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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,4℃保存(溶液C需要-20℃放
- 保质期:
长期
- 英文名:
FFPE RNA Extraction Kit
- 库存:
837
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")石蜡包埋组织RNA提取试剂盒厂家直销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:石蜡包埋组织RNA提取试剂盒厂家直销
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
英文名:FFPE RNA Extraction Kit
编号:BTN81102
石蜡包埋组织本是珍贵的分子生物学研究材料,但是由于它们的保存时间一般都比较长,很不容易从中提取到可以进行PCR的RNA,存在的主要问题是RNA的降解和脱蜡过程中样品的丢失。本产品是专门用于从甲醛和非甲醛固定的石蜡包埋组织中快提RNA的试剂
试剂盒特点:
1.一管式操作,避免了可能的交叉污染和样品RNA的丢失。
2.含一步离心式脱蜡试剂,不需要使用有毒的二甲*,健康环保。
3. 能有效去除基因组DNA的污染,得到的RNA可直接用于RT-PCR反应。
4. 即开即用,客户自己不需要准备额外的试剂。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 30mL |
| 溶液B | 3mL |
| 溶液C | 5mL |
| 溶液D | 15mL |
| 微量核酸沉淀剂 | 30mL |
| RNase-free水 | 10mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,4℃保存(溶液C需要-20℃放置),有效期一年。
使用方法:
1. 将5片厚度为6-8μM的石蜡包埋组织切片转移到1.5mL塑料离心管(最好使用螺旋盖离心管)中并加入1mL溶液A,在振荡器上以最大速度振荡10秒。
2. 加入75μL溶液B,在振荡器上以最大速度振荡10秒。
3. 7000×g室温离心2分钟,溶液将形成两个相,其中组织切片位于下相。
4.小心吸弃上层液体。
5. 将离心管放入真空离心机中抽干下层的液体,一般需要一小时。
6. 加入150μL溶液C,55℃保温过夜。
7. 短暂离心,95℃保温10分钟。
8. 加入0.5mL溶液D,充分震荡半分钟。
9. 加入0.1mL自备*仿,振荡器上充分振荡混均30秒。
10. 13000-5000×g室温离心3~5分钟。
11. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中。下层有机相(蓝色)和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下100μL上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的DNA。
12.在上清液中加入两倍体积的微量核酸沉淀剂,振荡器上振荡30秒混匀。
13. 13000-15000g室温离心5分钟,离心底的侧面将形成RNA沉淀。如果需要提高RNA回收率,可以将离心时间延长到20或30分钟。
14.小心吸弃上清液,注意不要吸弃RNA沉淀。
15.在含RNA沉淀的离心管中加入1mL自备的75%乙醇,振荡混匀30秒。
16. 13000-15000g室温离心1分钟。
17.小心吸弃上清液,注意不要吸弃RNA沉淀。
18. 短暂快速离心,用移液枪小心吸弃残留乙醇(约50μL)。注意不要吸弃沉淀。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
19.室温放1-2分钟后立即加入50-100μL RNA溶解液使RNA沉淀溶解。千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥,否则RNA将变得十分难溶。样品立即使用或存放于-80℃待用。
20. RNA完整性的电泳检测:
21. RNA产量产率测定:将5-10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
22. RNA纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
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PY02-044 庆大霉素培养基基础 250克
叔丁氧羰基-甲*磺酰基-精*酸 Arsenazo I 13836-37-8
BTN131116 pNPP干粉 pNPP
PY02-015B 硫乙醇酸盐流体培养基(不含琼脂) 250克
高效DNA转染试剂
E0608 抗凝裂解小牛血(无菌)
71010-52-1 Phytagel plantcell 植物凝胶
F030427 胶体金标记兔抗鸭IgY IgG抗体 Rabbit Anti-Duck IgY*GOLD
9005-82-7 Amylose 直链淀粉
BTN130917 dCTP溶液,100mM dCTP Solution
光神霉素 Carrageenan 18378-89-7
ARB10023 人5脂加氧酶(5-LO/LOX)Elisa方法检测 Human 5-lipoxygenase,5-lo/lox ELISA KIT
PY04-080 多粘菌素B 250IU/支×10支 每支添加于100ml改良SKIRROW培养基基础中,用于弯曲杆菌的分离培养
ARB10631 人血清剥夺反应相关蛋白(SDPR)ELISA代测服务 Human serum deprivation response,sdpr ELISA KIT
SJ0298 Glufosinate-ammonium 草铵膦
1-丁酸*酯 D-Leucine methyl ester hydrochloride 3121-70-8
司盘20 Ammonium formate 1338-39-2
ARB12548 大鼠胰脂肪酸酶免分析
PY02-225 *化*多粘菌素B肉汤基础(SCPB) 250克
ARB11702 人雄烯二酮(ASD)ELISA检测服务 Human androstenedione,asd ELISA KIT
甲*(代"酸")* LAP 590-29-4
石蜡包埋组织RNA提取试剂盒厂家直销关键词:FFPE RNA Extraction Kit,石蜡包埋组织RNA提取试剂盒,BTN81102
·即用型高保真PCR试剂盒
编号:BTN90708
英文名称:Instant HiFi PCR MasterMix
规格:1.5mL
本产品是即用型的2×高保真PCR预配反应液,含有除引物、模板以外的所有PCR试剂,包括Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等,特别适合于高保真PCR反应。
产品特点:
1. Pfu DNA聚合酶是使用最广泛的高保真酶,其保真度为普通Taq酶的10倍。
2. 使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,非常方便,简化了PCR的准备工作。
3. PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配置。由于加样过程少,有利于减少污染,降低实验误差。
4. 本产品A型含电泳染料,PCR反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
5. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。
6.适用于基因的高保真扩增和基因定点突变等实验,得到的PCR产物可用于平末端克隆。
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为12个月。
使用方法:
将本产品与用户自备的模板,引物混合液按下列推荐使用量(30μL反应体系)加入PCR 管中即可进行PCR,反应结束后直接取5-15μL电泳检查扩增结果。如果反应体系不是30μL,各成分需要按比例增加或减少。
| 试剂 | 加入量 | |
| 2×高保真PCR MagicMix | 25μL | |
| DNA模板(自备) | 哺乳动物基因组DNA | 0.5-1μg |
| 酵母基因组DNA | 5-500ng | |
| 细菌基因组DNA | 0.5-50ng | |
| 质粒DNA | 5-500ng | |
| PCR回收片段 | 1-100pg | |
| PCR引物(自备) | 10-20pmol each | |
| 补水到 | 30μL | |
参考扩增条件:
| 预变性 | 94℃ | 4min |
| PCR(30个循环) | 94℃ | 30s |
| 50℃ | 30s | |
| 68℃ | 0.5kb/min | |
| 延伸 | 68℃ | 10min |
注意事项:
1. 本产品的Pfu DNA聚合酶比Taq DNA聚合酶的延伸反应速率低,因此我们推荐的扩增延伸反应时间为每kb 需2 分种。
2. Pfu酶3´-5´外切酶活性可降解引物,所以强烈建议在冰上配置完成PCR反应液后,立即放入PCR 仪中进行扩增,扩增完毕后立即进行电泳检测。
3. 本产品扩增产物为平末端,不可以直接进行TA 克隆,可以使用ClionB载体(BTN51104)进行克隆。如需要进行TA克隆,建议对PCR产物纯化后,用加A 试剂盒(BTN60105)加A后再进行TA克隆。
4. 由于Pfu 无 5´到 3´外切酶的活性,所以本试剂盒不能用于实时荧光PCR。
疑难解答:
Q:为何Pfu DNA Polymerase扩增效率不如Taq DNA Polymerase?
A:一是由于Pfu DNA Polymerase 具有3´-5´的外切活性,所以在合成过程中,该酶会随时校对新添加的核苷酸是否配对,影响了合成效率;二是它能通过3´-5´的外切活性使引物部分降解,降低引物结合模板的能力,进而影响扩增效率。三是上面提到的尿嘧叮抑制作用。
Q:使用本产品时还有哪些注意事项?
A:1.引物长度和浓度一般应比常规的PCR 长和高(考虑到被Pfu DNA Polymerase的3´-5´的外切活性降解的因素);
2.最好在反应前加Pfu DNA Polymerase。
石蜡包埋组织RNA提取试剂盒厂家直销关键词:FFPE RNA Extraction Kit,石蜡包埋组织RNA提取试剂盒,BTN81102
·Dicer(RNase III)
编号:BTN130676
规格:200U
Dicer(RNase III)能在含有锰离子的反应缓冲液中,将较长双链RNA切割成一组由18-25bp组成的小片段干扰RNA(siRNA),更适合用于哺乳动物细胞的RNA干扰实验。用1.5个单位(1μl)的Dicer(RNase III)能够将1μg的dsRNA完全切割成siRNA,其反应图如下:
产品特点:
1.为RNA干扰研究提供siRNA;
2.基因沉默;
3.靶标确认;
4.去除dsRNA;
5.无核酸内切酶和外切酶污染。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期两年。
活性定义:1单位指50μl的反应体系中,37℃条件下,20分钟将1μg dsRNA切割成siRNA所需要的酶量。
我公司正在打折促销RNA纯化全系列产品,恭候您的咨询选购石蜡包埋组织RNA提取试剂盒厂家直销。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP331 石蜡包埋组织 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 石蜡切片或石蜡块2. 无水乙醇 二甲苯3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml 离心管4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。本文版权归天根生化科技(北京)有限
以下操作按照天根产品 DP330 石蜡包埋组织 DNA 快速提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 石蜡切片或石蜡块2. 无水乙醇3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml 离心管4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。本文版权归天根生化科技(北京)有限
石蜡包埋组织切片 miRNA 提取试剂盒(DP502) 操作指南
以下操作按照天根产品 DP502 石蜡包埋组织切片 miRNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 石蜡切片或石蜡块样本2. 无水乙醇,二甲苯3. 移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1 ml); 1.5 ml,2.0 ml 离心管(RNase-free)4. 涡旋振荡器,台式低温离心机,金属浴/水浴本文版权归天根生化科技(北京)有限公司所有,仅供个人学习使用
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