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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Plants mitochondrial total protein extraction kit
- 库存:
550
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")植物线粒体总蛋白提取试剂盒批发,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:植物线粒体总蛋白提取试剂盒批发
英文名:Plants mitochondrial total protein extraction kit
编号:BTN130886
规格:50次
品牌:百奥莱博
更多有关植物线粒体总蛋白提取试剂盒批发的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·可调式易错PCR试剂盒
编号:BTN160903
英文名称:Controlled Error-prone PCR Kit
规格:100次
易错PCR是利用Taq DNA多聚酶不具有3´→5´校对功能的特性,在一定条件下(如不同的dNTP浓度、Mg浓度和MnCl2存在)能够按较高的机率引入随机引入突变。如果有适当的选择方法,则可从构建的突变库选出所需突变体。易错PCR和常规PCR的比较如下:

产品特点:
1. 即开即用,十分简单方便,尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的优越性。
2. 配方经过精心优化,实验人员在一定范围内可以控制突变率,一轮PCR的突变率范围在2-8突变/1000bp,更高的突变率可以通过多轮PCR达到。
3.可用于连续易错PCR,只需把上一次易错PCR的产物用作下一次易错PCR的模板即可,使每一次获得的小突变累积而产生重要的有益突变。
4.可以扩增的DNA片段更长,达到3kb,对于3kb以上的产物,建议分段扩增。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| Taq DNA聚合酶(5U/μL) | 100μl |
| 易错PCR专用dNTP 2.0,10× | 300μl |
| 易错PCR Mix 2.0,10× | 300μl |
| 易错PCR专用MnCl2 | 300μl |
| 易错PCR专用dGTP | 300μl |
| 超纯水 | 1ml |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期为一年。
使用方法:
1. 将模板DNA稀释到1ng/uL。将引物稀释到10uM。
注意:引物是决定易错PCR成败的关键因素,设计引物时要保证其Tm在70℃,长度在25-30nt之间,GC含量在45%-60%之间,3端GC含量低,并且没有发夹结构。
2. 根据每1000bp的预期突变数按下表确定易错PCR的反应条件中MnCl2和dGTP的用量。表中的A表示易错PCR专用的MnCl2,B表示易错PCR专用的dGTP:
| 预期突变数 | 2个 | 3个 | 4个 | 5个 | 6个 | 7个 | 8个 |
| A的用量(μl) | 0 | 1.0 | 2.5 | 4.0 | 4.0 | 4.0 | 4.0 |
| B的用量(μl) | 0 | 0 | 0 | 1.0 | 2.0 | 3.0 | 4.0 |
3.以30μL的标准PCR反应体系为例,如果反应体系不是30μL,各成分需要按等比例增加或减少。在一干净的PCR管中,加入下列成分
注意:可以先计算出超纯水的用量,优先加水
| 成分 | 用量 |
| 超纯水 | 根据第2步加 |
| 易错PCR Mix,10× | 3μl |
| 易错PCR 专用dNTP,10× | 3μl |
| 易错PCR 专用MnCl2 | 根据上步 |
| 易错PCR 专用dGTP | 根据上步 |
| 自备DNA模板(1ng/μl) | 1μl |
| 自备PCR引物(10μM each) | 1μl each |
| Taq DNA聚合酶(5U/μl) | 1μl |
4. 按已经优化的PCR条件进行一定循环数的PCR(循环数与突变率的关系见下表),然后取5μL电泳检查。如果没有优化的PCR条件,一般可以先尝试下面的PCR条件(对1Kb长的模板而言):
| PCR前变性 | 94℃ 3分钟 |
| 易错PCR(循环30次) | 94℃ 1分钟 |
| 45℃ 1分钟 | |
| 72℃ 1分钟 |
注:易错PCR一般不需要热启动,也不需要在PCR结束后做延伸处理。长度每增
加1Kb,时间延长1分钟。易错PCR循环次数决定每个核苷酸位置的突变几率,进而决定每个PCR产物可能的突变位点数,所以所需循环数由客户根据需要改动。
5.电泳检测是否得到预计长度的PCR产物。
6. 克隆片段进行功能筛选、或者克隆后进行测序分析突变率、或者用此轮PCR的产物为模板,进行下一轮的易错PCR。
疑难解答:
Q:现象:没有PCR产物。
A:可能原因:一是引物没有优化,可以重新设计引物;二是模板DNA太少,可以增加用量;三是模板不纯,最好先胶回收;四是溶解DNA的溶液中有EDTA,降低了PCR反应体系的Mg离子浓度,可以适当补加Mg离子。
Q:现象:太多的PCR条带或PCR条带模糊一片。
A:可能原因:一是PCR循环数太多;二是复性温度太低;三是延伸时间太长;四是引物没有优化,可以重新设计引物;五是PCR条件没优化,可以使用touch-down PCR;六是模板有其他DNA污染;七是DNA模板质量不高或者浓度太高。
Q:如果需要更高的突变率,如何办?
A:可以使用连续多次易错PCR来提高突变率。但最好先用胶纯化回收PCR片段,再用于下一轮易错PCR。此外不能用少于千分之一的第一次PCR产物作为第二轮易错PCR的模板,否则多样性将受到影响。第三轮易错PCR最好使用所有第二轮的PCR产物作为模板,但需要在10mL体系中完成(可以分成很多100μL体系进行)。
植物线粒体总蛋白提取试剂盒批发关键词:BTN130886,植物线粒体总蛋白提取试剂盒,Plants mitochondrial total protein extraction kit
·柱式Ti质粒DNA提取试剂盒
编号:BTN130954
英文名称:Ti plasmid DNA column extraction kit
规格:50次
·即用型LB平板培养基(含Amp)
编号:BTN130848B
英文名称:LB Petri Dish(Amp)
规格:10块
本产品为即用型LB平板培养基,A型为无抗生素LB平板,B型为LB-Amp平板,C型为LB-Kan平板,LB-Tet平板。
储存条件:低温运输及保存,有效期半年。
·丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")干粉(49.5%T,3%C)
编号:BTN160802
英文名称:LB Petri Dish(Amp)
规格:300mL
本产品为即用型LB平板培养基,A型为无抗生素LB平板,B型为LB-Amp平板,C型为LB-Kan平板,LB-Tet平板。
储存条件:低温运输及保存,有效期半年。
·即用型LB平板培养基(含Tet)
编号:BTN130848D
英文名称:LB Petri Dish(Tet)
规格:10块
本产品为即用型LB平板培养基,A型为无抗生素LB平板,B型为LB-Amp平板,C型为LB-Kan平板,LB-Tet平板。
储存条件:低温运输及保存,有效期半年。
·SDS-PAGE样品预处理试剂盒
编号:BTN131074
英文名称:Sample Preparation Kit for SDS-PAGE
规格:50次
本产品为SDS-PAGE电泳样品制备专用试剂盒。
产品特点:
1.减少由于不兼容污染物造成的电泳假象,提供重复性好的SDS-PAGE 结果。
2.快速且容易使用的离心管形式(微量离心)。
3.在20分钟以内将稀释的蛋白溶液富集成六倍浓缩液。
4.无需透析即可去除染料、还原剂、去污剂、糖、甘油、胍、尿素及硫*(代"酸")铵。
5.对于大多数蛋白可以得到75-85%的蛋白回收率。
6.洗脱缓冲液与BCA蛋白定量分析试剂盒兼容,因此可以对处理过的样品进行定量。
7.最少可以处理2微升样品。
试剂盒组成:
| 成份 | 规格 |
| PAGEprep树脂(浆状物,溶剂为DMSO) | 1mL |
| PAGEprep洗脱缓冲液 | 5mL |
| DMSO | 27mL |
| 离心收集管-硝酸纤维素薄膜滤器 | 50个 |
| 收集管 | 72个 |
| 泳道指示剂,非还原性上样缓冲液(5X) | 5mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
植物线粒体总蛋白提取试剂盒批发关键词:BTN130886,植物线粒体总蛋白提取试剂盒,Plants mitochondrial total protein extraction kit
·一步离心式石蜡清除剂
编号:BTN70302
英文名称:Paraffin Scavenger
规格:100次
用石蜡包埋组织作为材料进行PCR的难题之一是如何有效去除石蜡,因为残留的石蜡不但会影响DNA提取,还会干扰PCR扩增。常规的脱蜡方法一般需要1-2小时的时间,需要多次离心,每次离心都会造成样品的丢失。本产品只需要一步离心,克服了常规方法的缺点。
产品特点:
1.快速简单,只需要离心一次,免去了反复换液和离心,减少了样品的丢失。
2. 脱蜡效果好,跟经典的二甲*/乙醇法相当。
3. 即开即用,客户自己不需要准备额外的试剂。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 100mL |
| 溶液B | 7.5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将1mL溶液A加入到1.5mL塑料离心管中。
2. 放入一片不超过25μm的石蜡包埋组织切片。
3.以最大速度振荡10秒。
4. 加入75μL溶液B。
5. 振荡10秒混合。
6. 7000 g离心2分钟,小心吸弃上清。
7.真空抽干机抽干离心管中残留的液体。此步骤约需要一小时。
8. 得到的石蜡包埋组织切片即可用于DNA提取。
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