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石蜡包埋组织RNA提取试剂盒厂家直销

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  • ¥190 - 2240
  • 百奥莱博
  • 北京
  • BTN81102-JAB
  • 2025年07月11日
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    • 详细信息
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    • 技术资料
    • 保存条件

      低温运输,4℃保存(溶液C需要-20℃放

    • 保质期

      长期

    • 英文名

      FFPE RNA Extraction Kit

    • 库存

      837

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")石蜡包埋组织RNA提取试剂盒厂家直销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:石蜡包埋组织RNA提取试剂盒厂家直销
    品牌:百奥莱博
    产地:国产|进口
    英文名:FFPE RNA Extraction Kit
    编号:BTN81102
    石蜡包埋组织本是珍贵的分子生物学研究材料,但是由于它们的保存时间一般都比较长,很不容易从中提取到可以进行PCR的RNA,存在的主要问题是RNA的降解和脱蜡过程中样品的丢失。本产品是专门用于从甲醛和非甲醛固定的石蜡包埋组织中快提RNA的试剂

    试剂盒特点:
    1.一管式操作,避免了可能的交叉污染和样品RNA的丢失。
    2.含一步离心式脱蜡试剂,不需要使用有毒的二甲*,健康环保。
    3. 能有效去除基因组DNA的污染,得到的RNA可直接用于RT-PCR反应。
    4. 即开即用,客户自己不需要准备额外的试剂。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    溶液A 30mL
    溶液B 3mL
    溶液C 5mL
    溶液D 15mL
    微量核酸沉淀剂 30mL
    RNase-free水 10mL
    说明书 1份


    储存条件:低温运输,4℃保存(溶液C需要-20℃放置),有效期一年。

    使用方法:
    1. 将5片厚度为6-8μM的石蜡包埋组织切片转移到1.5mL塑料离心管(最好使用螺旋盖离心管)中并加入1mL溶液A,在振荡器上以最大速度振荡10秒。
    2. 加入75μL溶液B,在振荡器上以最大速度振荡10秒。
    3. 7000×g室温离心2分钟,溶液将形成两个相,其中组织切片位于下相。
    4.小心吸弃上层液体。
    5. 将离心管放入真空离心机中抽干下层的液体,一般需要一小时。
    6. 加入150μL溶液C,55℃保温过夜。
    7. 短暂离心,95℃保温10分钟。
    8. 加入0.5mL溶液D,充分震荡半分钟。
    9. 加入0.1mL自备*仿,振荡器上充分振荡混均30秒。
    10. 13000-5000×g室温离心3~5分钟。
    11. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中。下层有机相(蓝色)和中间层含有DNA和蛋白质,避免触及,否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见,可以留下100μL上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行,否则容易吸出交界面的不可见的DNA。
    12.在上清液中加入两倍体积的微量核酸沉淀剂,振荡器上振荡30秒混匀。
    13. 13000-15000g室温离心5分钟,离心底的侧面将形成RNA沉淀。如果需要提高RNA回收率,可以将离心时间延长到20或30分钟。
    14.小心吸弃上清液,注意不要吸弃RNA沉淀。
    15.在含RNA沉淀的离心管中加入1mL自备的75%乙醇,振荡混匀30秒。
    16. 13000-15000g室温离心1分钟。
    17.小心吸弃上清液,注意不要吸弃RNA沉淀。
    18. 短暂快速离心,用移液枪小心吸弃残留乙醇(约50μL)。注意不要吸弃沉淀。此步十分重要,否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
    19.室温放1-2分钟后立即加入50-100μL RNA溶解液使RNA沉淀溶解。千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥,否则RNA将变得十分难溶。样品立即使用或存放于-80℃待用。
    20. RNA完整性的电泳检测:
    21. RNA产量产率测定:将5-10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
    22. RNA纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。

    欲了解更多石蜡包埋组织RNA提取试剂盒厂家直销的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
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    石蜡包埋组织RNA提取试剂盒厂家直销关键词:FFPE RNA Extraction Kit,石蜡包埋组织RNA提取试剂盒,BTN81102


    ·即用型高保真PCR试剂盒
    编号:BTN90708
    英文名称:Instant HiFi PCR MasterMix
    规格:1.5mL
    本产品是即用型的2×高保真PCR预配反应液,含有除引物、模板以外的所有PCR试剂,包括Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等,特别适合于高保真PCR反应。

    产品特点:
    1. Pfu DNA聚合酶是使用最广泛的高保真酶,其保真度为普通Taq酶的10倍。
    2. 使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,非常方便,简化了PCR的准备工作。
    3. PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配置。由于加样过程少,有利于减少污染,降低实验误差。
    4. 本产品A型含电泳染料,PCR反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
    5. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。
    6.适用于基因的高保真扩增和基因定点突变等实验,得到的PCR产物可用于平末端克隆。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为12个月。

    使用方法:
    将本产品与用户自备的模板,引物混合液按下列推荐使用量(30μL反应体系)加入PCR 管中即可进行PCR,反应结束后直接取5-15μL电泳检查扩增结果。如果反应体系不是30μL,各成分需要按比例增加或减少。
    试剂 加入量
    2×高保真PCR MagicMix 25μL
    DNA模板(自备) 哺乳动物基因组DNA 0.5-1μg
    酵母基因组DNA 5-500ng
    细菌基因组DNA 0.5-50ng
    质粒DNA 5-500ng
    PCR回收片段 1-100pg
    PCR引物(自备) 10-20pmol each
    补水到 30μL


    参考扩增条件:
    预变性 94℃ 4min
    PCR(30个循环) 94℃ 30s
    50℃ 30s
    68℃ 0.5kb/min
    延伸 68℃ 10min


    注意事项:
    1. 本产品的Pfu DNA聚合酶比Taq DNA聚合酶的延伸反应速率低,因此我们推荐的扩增延伸反应时间为每kb 需2 分种。
    2. Pfu酶3´-5´外切酶活性可降解引物,所以强烈建议在冰上配置完成PCR反应液后,立即放入PCR 仪中进行扩增,扩增完毕后立即进行电泳检测。
    3. 本产品扩增产物为平末端,不可以直接进行TA 克隆,可以使用ClionB载体(BTN51104)进行克隆。如需要进行TA克隆,建议对PCR产物纯化后,用加A 试剂盒(BTN60105)加A后再进行TA克隆。
    4. 由于Pfu 无 5´到 3´外切酶的活性,所以本试剂盒不能用于实时荧光PCR。

    疑难解答:
    Q:为何Pfu DNA Polymerase扩增效率不如Taq DNA Polymerase?
    A:一是由于Pfu DNA Polymerase 具有3´-5´的外切活性,所以在合成过程中,该酶会随时校对新添加的核苷酸是否配对,影响了合成效率;二是它能通过3´-5´的外切活性使引物部分降解,降低引物结合模板的能力,进而影响扩增效率。三是上面提到的尿嘧叮抑制作用。
    Q:使用本产品时还有哪些注意事项?
    A:1.引物长度和浓度一般应比常规的PCR 长和高(考虑到被Pfu DNA Polymerase的3´-5´的外切活性降解的因素);
     2.最好在反应前加Pfu DNA Polymerase。


    石蜡包埋组织RNA提取试剂盒厂家直销关键词:FFPE RNA Extraction Kit,石蜡包埋组织RNA提取试剂盒,BTN81102


    ·Dicer(RNase III)
    编号:BTN130676
    规格:200U
    Dicer(RNase III)能在含有锰离子的反应缓冲液中,将较长双链RNA切割成一组由18-25bp组成的小片段干扰RNA(siRNA),更适合用于哺乳动物细胞的RNA干扰实验。用1.5个单位(1μl)的Dicer(RNase III)能够将1μg的dsRNA完全切割成siRNA,其反应图如下:
    Dicer(RNase III)反应示意图

    产品特点:
    1.为RNA干扰研究提供siRNA;
    2.基因沉默;
    3.靶标确认;
    4.去除dsRNA;
    5.无核酸内切酶和外切酶污染。

    储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期两年。

    活性定义:1单位指50μl的反应体系中,37℃条件下,20分钟将1μg dsRNA切割成siRNA所需要的酶量。



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