北京一管式病毒DNA-RNA提取试剂盒说明书

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博供应的北京一管式病毒DNA-RNA提取试剂盒说明书用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多一管式病毒DNA-RNA提取试剂盒等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。

名称：北京一管式病毒DNA-RNA提取试剂盒说明书
英文名：One-tube virus RNA-DNA extraction kit
编号：BTN80101
产地：国产|进口
规格：50次
本试剂盒是整合一管式病毒DNA提取试剂盒和一管式病毒RNA提取试剂盒两产品而得，专门用于从血清(血浆)等液体样品中同时提取病毒DNA(如HBV DNA)和病毒RNA(如HCV RNA和HIV RNA)的产品。本产品灵敏度高，稳定性好，使用简单快捷，尤其适合于整合到临床PCR或RT-PCR 检测试剂盒中。

试剂盒特点：
1. 回收率高，可以达到90%以上，高于绝大部分基于离心柱的提取方法。可以跟QIAGEN的同类产品媲美。
2. 灵敏度高，通过PCR 检测到病毒DNA的最终灵敏度可以达到30 拷贝/mL样品，通过RT-PCR 检测到病毒RNA的最终灵敏度可以达到50 拷贝/mL样品。
3.一管式操作，减少了样品污染的可能。
4.一站式套装，除样品外客户不需要准备任何试剂，降低了实验误差。
5. 安全无毒，不需要使用*酚和*仿等有机溶液。
6.处理量大，如果加上病毒离心富集步骤，最多可以处理1.5mL液体病毒样品。
7.与PCR、荧光PCR、RT-PCR、荧光RT-PCR等后续反应兼容。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	40ml
溶液C	50ml
溶液D	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，溶液A4℃保存，溶液B和溶液C室温保存，有效期一年。溶液B和溶液C具有挥发性，使用后需要将瓶盖拧紧。

使用方法：
1. 将0.1-0.2mL液体样品转移到1.5mL 旋盖离心管中。如果需要富集样品中的病毒，可以先将1.5mL液体样品转移到1.5mL 旋盖离心管中,然后4℃ 24,000 g离心60分钟，移弃1.3mL上清液后继续操作下一步的操作。
2. 加入0.6mL溶液A，盖上盖子后振荡3-5秒。
 注意:溶液A用前需37℃-65℃水浴融化并充分摇匀后方可使用。
3.室温静置10分钟。
4. 加入0.6mL溶液B，盖上盖子后振荡3-5秒。
5. 15000g室温离心15分钟。强烈建议在离心管管壁上用记号笔做简单标记以区别离心面和向心面。
6.小心移弃上清。注意不要触及管底的DNA和RNA沉淀。
7. 加入1.0mL溶液C，振荡数秒后15000g室温离心5分钟。注意：将离心管放入离心机时一定要离心面向外。
8. 移弃上清，注意不要触及管底的DNA和RNA沉淀。
9. 短暂离心数秒，注意：将离心管放入离心机时一定要离心面向外。
10.小心移弃残留上清(残留的溶液C会影响后续反应)。此时离心面的管壁上将有可见的膜状沉淀。
11. 加入100-200μl溶液D，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁的膜状沉淀，使其溶解。溶解液混浊或有少量不溶物是正常现象。不要离心只取上清使用，因为不溶沉淀物中含有DNA和RNA，必须取混合液使用(哪怕很浑浊)。
12. 直接取适量样品用于PCR或RT-PCR，也可短期保存于-20℃或-80℃。

使用效果：
DNA病毒：

图注：用本产品和市场上某同类产品分别提取0.2mL HBV 阳性血浆(含1000拷贝/mL HBV)，DNA 溶于200μl溶液D中，取5μl进行荧光PCR(使用MJ Research的CHROMO4荧光PCR 仪)。红和绿线表示本产品，蓝线表示市场上某同类产品。
RNA病毒：

图注：用本产品和市场上某同类产品分别提取0.2mL HBV 阳性血浆(含1000拷贝/mL HBV)，DNA 溶于200μl溶液D中，取5μl进行荧光PCR(使用MJ Research的CHROMO4荧光PCR 仪)。红和绿线表示本产品，蓝线表示市场上某同类产品。
图注：用本产品和市场上进口Q公司同类产品分别提取0.2mL培养的B型流感病毒上清液(含1000 拷贝/mL 病毒)，RNA 溶于200μl溶液D中，取10μl进行荧光PCR(50μl 体系，使用MJ Research的CHROMO4荧光PCR 仪)。红线表示本产品，蓝线表示进口的Q公司同类产品。

疑难解答：
Q：样品中如果同时有RNA和DNA，DNA 会对RNA的RT-PCR 克隆产生干扰吗？
A：不会。病毒一般或者只含RNA，或者只含DNA，如果样品中正好同时含有DNA 病毒和RNA 病毒，但由于两者之间没有同源性，所以DNA 也不会干扰RNA的RT-PCR扩增。这跟组织细胞中提出的核酸样品不一样，因为后者的DNA和RNA是同源的，即任何RNA分子都有与之同源的DNA分子，所以如果同时存在，DNA 也会在RT-PCR时跟引物结合，产生扩增。干扰RT-PCR。

北京一管式病毒DNA-RNA提取试剂盒说明书正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·真菌(酵母)专用蛋白酶抑制剂
编号：BTN130529
英文名称：Protease Inhibitor for Yeast
规格：1mL
本产品为酵母细胞蛋白酶抑制混合液，溶剂为DMSO。专门用于裂解各种酵母细胞时，抑制各种内源和外源蛋白酶活性，防止蛋白质降解。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
2. 止蛋白质降解。本产品抑制谱广，能特异性抑制丝*酸蛋白酶、半胱*酸蛋白酶、天门冬*酸蛋白酶及金属蛋白酶等各种蛋白酶活性。
3. 本产品为优化的酵母蛋白酶抑制剂混合溶液。与各种细胞裂解液兼容，在裂解液中加入1/100体积即可。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期两年。

·DNA快速连接试剂盒
编号：BTN70602
英文名称：Rapid DNA Ligation Kit
规格：100次
 DNA连接反应通过T4连接酶催化双链DNA的3´-OH和5´-P形成磷酸二脂键而将DNA共价连接在一起。被连接的DNA末端可以是粘末端(例如限制性切割EcoR I产生的末端)，也可以是平末端(限制性切割Sma I产生的末端)。Pheiffer等人发现PEG可以促进T4 DNA连接酶催化的连接反应[NAR，11，7853-7871，1983]，连接反应只需十分钟即可完成。

产品特点：
1.超快，整个连接反应只需要室温5分钟左右，反应液可以直接用于转化实验。
2.高效，溶液配方经过优化，每ug 插入DNA连接转化得到的重组子可达107左右。
3. 既可用于平末端连接，也可用于粘末端连接，包括PCR产物与T载体的连接。
4. 简单，客户只需要提供载体和插入片段即可。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	500μl
溶液B	100μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：连接反应
1.在无菌的离心管中严格按下表顺序加入列各成分(以10μl 体系为例):

成分	阴性对照管	样品管
溶液A	5μl	5μl
插入片段(自备)	-	0.2-0.5μg(注)
载体(自备)	50ng	50ng
无菌水	补水到9μL	补水到9μL

 注：插入DNA片段的摩尔数最好是载体的3-10倍，如果载体长度为3000bp，则所需插入DNA片段折合成重量(ng)＝(插入DNA片段bp 数×50 ng×N)÷3000bp。N就是自己选定的插入DNA片段与载体的摩尔比。
2. 最后在每管中加入1μl溶液B，轻柔吹打混合均匀后用微量离心机将液体全部甩到管底。
3.室温放置至少5分钟，最长可以放置过夜。
4. 70℃保温10分钟。此步可以灭活有关的酶，否则转化效率有所降低。
5. 根据使用的转化方法，每管各取适量用于转化实验，余下的放置在-20℃保存。

二：细菌转化及筛选(仅供参考，本产品不提供相关试剂)
6. 将100μl转化效率在1×108 cfu/μg以上的感受态细胞于冰上解冻。
7. 取5-10μl连接产物加入到感受态细胞中，轻轻旋转几次以混匀。
8.在冰上放置30分钟。
9. 将离心管放42℃热休克90秒，然后快速将其转移到冰浴中放置1～2分钟。
10. 每管中加900μl LB培养基，37℃振荡培养1小时复苏细胞。
11. 将100μl 复苏涂布到含Amp的LB 琼脂平板上(根据载体情况也可能需要加上X-gal和IPTG)。
12.室温4,000rpm离心剩余的900μl 复苏细胞5分钟，弃去800μL上清，用剩余100μl培养基重悬细胞并涂布到含Amp的LB 琼脂平板上(可加X-gal、IPTG)。
13. 将平板置于室温直至液体被吸收。此步非常重要，否则培养板将在37℃排除水分，细菌将随水在培养基上到处游动，不能形成单个菌落。
14. 倒置平皿，于37℃培养，12~16小时后可出现菌落。一般情况下阳性对照组会有上千个菌落(100μl转化液产生的菌落数×10)，自联对照只有少数几个菌落，样品组的菌落数取决于PCR 回收片段的质量。
15. 按常规方法筛选重组子。


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·木材DNA提取试剂盒
编号：BTN130941
英文名称：Timber DNA extraction kit
规格：50次

·PCR Mix染料
编号：BTN131212
英文名称：PCR Mix Dye
规格：10mL
本产品可加入到PCR反应液中，使PCR产物可直接上样电泳，其分子量相当于50bp大小的DNA片段，不干扰观察。
注：本产品不是PCR荧光染料，是一类可见光染料(类似电泳用的*酚蓝，二甲*蓝等指示剂)

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

·微量DNA助沉剂
编号：BTN3621
英文名称：DNApp DNA precipitation aid
规格：0.5mL
本品是一种经去DNase处理的，能有效地促进微量DNA沉淀回收的大分子聚合物。适用于提取样品中的微量DNA。该产品也适用于微量DNA的沉淀回收。

产品特点：
1．促进微量DNA的沉淀，其沉淀条件跟DNA相同的，5μl DNApp能有效促进微量DNA的乙醇或异丙醇沉淀和回收。
2．使用多样，可以在核酸提取的任何步骤中加入。既可以加到提取液中，也可以加到稀释的DNA样品中。
3．化学惰性，不含DNase，不影响核酸的A260/280光吸收，不影响后续的反应过程(如PCR和酶切等)。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：用于提取微量组织样品中的DNA
加入裂解液中使用: 按10-20μl DNApp/mL 裂解液的比例将DNApp 加入常用DNA提取液中，然后按相应的操作规程直接提取DNA。如果裂解液中含有CTAB，则需要在最后醇沉淀时加入，后续处理不变。

二：用于沉淀回收反应体系中的微量DNA
直接将5-10μl DNApp 加入待沉淀的DNA溶液中，然后按盐/乙醇或盐/异丙醇沉淀DNA的经典操作规程沉淀DNA。


北京一管式病毒DNA-RNA提取试剂盒说明书关键词：一管式病毒DNA-RNA提取试剂盒,One-tube virus RNA-DNA extraction kit,BTN80101

PY02-139  产毒培养基  250克  
ARB13451 鸡白血病(Chicken ALV)ELISA检测服务 
BTN100405 SSC溶液,20× SSC,20×
ARB10510 人白细胞介素22(IL-22)尿液中含量检测 Human interleukin 22,IL-22 ELISA KIT
ARB11915 人鳞状细胞癌相关抗原(SCC-Ag)Elisa定量检测 Human squamous cell carcinoma related antigen,sccag ELISA KIT
ARB13197 小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA检测服务 Mouse lipoprotein α,lp-α ELISA KIT
腐殖酸 Barium diphenylamine sulfonate 1415-93-6
HC0082 0.5mlPCR管
ARB13068 小鼠肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)含量分析 Mouse pulmonary surfatcant-associated protein a,sp-a ELISA KIT
60-24-*(代"2") β-Mercaptoethanol  β-巯基乙醇
PY01-085B  肝浸粉(牛)  250克|1公斤  
ARB12334 大鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA检测服务 Rat ovalbumin specific ige,ova sige ELISA KIT
L-缬*酸甲酯盐*(代"酸")盐 MEGA-10 6306-52-1
BL1220 中性红染色液(0.5% 细胞或组织切片染色)
胃蛋白酶水溶液(0.4%)   100ml

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