奥莱博
- 北京
- WE0194-LTU
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温(15～30℃)
- 保质期：
长期
- 英文名：
RNAtiqu Virus RNA Extraction Kit
- 库存：
591
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货病毒RNA提取试剂盒厂家由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多病毒RNA提取试剂盒等RNA纯化产品请联系我司咨询订购。
名称：北京现货病毒RNA提取试剂盒厂家
产地：国产|进口
英文名：RNAtiqu Virus RNA Extraction Kit
品牌：百奥莱博
本试剂盒采用可以特异性结合病毒RNA的吸附柱和独特的缓冲液系统，适用于从血清、血浆、尿液、脑脊液等无细胞体液及细胞培养上清液中分离病毒RNA。病毒RNA特异性地结合到硅基质膜上，而污染物则流过该膜。通过两次高效洗涤完全去除蛋白质等杂质，然后用无RNase的水或试剂盒提供的RNase-Free Water洗脱高纯度的病毒RNA。由本试剂盒提取的病毒RNA可直接用于RT-PCR、Real-time RT-PCR和印迹分析等实验。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 |
| Buffer GL | 15ml |
| Buffer RW1 | 40ml |
| Buffer RW2(浓缩液) | 11ml |
| 蛋白酶K | 12.5 mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.2 5ml |
| RNase-Free Water | 10ml |
| 吸附柱RS及收集管 | 50套 |
| RNase-Free离心管(1.5ml) | 50个 |
自备试剂：无水乙醇，0.9% NaCl。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、预防RNase污染，应注意以下几方面：
1)使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
2)玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5M的NaOH中浸泡10分钟，用水彻底冲洗后高压灭菌。
3)配制溶液应使用无RNase的水。
4)操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
3、血清或血浆避免反复冻融导致蛋白变性或产生沉淀，减少病毒滴度进而影响提取病毒核酸的产量。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer RW2中加入无水乙醇。
5、Buffer GL如果产生沉淀，可在56℃加热使其溶解后室温放置。
6、所有离心步骤若无特殊说明均在室温下进行，且所有操作步骤动作要迅速。
操作步骤：
1、室温下取200μl血清或血浆加到1.5ml离心管(自备)中。
注意：不足200μl可以加入0.9 % NaCl(客户自备)补足。
2、向上步溶液中加入20μl 蛋白酶K ，混匀。
3、加入200μl Buffer GL，涡旋震荡15秒。
注意：不要直接把蛋白酶K 加到Buffer GL中。
4、56℃ 孵育15分钟，短暂离心，将管壁上的溶液收集到管底。
5、加入250μl无水乙醇，涡旋震荡15秒，室温孵育5分钟，短暂离心，将管壁上的溶液收集到管底。
6、将步骤5得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中，若一次不能将全部溶液加入吸附柱中，请分两次转入，12000rpm(~～13400×g)离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer RW1，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入500μl无水乙醇，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
10、12000rpm 离心3分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：
1)这一步的目的是将吸附柱中残余乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
2)推荐步骤：将吸附柱放入一个新的1.5ml离心管(自备)中，打开管盖，56℃烘箱孵育3分钟，使吸附柱的膜彻底干燥。
11、将吸附柱置于一个新的无RNase离心管中，向吸附柱的中间部位悬空加入20-50μl RNase-Free Water，室温放置5分钟，12000rpm离心1分钟，收集RNA溶液，-70℃保存RNA，防止降解。
注意：
1)RNase-Free Water体积不应小于20μl，体积过小影响回收率。
2)如果要提高RNA的产量，可用20-50μl新的RNase-Free Water重复步骤11。
3)如果要提高RNA浓度，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，重复步骤11。
储存条件：室温(15～30℃)。
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文献和实验填补Qiagen空白的植物RNA提取试剂盒（包括多糖多酚困难样品）
的EASYspin植物RNA提取试剂盒，20分钟可以轻松提取，不需要液氮，无苯酚氯仿。高质量的RNA可以成功完成下游反应试验。第三：实践过程中我们发现，部分复杂植物或者DNA含量特别丰富的植物样品使用Qiagen的RNeasy plant mini kit 会有明显残留。尝试北京艾德莱的RN09 EASYspin植物RNA快速提取试剂盒也一样有明显残留。对此问题Qiagen并没有提供优秀的解决方案。Qiagen只是建议使用传统的DNA酶消化的方法来解决，但是众所周知DNA酶消化的方法非常繁琐，费时间，消化
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