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低温运输
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长期
- 英文名:
E.coli DNA Ligase
- 库存:
270
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货大肠杆菌DNA连接酶折扣价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货大肠杆菌DNA连接酶折扣价
编号:BTN120419
英文名:E.coli DNA Ligase
产地:国产|进口
规格:1000U
本酶催化相邻DNA链的5´-P末端和3´-OH末端以磷酸二酯键结合的反应,需NAD作辅酶。本酶只能催化突出末端DNA之间的连接,但如果在PEG及高浓度一价阳离子存在的条件下,也能连接平滑末端的DNA,但不能催化DNA的5´-P末端与RNA的3´-OH末端以及RNA之间的连接。其工作原理图如下:

产品用途:
1.DNA片段和载体DNA的连接。
2.DNA片段和Linker或Adaptor DNA的连接。
3.cDNA的第二条链的合成。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:在20μl的连接反应体系中,6μg的λDNA-Hind III的分解物在16℃下反应30分钟时,有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为一个活性单位。
纯度:
1.360U的本酶和1μg的λ-Hind III片段在37℃下反应16小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2.360U的本酶和1μg的Supercoiled pBR322 DNA在37℃下反应16小时,DNA的电泳谱带不发变化。
3.360U的本酶和1μg的16S,23S rRNA在37℃下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
备注:BSA在-20℃下易产生沉淀,应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。
除北京现货大肠杆菌DNA连接酶折扣价外,我公司正在打折促销以下产品:
·DNase I溶液
编号:BTN130984
英文名称:DNase I Solution
规格:1.5mL
本产品是DNase I的10mg/mL的溶液,酶活性为1500-2500U/mg。DNase I从牛胰腺纯化得到是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶,分子量约32kDa(单体)。DNase I水解单链或双链DNA后的产物,5´端为磷酸基团,3´端为羟基。其活性依赖于*离子,并能被*离子或二价锰离子激活。*离子存在条件下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,DNase I可在同一位点剪切DNA双链,形成平末端,或1-2个核苷酸突出的粘末端。
产品特点:
1.即开即用,不需要用户单独配置。
2.可用于制备RNase-free的DNase。本产品为粗制品,可能含残留的RNase,不能直接用于清除RNA样品中的DNA。
3.本产品可直接用于DNase I Footprinting实验、缺口平移(Nick Translation)、制备DNA随机片断文库、制备TUNEL检测中的阳性对照。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
本产品可用于DNase I Footprinting实验、缺口平移(Nick Translation)、制备DNA随机片断文库、TUNEL检测中剪切基因组DNA作为阳性对照。具体使用方法请参考相关资料。
注意:本产品浓度较高,如需对其进行稀释,需要自备DNase I储存液。
DNase I储存液的配方:50mM Tris-acetate(pH7.5),10mM CaCl₂,50%(v/v)甘油。
附录:
1.DNase I活性定义:37℃10分钟内,将能够完全降解1μg pBR322质粒DNA所需的酶量定义为1个活性单位。
2.DNase I活性检测条件:40mM Tris-HCl(pH8.0),10mM MgSO4,1mM CaCl2,1μg of pBR322 DNA。
3.纯度:不含其它DNA内切酶和外切酶。
4.DNase I酶储存溶液:50mM Tris-acetate(pH7.5),10mM CaCl2,50%(v/v)甘油。
5.DNase I酶反应液(10×):100mM Tris-HCl(pH7.5 at 25℃),25mM MgCl2,1mM CaCl2。
6.失活或抑制:加入EDTA至终浓度为2.5mM后,65℃加热10分钟可使DNase I失活。酚*仿抽提也可以使DNase I失活。金属离子螯合剂,达到毫摩尔/升浓度的锌离子、0.1%的SDS、DTT、巯基乙醇等还原剂,50-100mM以上盐浓度均对DNase I有显著抑制作用。
北京现货大肠杆菌DNA连接酶折扣价关键词:大肠杆菌DNA连接酶,BTN120419,E.coli DNA Ligase
·核糖核酸酶RNase If
编号:BTN130672
英文名称:RNase If
规格:10000U
核糖核酸酶If是一种单链特异性RNA外切酶,能够切割所有RNA二核苷酸键,产生5´羟基和2",3´环状单核苷酸。重组RNase If是大肠杆菌RNase I与麦芽糖结合蛋白的融合蛋白,与野生型RNase I具有相同活性。
产品特点:
➤从DNA和蛋白质准备过程中去除RNA
➤ 降解单链RNA生成单、二、或三核苷酸)
➤ 用于核糖核酸酶保护试验
➤ RNase I不能降解DNA。降解单链RNA的能力比双链RNA的能力强。
➤ 无核酸内、外切酶污染。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| RNase If(50000U/mL) | 200μL |
| 10×Buffer | 1ml |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指10μl反应体系中,37℃条件下,15分钟完全降解1pmol合成ssRNA 33-mer 所需的酶量。反应在 1×Buffer 3下进行,20%丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳
(40:1 Bis),染色后观察结果。
热失活:70℃加热20分钟。
北京现货大肠杆菌DNA连接酶折扣价关键词:大肠杆菌DNA连接酶,BTN120419,E.coli DNA Ligase
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北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京现货大肠杆菌DNA连接酶折扣价。
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文献和实验的 DNA 闯进受体细胞,受体细胞就会把它「消灭」。当外来的 DNA 进入大肠杆菌时,大肠杆菌内部的内切酶就会使其「粉身碎骨」。因此,目的基因的直接导入往往不通。在这种情况下,生物工程师们就要采用 DNA 重组技术。首先将目的基因与质粒经过内切酶的「裁剪」,然后靠连接酶的作用,将目的基因和质粒(或病毒 DNA)重新组合起来形成重组 DNA。 重组 DNA 就能在质粒(或病毒 DNA)的「带领」下进入受体细胞。基因工程的操作步骤包括 4 步:获取目的基因、重组 DNA、将拼好的 DNA 送入受
产物的 DNA:RNA 杂交链变性后利用大肠杆菌 DNA 聚合酶Ⅰ Klenow 片段或反转录酶合成 cDNA 第二链,最后用对单链特异性的 S1 核酸酶消化该环,即可进一步克隆。但自身引导合成法较难控制反应,而且用 S1 核酸酶切割发夹结构时无一例外地将导致对应于 mRNA 5' 端序列出现缺失和重排,因而该方法目前很少使用。 2、置换合成法: 该方法利用第一链在反转录酶作用下产生的 cDNA:mRNA 杂交链不用碱变性,而是在 dNTP 存在下,利用 RNA 酶H在杂交链的 mRNA 链上造成切口
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
液: 1X T4 DNA Ligase Buffer: [50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 µg/ml BSA, (pH 7.5 @ 25°C)]。推荐DNA浓度(0.1 - 1 µM 的5′末端)。 使用注意:ATP是反应必须的辅因子。这一点与要求NAD作辅因子的大肠杆菌DNA连接酶不同。 如在反应体系中补加1 mM的ATP,连接反应还可以在NEB提供的四种限制性内切酶缓冲液(NEBuffers)或在T4 DNA多聚
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