北京甲醛-乙酸-乙醇固定液(FAA)厂商

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京甲醛-乙酸-乙醇固定液(FAA)厂商，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京甲醛-乙酸-乙醇固定液(FAA)厂商
英文名：Formaldehyde-acetic acid-ethanol Fixative
编号：BTN160227
品牌：百奥莱博
规格：250mL
甲醛-乙酸-乙醇(FAA)固定液，又称标准固定液，万能固定液，适用于一般根、茎、叶、花药、子房组织切片，在植物形态解剖研究上应用极广，但不适用于单细胞及丝状藻类，也不适宜做细胞学研究。此固定液最大优点是兼有保存剂作用，但对染色体的观察效果较差。

本产品由福尔马林(38%甲醛)、冰醋酸、70%酒精配制而成。幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精，可防止材料收缩。若材料坚硬，可略减冰醋酸，略增福尔马林。若材料易收缩，可稍增加冰醋酸。久置时另加入5mL 甘油以防蒸发和材料变硬。本产品固定时间最多10小时。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期为1年。

使用方法：
1．新鲜组织入本固定液浸泡，放4℃冰箱固定。
2．对于组织样品，本固定液必须足量，一般是组织块体积的10-50倍，固定时间视组织块大小而定，一般48-72小时，保证固定液充分渗入组织中。标本浸入组织液后要轻轻摇晃几下，防止标本贴在瓶壁上，影响固定效果。

北京甲醛-乙酸-乙醇固定液(FAA)厂商正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·通用型RT-LAMP恒温扩增试剂盒
编号：BTN101114
英文名称：Universal Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification Kit
规格：50次
本试剂盒可以用于RT-LAMP等温扩增，RT-LAMP即逆转录和Loop-Mediated Isothermal Amplification(环介导等温扩增)的结合，专门用于快速扩增RNA。LAMP是2000年才出现的一种新颖的等温核酸扩增方法。它利用4或6条模板专一的特异引物和具有链置换能力的DNA聚合酶，在等温条件下(63℃左右)30－60分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于RT-PCR技术，同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程，不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、细菌、病毒、寄生虫、真菌等病原体的快速检测。

产品特点：
1.高特异性，由于同时使用4-6条特异引物，所以特异性比RT-PCR更高。
2.高扩增效率，扩增效率可达到10E9-10E10，比PCR灵敏一个数量级，可检测到单拷贝的RNA分子
3. 65℃左右完成RT和LAMP扩增，不需要贵重的热循环仪。
4. 即开即用，包含了除引物和模板RNA外的所有成份，十分方便。
5. 肉眼检测扩增结果，不需要昂贵的电泳、荧光PCR等仪器。
6. 提供扩增对照，便于在遇到困难时分析原因。

试剂盒组成：

 

成分	规格
RT-LAMP Mix(2×)	0.5ml
AMV-Bst混合液	75μl
对照引物混合物	40μl
对照模板	5μl
MgCl2(25mM)	0.2ml
RNase-free水	1ml
说明书	1份

注：RT-LAMP Mix(2×)稀释到1×时，已经有8mM Mg2+，本试剂盒提供的MgCl2(25mM)用于用户优化条件用。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在冰上溶解除酶外的各种组份，混匀，稍离心。在反应管中加入以下组份：

成份	样品管	阴性对照
RT-LAMP Mix(2×)	10μl	10μl
自备FIP引物终浓度	0.8μM	0.8μM
自备BIP引物终浓度	0.8μM	0.8μM
自备F3引物终浓度	0.2μM	0.2μM
自备B3引物终浓度	0.2μM	0.2μM
自备Loop F引物终浓度(可选项)	0.4μM	0.4μM
自备Loop B引物终浓度(可选项)	0.4μM	0.4μM
自备模板 RNA	1-100ng	不加
AMV-Bst 混合液	1.5μl	1.5μl
补水到	20μl	20μl

 注：如在反应管中加入本公司PCR级绿如蓝染料1μL(水则少加1μL)，则可直接在荧光定量PCR仪中进行荧光定量检测。
2. 混匀，置于60-65℃保温30-120分钟。注意：如果不使用Loop引物，则最好保温120分钟；如果使用Loop引物，则最好保温30分钟。
3. 80℃10分钟灭活Bst DNA聚合酶。此酶有外切酶活性，所以必须灭活。
4.产物置于-20℃备用或立即用于下游检测。扩增产物可选下列方法之一检测:
a)琼脂糖凝胶电泳。取扩增产物5μL，1-2%的琼脂糖凝胶电泳，可见LAMP特征性电泳图谱；
b)向扩增产物中直接加入本公司PCR级绿如蓝染料(另售)1μL，混匀，稍离心。将反应管置于紫外透射仪或凝胶成像系统中，紫外灯下可见绿色荧光产生；
c)荧光定量检测。
5. 结果分析：
a)如果没有扩增，则需要用本试剂提供的阳性对照进行扩增。本试剂盒提供阳性对照，反应按下表设置：

成份	阳性对照管
RT-LAMP Mix(2×)	10μl
对照引物混合物	4.0μl
对照模板	1μl
AMV-Bst 混合液	1.5μl
水	3.5μl

 混匀后，置于60℃保温120分钟，其余操作同上。注意：本对照引物中没有Loop引物，所以最好保温120分钟。
b)如果阳性对照能够扩增出，则说明试剂盒没有问题，可能是模板或引物的问题。如果阳性对照没有扩增出条带，则是试剂盒的问题，请跟厂家联系。

注意事项：
1.引物设计对成功扩增十分关键。除用于SNP分型外，尽量以保守区设计引物。
2.引物至少包括F3/B3和FIP/BIP，加入环状引物F loop/B loop可以使反应速度大大提高。
3. 应优化引物序列、GC含量和尽量避免二级结构。
4.反应中各个引物的浓度及比例对扩增效果有一定的影响。
5. 建议先将所有引物混合在一起，配制成10.浓度以方便使用。
6. LAMP扩增具有特异性好、灵敏度高、时间快、不需要特殊仪器设备等优点。但太高的灵敏度使得其比普通PCR扩增更加容易污染导致假阳性。因此，必须高度重视扩增产物的污染。常规措施包括严格的实验分区、添加UNG和dUTP(可能导致反应效率下降)、使用荧光定量等不开盖检测方法。实验室一旦遭到污染，所有相关试剂必须全部更换，必要时还得更换实验室。
7. 要确证扩增的为目标基因，可以使用特定的限制性酶切和/或Southern杂交。
8. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品等用途。


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·DNA marker(pBR322/MspI)
编号：BTN90602B
英文名称：DNA ladder(pBR322/MspI)
规格：50次
 本系列产品为传统的酶切分子量标准，由单一的质粒DNA或噬菌体DNA经单个限制性内切酶完成消化后，加热灭活而成。每次上样总DNA含量已知，每条带的含量可根据其摩尔数的比值计算出来。本系列产品成分中已经含有上样缓冲液，所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确，明亮清晰，背景较低，稳定性很好。
 每次加样量为5μL，可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：直接上样电泳，每次加样量为5uL。

使用效果：


疑难解答：
a)如对带型要求较高，建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液，电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液，电压为80V)，同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖，同时要经常更换电泳缓冲液。

·动态浊度法内毒素定量试剂盒
编号：BTN131204
英文名称：Eendotoxin Quantification Kit(Dynamic turbidity method)
规格：1.7×10支
鲎试剂为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品，鲎试剂中含有Ｃ因子、Ｂ因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下(温度，pH值及无干扰物质)，细菌内毒素激活C 因子，引起一系列酶促反应，使鲎试剂产生凝集反应形成凝胶。随着凝胶的形成，反应液的吸光度(OD值，浊度)增加，OD值增加的速度与内毒素浓度成正相关。换言之，OD值上升某一预设限值(启动OD)所需要的时间(定义为启动时间)与内毒素浓度成负相关，启动时间的对数与内毒素浓度的对数成线性关系，据此，可以定量供试品的内毒素浓度。本试剂盒的检测限为0.01 EU/mL～10 EU/mL。

储存条件：低温运输，低温运输，4℃避光保存，有效期两年。

自备试剂：细菌内毒素标准品(BTN140405)、无内毒素水(BTN130502)(可从本公司另购)

使用方法：

一、设备准备
除热原试管、除热原吸头、除热原加样槽、除热原96孔微板。
旋涡混合器、移液器、多道移液器、试管架。
带温育系统的动态光度测定仪器及配套软件，例如，微板鲎试仪ELx808及软件TALgent或Gen5。
二、实验操作
1.动态光度测定仪器的设定，以微板鲎试仪ELx808为例：
a)预热仪器，设置温育温度为37ºC。
b)设置模板及程序:设定读板波长为630nm，设定动力学参数：读板120分钟，每30秒读一次。
2.内毒素标准溶液配制：
a)标准曲线所采用的内毒素浓度可以为2至10倍稀释的系列(如0.5，0.25，0.125，0.0625 EU/mL或10，1，0.1，0.01 EU/mL)。
b)取自备的细菌内毒素标准品1支，用砂轮沿安瓿颈部划痕，开启，加入适量(建议在0.5mL- 1.2mL之间)自备的无内毒素水，置旋涡混合器上剧烈振摇5分钟。
c)将上述内毒素溶液进一步用自备的无内毒素水稀释成所需浓度，每稀释一步均应在旋涡混合器上剧烈振摇1分钟。(稀释的内毒素溶液静置时间超过10分钟，用前在旋涡混合器上剧烈振摇1分钟，放置4小时以上的内毒素溶液应丢弃。)
3. 阴性对照为无内毒素水。
4. 鲎试剂的溶解：按标示量加无内毒素水于鲎试剂中，轻轻振摇使鲎试剂完全溶解。注意不要用旋涡混合器剧烈振摇。溶解的鲎试剂应在10分钟内使用。若采用多道移液器，将溶解的鲎试剂转移到除热原加样槽，并轻轻摇匀。
5.在微板鲎试仪ELx808上操作：
a)取除热原微板，在各孔中分别加入100μl无内毒素水、内毒素标准溶液，或供试品。
b)将微板放置于鲎试仪中，37ºC温育10分钟。
c)温育结束后，用移液器或多道移液器加入100μl鲎试剂(避免产生气泡)，中速振摇10秒混匀，在630nm波长处，每30-60秒读一次，读板120分钟。
三、数据处理
设定启动OD(可以设为0.02，一般可以在0.02到0.04之间)，软件自动给出其启动时间(T)。
建立标准曲线：lgT = b lgC + a，其中T为启动时间，C为内毒素的浓度，b为直线斜率，a为Y轴截距。
当实验数据同时满足如下三个条件时实验才有效：
a)标准曲线的浓度点≥4，标准曲线的相关系数r≤-0.980。
b)标准曲线最低点的T值小于阴性对照的T值。
c)供试品平行管的平均值在标准曲线的区间内。

注意事项：
1. 该试剂盒用于体外细菌内毒素的定量检测，严禁试剂以任何途径进入机体。
2. 接触试剂及供试品的所有器皿必须是除热原的。试验过程应防止微生物的污染。该说明书中的除热原指内毒素浓度小于0.005 EU/ml。
3. 供试品的pH值应在6.0–8.0之间，若超出此范围，需用除热原的缓冲液、0.1M*氧化*或0.1M盐*(代"酸")调节。
4. 当供试品中可能存在鲎试验的干扰物质时，须进行干扰试验，参见供试品的干扰试验。

供试品的干扰试验：
1. 当对新药或无内毒素检查项的品种建立内毒素检查法时，必须进行干扰试验；
2. 当鲎试剂、供试品的来源、配方、生产工艺改变，或试验环境中发生了任何有可能影响试验结果的变化时，必须重新进行干扰试验；
3. 当供试品中可能存在鲎试验的干扰物质时，须进行干扰试验。

步骤如下：
1. 选择标准曲线中点或一个靠近中点的内毒素浓度(设为λm)，作为供试品干扰试验中添加的内毒素浓度，如采用标准曲线为10，1，0.1，0.01 EU/mL系列时,可以用供试品配制0.1 EU/mL内毒素浓度作为实验的供试品阳性对照。
2. 用供试品溶液配制浓度为λm的内毒素溶液(即含λm内毒素的供试品阳性对照)，测量出该溶液的内毒素浓度，称为Cs；
3. 测量出未添加外源内毒素的供试品溶液内毒素浓度，称为Ct；
4. 计算该试验条件下的回收率R＝(Cs–Ct)/λm×100％；
5. 当R在50％～200％之间，则认为在此试验条件下供试品溶液不存在明显干扰作用；
6. 当R在50％～200％之外，需对供试品进行系列稀释或进行其它处理消除干扰，每一稀释溶液都重复步骤2-4，直到内毒素的回收率R在50％～200％之间。选择回收率R最接近100％的稀释倍数进行内毒素检测。


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·Bsu DNA聚合酶，大片段
编号：BTN130616
英文名称：Bsu DNA Polymerase，Large Fragment
规格：200U
Bsu DNA聚合酶大片段保留了Bacillus subtilis DNA聚合酶I的5´→3´聚合酶活性，但是缺失了5´→3´外切酶结构域。大片段缺乏3´→5´外切酶活性。

产品用途：
1．DNA等温扩增；
2．引物延伸；
3．80℃ 20分钟即可失活；
4．建议反应温度不要超过70℃，不能用于热循环测序或PCR。

产品组成：

成分	规格
Bsu DNA聚合酶，大片段，5000U/mL	0.04ml
反应Buffer，10×	1.25ml
说明书	1份

活性单位定义：1单位指37℃条件下，30分钟内使10nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。

储存Buffer：25mM Tris-HCl(pH7.4)，50mM NaCl，1mM DTT，0.1mM EDTA，50% Glycerol。

反应条件：1×Buffer[10mM Tris-HCl，50mM NaCl，10mM MgCl2，1mM DTT(pH7.9 @ 25℃)]。加入33μm dNTPs(不随酶提供)，37℃孵育。

灭活：75℃ 20分钟。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

备注：
1．由于缺乏3´→5´核酸外切酶活性，Bsu DNA聚合酶大片段不能切除3´未配对的突出末端，因而不适用于生成平滑末端；
2．25℃时，Bsu DNA聚合酶，大片段保留50%的活性，是同温度下Klenow片段(3´→5´exo–)的两倍。

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