农杆菌GV3101化学感受态细胞厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应农杆菌GV3101化学感受态细胞厂家，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：农杆菌GV3101化学感受态细胞厂家
产地：国产|进口
英文名：E.coli GV3101 Chemical Competent Cell
规格：10×100μL
编号：BTN140384
品牌：百奥莱博
 本产品为GV3101农杆菌化学感受态细胞，其具有利福平和庆大霉素抗性，适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率高达104cfu/μg。

基因型：C58(rifR)Ti pMP90(pTiC58DT-DNA)(gentR/strepR)Nopaline。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期一年。

自备试剂：质粒DNA、液氮等

使用方法：

转化前准备
1. 冰水浴和37℃水浴。
2.液氮或干冰/乙醇混合物。
3. 将抗性平板在 28℃培养箱中平衡至少15分钟。
转化方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态细胞于冰水浴中融化。
2. 无菌条件下，向刚刚融化的感受态细胞悬液中加入需要转化的质粒，每100μL感受态细胞加1μg质粒DNA，轻柔混匀。冰水浴中静置10分钟。
3. 将离心管置于液氮中速冻 5分钟(注：也可以用干冰和无水乙醇混合物替代液氮)。
4. 迅速将离心管置于37℃水浴静置中5分钟，不要晃动水面。然后快速转至冰水浴中静置5分钟。
5. 加入800μl 无抗生素的2×YT或LB液体培养基，28-30℃振荡培养2~3小时。使菌体复苏，表达抗性。
6. 5000rpm离心1分钟收菌，保留100μl左右上清，轻轻吹打重悬菌体，均匀涂布到含有相应抗生素的LB 固体培养基平板上，待平板中的液体完全吸收后，倒置平板，28-30℃培养48-72小时。
 注：当平板只含有50μg/mL kan时，28℃培养48小时即可；平板中同时加入50μg/mL kan，20μg/mL rif时，需 28℃培养 60h；如果使用的平板含有50μg/mL rif 则需要 28℃培养 72-90小时。

注意事项：
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10 ；质粒不纯或存在乙醇等有机物污染，转化效率急剧下降；质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4. 利福平浓度不应高于25μg/μL，过高的利福平浓度不利于农杆菌生长，会降低其生长速度和转化效率。本公司感受态计算转化效率时所用平板只含有 50μg/mL kan，若所用平板含有 20μg/mL rif 则转化效率降低到1/2。
5.培养基中加入利福平的目的是防止杂菌生长、筛选农杆菌；根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止 Ti质粒丢失，但链霉素不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时不考虑链霉素或庆大霉素，Ti质粒丢失的概率极低(可以忽略)。
6.相关抗生素配方：

 

抗生素	配方	原液	工作液
羧苄青霉素(carb)	双蒸水溶解	50mg/mL	50μg/mL
硫*(代"酸")卡那霉素(kan)	双蒸水溶解	50mg/mL	50μg/mL
链霉素(strep)	双蒸水溶解	10mg/mL	50μg/mL
利福平(rif)	DMSO溶解	10mg/mL	20μg/mL
庆大霉素(gent)	双蒸水溶解	20mg/mL	40μg/mL

欲了解更多农杆菌GV3101化学感受态细胞厂家的品牌、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:
*乙啶 Actinomycin D 1239-45-8
Zamboni固定液   500ml
BL0814 HRP标记羊抗大鼠IgG抗体
ARB10869 人抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)Elisa分析 Human anti-glucoprotein 210,gp210 ELISA KIT
(*并三氮唑-1-基氧基)二哌*(代"啶")碳六*磷酸盐 Ceftiofur Sodium 190849-64-0或206752-41-2
CYB167062 兔抗猴IgG
N-羟yi基乙二*(代"胺")-N,N′,N′-三乙酸三* Chrome Blue K 207386-87-6
BL1349 超低分子量蛋白MARKER
2-碘丙*(代"烷") Phenacetin 75-30-*(代"9")
硫*(代"酸")*溶液(无菌)  1mol/L 500ml
L-甲硫*酸 Methyl α-D-glucopyranoside 63-68-3
BTN120413 核糖核酸酶H Ribonuclease H(RNase H)
农杆菌GV3101化学感受态细胞厂家关键词：农杆菌GV3101化学感受态细胞,E.coli GV3101 Chemical Competent Cell,BTN140384


·半干法电转液(干粉)
编号：BTN81207
英文名称：Half-Wet Transfer Buffer Powder
规格：20L
本产品配制的溶液适用于半干法电转PAGE胶上蛋白质，湿润和浸泡电转膜以及垫子。半干法的优点是快捷，最长只需40分钟左右，一般只适合100KD以下的蛋白。

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。


·大肠杆菌DB3.1化学感受态细胞
编号：BTN140218
英文名称：E.coli DB3.1 Chemical Competent Cell
规格：10*100μl
本产品是采用大肠杆菌DB3.1细胞含有gyrA462基因，对λ噬菌体的ccdB基因产物的毒性具有抵抗作用，特别适合用于转化和扩增包含ccdB基因的质粒载体。

产品特点：
1. 使用pUC19质粒检测，转化效率可达107，-80℃保存几个月转化效率不发生改变。
2. DB3.1感受态细胞具有链霉素抗性。
3. DB3.1菌株基因型：F- gyrA 462endA1 Δ(sr1-recA)mcrB mrr hsdS20(rB-,mB-)supE44Ara-14 galK2 lac Y1 proA2 rpsL20(SmR)xy1-5 λ- leu mtl1
4. 本产品质量稳定，使用方便，质优价廉。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。
自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含有相应抗生素的LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm ，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


农杆菌GV3101化学感受态细胞厂家关键词：农杆菌GV3101化学感受态细胞,E.coli GV3101 Chemical Competent Cell,BTN140384

ARB12545 大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)酶标法分析 Rat insulin-like growth factor binding protein 3,igfbp-3 ELISA KIT
ARB10221 人β乳糖蛋白抗体IgG 检测服务 Human β anti-galactan proteins igG ELISA KIT
ARB12295 大鼠抗平滑肌抗体(ASMA)免费代测 Rat anti-smooth muscle antibody,asma ELISA KIT
HC0145 湿盒避光
65-46-3 Cytidine 胞苷(胞嘧啶核苷)
阿魏酸 HDCBS 537-98-4
Acr-Bis(37.5%:1%)   500ml
ARB12125 大鼠丙*酸*基转移酶(ALT)检测服务 Rat alanine aminotransferase,alt ELISA KIT
土霉素 Polygalacturonic acid 79-57-2
ARB10623 人α颗粒膜蛋白(GMP-140)酶标法分析 Human alpha-granular membrane protein,gmp-140 ELISA KIT
葡聚糖凝胶G-50 Sulfo-NHS 9048-71-9
棕榈油酸 EDOT 373-49-9
荧光抗体用免疫血清防腐剂  10× 50ml
ARB13057 小鼠肾上腺素(EPI)酶免分析 Mouse epinephrine/adrenaline,epi ELISA KIT
ARB12923 小鼠主要组织相容性复合体I类(MHCI/H-2I)血清中含量检测 Mouse major Histocomp*(代"a")tibility complexi,mhci/h-2i ELISA KIT
Western封闭液(尼龙膜)   100ml
ARB10132 人OJ抗体/抗异亮*酰tRNA合成酶抗体(OJ/IleRS)检测服务 Human anti-oj-antibody，oj/ilers ELISA KIT

我公司正在打折促销克隆与表达全系列产品，恭候您的咨询选购农杆菌GV3101化学感受态细胞厂家。