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冷藏
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长期
- 英文名:
Multiplex PCR MasterMix(UNG)
- 库存:
718
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)厂家
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:Multiplex PCR MasterMix(UNG)
编号:WE0126
本品是由BaldStar Taq DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs(含dUTP)、UNG酶以及PCR稳定剂等组成的PCR预混体系。使用本产品无需进行繁杂的PCR反应条件的优化过程,只需进行简单的条件摸 索即可轻松进行多重PCR反应。
本产品所含的BaldStar Taq DNA Polymerase是经化学修饰的热启动酶,可以有效 减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异扩增。独特的缓冲体系,使多重PCR反 应所有的引物都能有效延伸,无需额外优化。此MasterMix中还包含GC Enhancer,有 助于实现“困难”模板(比如,高GC含量的模板)的高效扩增。本产品运用dUTP-UNG 防污染系统,可有效去除了PCR产物的残留污染,大大降低了由于扩增产物污染而导 致的假阳性。UNG酶在PCR循环中的预变性步骤即可被灭活,因此不会影响新的含dU 碱基PCR产物的形成。
本品可有效防止PCR产物的残留污染,适用于防污 染多重PCR反应,比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。
欲了解更多北京现货防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)厂家的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
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北京现货防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)厂家关键词:防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶),WE0126,Multiplex PCR MasterMix(UNG)
·蛋白银染试剂盒
编号:WE0281
英文名称:Protein Silver Stain Kit
规格:20次
本试剂盒采用高灵敏度的银染染料,可应用于变性胶及非变性胶的蛋白染色,具有目的条带清晰、背景低,操作时间可灵活控制的优点。另外,本试剂盒增加了一步短时敏化作用步骤,可明显降低背景及提升目的条带的亮度。
试剂盒组成:
| 组份 | 20次 |
| Silver Stain Sensitizer(500×) | 2×1ml |
| Silver Stain Enhancer | 3ml |
| Silver Stain | 2×250ml |
| Silver Stain Developer | 4×125ml |
注意事项:
1、请提前准备50ml固定液(超纯水:乙醇:冰醋酸=6:3:1)、50ml洗脱液(10%乙醇)和50ml终止液(5%的冰醋酸)。
2、操作时请使用去离子水和洁净的玻璃或塑料器皿,须戴一次性手套进行操作。
3、整个银染过程需在摇床上进行,摇床转速约60 rpm左右。
4、需自备乙醇,冰醋酸。
操作步骤:
以下操作步骤中各溶液的用量以大小为8.5×5.5 cm、厚度为1.0 mm的凝胶为例,以凝胶全部浸没到溶液为准,置于摇床上操作,一般用量25ml。对于大型凝胶,各溶液的使用量需按凝胶体积的比列放大。
请提前准备好50ml固定液(超纯水:乙醇:冰醋酸=6:3:1)、50ml洗脱液(10%乙醇)和50ml终止液(5%的冰醋酸)。
1、水洗:电泳完成后,用超纯水洗胶2次,每次洗涤5分钟。
2、固定:用25ml固定液固定凝胶2次,每次固定15分钟。
3、洗脱:用洗脱液洗胶2次,每次洗涤5分钟。
4、水洗:用超纯水洗胶2次,每次洗涤5分钟。
5、增敏:将上一步洗好的凝胶置于银染增敏工作液中,室温下准确孵育1分钟后用超纯水洗胶3次,每次洗涤20秒。
银染增敏工作液的配制:取50μl Silver Stain Sensitizer(500×)加入到25ml超纯水中,混匀。
6、银染:弃去超纯水,将凝胶置于银染工作液中孵育30分钟。
银染工作液的配制:取25ml Silver Stain加入50μl Silver Stain Enhancer混匀。
7、水洗:用超纯水快速洗胶2次,每次洗涤准确控制为20秒。
8、显影:立即将洗好的凝胶浸没在显影液中,室温孵育2-3分钟,直至蛋白条带显示清晰。
显影液的配制:取25ml Silver Stain Developer加入30μl Silver Stain Enhancer混匀。
注意:显影30秒内,蛋白条带开始显现,继续显影至2-3分钟。若蛋白条带显色较浅,可适当延长显影时间至5分钟及以上。
9、终止:用终止液洗去凝胶上的显影液后,将凝胶浸泡在新的终止液中反应10分钟。
实验图例
BSA蛋白样品经过10%的SDS-PAGE凝胶电泳后银染结果
BSA蛋白分子量约为66 kD,上样量从左到右分别为50ng,10ng,5ng
储存条件:室温。
北京现货防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)厂家关键词:防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶),WE0126,Multiplex PCR MasterMix(UNG)
·无内毒素质粒中提试剂盒
编号:WE0166
英文名称:NoEndo Plasmid Midi Kit
规格:50次
内毒素是质粒提取中常见的污染物,由于真核细胞对内毒素非常敏感,因此,如果质粒中含有内毒素会大大降低真核细胞转染效率。本试剂盒提供一种简单、快捷、高效提取无内毒素质粒的新方法,提取的质粒最大限度去除内毒素,并能有效去除基因组DNA、RNA、蛋白等污染。
本试剂盒通过碱裂解法裂解细胞,新型硅基质膜高效专一的结合质粒DNA,同时采用特殊的缓冲液系统和除内毒素过滤柱,有效去除内毒素、蛋白等杂质。由本试剂盒所得质粒纯度高、质量稳定,特别适用于细胞转染,同时也可用于DNA测序,PCR,基于PCR的突变,体外转录,转化细菌,内切酶消化等下游实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer P1 | 30ml |
| Buffer P2 | 30ml |
| Buffer E3 | 30ml |
| Buffer PS | 15ml |
| Buffer PW(浓缩液) | 10ml |
| Endo-Free Buffer EB | 10ml |
| RNase A(10 mg/ml) | 600μl |
| 过滤柱FM及收集管 | 50套 |
| 吸附柱DL及收集管 | 50套 |
自备试剂:无水乙醇、异丙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、所有组分可在干燥、室温(15~30℃)环境稳定保存1年,更长时间保存可置于2~8℃,加入RNase A的Buffer P1 置于2~8℃可稳定保存6个月。
2、第一次使用前,将RNase A溶液全部加入到Buffer P1中,混匀,置于2–8℃保存,使用前需在室温中放置一段时间,恢复至室温后使用。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前请先检查Buffer P2 和Buffer E3是否出现结晶或沉淀,如有结晶或沉淀现象,可在37℃水浴几分钟,即可恢复澄清。
5、注意不要直接接触Buffer P2和Buffer E3,使用后应立即盖紧盖子。
6、提取质粒的量和纯度与细菌培养浓度、菌株种类、质粒大小、质粒拷贝数等因素有关。
操作步骤:
1、取5-15ml过夜培养的菌液,加入离心管(自备)中,13000rpm(~~~16200×g)离心1分钟收集细菌,尽量吸弃全部上清。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入500μl Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A),使用移液器或涡旋振荡器充分混匀,悬浮细菌沉淀。
注意:如果菌块未彻底混匀,将会影响裂解效果,使提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入500μl Buffer P2,温和地上下颠倒混匀8-10次,使菌体充分裂解,室温放置3-5分钟。此时溶液应变得清亮粘稠。
注意:温和混匀,不要剧烈震荡,以免打断基因组DNA,造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。如果溶液未变得清亮,提示可能菌量过大,裂解不彻底,应减少菌体量。
4、向离心管中加入500μl Buffer E3,立即上下颠倒混匀8-10次,此时出现白色絮状沉淀,室温放置5分钟。13000rpm离心5分钟,吸取上清,将上清加入过滤柱FM中(已装入收集管),13000rpm离心1分钟过滤,将收集管中的滤液转移到离心管(自备)中。
注意:
1)Buffer E3 加入后应立即混匀,避免产生局部沉淀。
2)吸附柱的最大容积为750μl,所以上清液请分两次过滤,并混合于同一自备离心管中。
5、向滤液中加入450μl异丙醇,上下颠倒混匀。
6、柱平衡:向已装入收集管的吸附柱中加入200μl Buffer PS,13000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、将步骤5中滤液与异丙醇的混合溶液转移到平衡好的吸附柱(已装入收集管)中。
8、13000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:吸附柱的最大容积为750μl,所以第5步中所得溶液分多次过柱。
9、向吸附柱中加入750μl Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇),13000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。
10、将吸附柱重新放回收集管中,13000rpm离心1分钟。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
11、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附膜的中间部位加入100-200μl Endo-Free Buffer EB,室温放置2-5分钟,13000rpm离心2分钟。-20℃保存质粒。
注意:
1)为了增加质粒的回收效率,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置2-5分钟,13000rpm离心2分钟。Endo-Free Buffer EB在65-70℃水浴预热,适当延长吸附和洗脱的时间,可以增加提取效率。
2)质粒拷贝数较低或>10 kb时,Endo-Free Buffer EB在65-70℃水浴预热,可以增加提取效率。
储存条件:室温(15~30℃)
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京现货防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶)厂家。
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