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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
SUMO Protease
- 库存:
752
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")SUMO蛋白酶 工具酶,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:SUMO蛋白酶 工具酶
产地:国产|进口
编号:BTN130872
品牌:百奥莱博
SUMO蛋白酶,也称为ULP蛋白酶,是一种具有较高活性的半胱*酸蛋白酶。SUMO蛋白酶以一种非常特异的方式切割蛋白,相对于EK和TEV等蛋白酶的短小识别位点,它特异性识别类泛素(UBL)蛋白的三级结构-SUMO,而不是*基酸序列,故该蛋白酶可以切割重组融合蛋白的SUMO。切割的最佳温度为30℃,该酶作用温度和pH范围(pH7-9)都比较广泛。酶切后,可通过Ni-NTA Resin亲和纯化很容易地将SUMO去除。本产品浓度为5U/μL。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期六个月。
关于SUMO蛋白酶 工具酶的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·免RNA提取RT-PCR试剂盒(细胞组织裂解物RT-PCR试剂盒)
编号:BTN130957
英文名称:Cell Lysate RT-PCR Mix
规格:100次
本产品是一种免RNA提取的RT-PCR的试剂盒,它使用精心优化的细胞裂解液直接裂解培养细胞和痕量组织块,然后直接在细胞裂解液中进行RT,再用cDNA进行PCR或荧光定量PCR。
产品特点:
1. 免RNA提取,从细胞裂解到得到RT-PCR或real-time RT-PCR结果只需3个步骤约3小时,省略了整个RNA提取过程。
2. 灵敏度不低于常规方法(先提总RNA再进行RT-PCR),不但可以检测到低拷贝的RNA,还可用于检测miRNA。
3. 整合了去除基因组DNA的步骤,只检测RNA,无需担心基因组DNA的污染。
4. 每次只需要10-10000个培养细胞或含相应细胞数的痕量组织(如LCM样品),验证过的细胞包括Hela、CHO、293、COS-7等,但不能用于U937细胞系。
5. 两步法RT-PCR,后续使用灵活。得到的cDNA既可用于普通PCR,也可用于基于SYBR的荧光定量PCR,也可用于其他定量PCR(如TaqMan),非常灵活。
6. 有单管操作和多孔板操作两种模式,前者适用于少量样品,后者适用于平行处理大量样品,适用于高通量筛查。
7. 本产品足够100次50μL体系的RT反应和600次30μL体系的PCR反应。
试剂盒组成:
| 成份 | 规格 |
| 细胞裂解液成分一 | 3.8mL |
| 细胞裂解液成分二 | 300μL |
| 细胞裂解液成分三 | 100μL |
| Oligo(dT),0.5ug/uL | 50μL |
| 随机引物,0.2ug/uL | 50μL |
| MMLV逆转录酶(含RI) | 300μL |
| PCR MagicMix3.0 | 9mL |
| RNase-free 水 | 10mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
SUMO蛋白酶 工具酶关键词:SUMO Protease,SUMO蛋白酶,BTN130872
·非酶DNA清除剂-2(<200nt)
编号:BTN70801
英文名称:Non-enzymatic DNA Scavenger
规格:15次
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。百奥莱博开发的非酶DNA清除剂-2不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有操作快速,稳定性好和性价比高等诸多优点,完全可以替代价格昂贵的RNase-free DNase。
产品特点:
1.高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降上百倍(根据PCR检测)而RNA分子完整性不会受到任何影响。
2. 本身不含RNase污染,因为本产品为非酶产品;而在制备RNase-free DNase时,为避免DNase失活,处理条件往往比较温和,所以终产品中往往残留有RNase污染。
3.快速,只需要十多分钟。
4. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
5. 性价比高,单位成本远低于RNase-free DNase。
6. 能用于小RNA中DNA污染的去除。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将总RNA溶液与溶液A按1:1的比例混合(即100μl RNA溶液需加100μL DNA Scavenger-2),充分震荡半分钟。注意:RNA溶液中盐(如*离子)的浓度不能高于0.2 M,如果RNA溶液的量不足100μL,最好加无RNase水补足到100μL以便后续操作,如果体积大于100μL,试剂的用量也需要按比例增加。
2. 加入相当于RNA溶液和DNA Scavenger-2 混合液总体积1/2的自备*仿,充分震荡半分钟。
3. 12000~15000g室温或4℃离心1-3分钟。
4.转移上清到一个RNase-free的塑料离心管中,加2倍体积的溶液B(用前摇匀),充分震荡半分钟。
5. 12000~15000g室温或4℃离心10分钟后,小心弃上清。如果处理的样品中含有小RNA,最好使用30分钟的离心时间。
6. 加1mL自备75%乙醇,充分震荡半分钟。
7. 12000~15000g室温或4℃离心5分钟后小心弃上清。
8. 短暂快速离心,小心吸弃余液。
9. 加入自备RNase-free 水溶解RNA沉淀后立即使用或放-80℃长期保存。
疑难解答:
Q:能否用本产品对同一样品进行反复处理?
A:可以。
Q:为何处理后的RNA还有DNA 条带?
A:有些时候(尤其是使用非变性电泳检测时)RNA 会形成聚合物,电泳很慢,人们会误以为是DNA,可以加少量无DNase的RNase处理样品,确认就是DNA。如果是,可能是样品中盐浓度过高使DNA 去除效率降低,可以预先用乙醇沉淀法去掉盐离子。
Q:本产品跟DNA Scavenger(BTN60201)有何区别?
A:前者可以用于小RNA(长度小于200nt)的RNA样品而后者不能。
SUMO蛋白酶 工具酶关键词:SUMO Protease,SUMO蛋白酶,BTN130872
·K562 DNA
编号:BTN131035
英文名称:Human Culture Cell Genomic DNA
规格:30μg
K562 DNA是从人慢性粒细胞白血病细胞系继代培养的细胞中纯化得到的,作为一个对照用于单位点探针分析方法中的多数步骤。该DNA 也可作为参照用于适当的酶切消化后可变数目串联重复序列(VNTR)等位基因片段大小的确定。由于实验室在操作方案和分析方法上的不同,得到的K562片段大小可能会有细微差别,本产品浓度为0.4–1.0μg/μL。
储存条件:低温运输、4℃保存、避免反复冻融,有效期一年。
·一步法96孔板质粒DNA提取试剂盒(真空法)
编号:BTN131198
英文名称:One-step plasmid DNA extraction kit with 96-wells plate
规格:1次
K562 DNA是从人慢性粒细胞白血病细胞系继代培养的细胞中纯化得到的,作为一个对照用于单位点探针分析方法中的多数步骤。该DNA 也可作为参照用于适当的酶切消化后可变数目串联重复序列(VNTR)等位基因片段大小的确定。由于实验室在操作方案和分析方法上的不同,得到的K562片段大小可能会有细微差别,本产品浓度为0.4–1.0μg/μL。
储存条件:低温运输、4℃保存、避免反复冻融,有效期一年。
·T7核酸内切酶I
编号:BTN130635
英文名称:T7 Endonuclease Ⅰ
规格:250U
T7核酸内切酶I识别并切割不完全配对DNA、十字型结构DNA、Holliday结构或交叉DNA、异源双链DNA或者以更慢的速度切割含切刻的双链DNA。该酶切割错配碱基5´端的第一、第二或第三个磷酸二酯键。其反应原理图如下:
产品用途:
1.识别错配DNA。
2.分解四方向交叉DNA或分支DNA。
3.检测或切割异源二聚体DNA和切刻DNA。
4.随机切割线性DNA进行shot-gun克隆。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| T7 核酸内切酶I,10000U/mL | 25μl |
| 10×反应缓冲液 | 1.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在 50μL反应体系,37℃条件下,1小时将90%以上的1μg超螺旋十字型结构的pUC(AT)转化成90%以上的线性结构所需要的酶量。
* pUC(AT)来自 pUC19,在其 EcoRI和PstI 位点之间的多克隆位点处有修改。
实验步骤举例(使用T7核酸内切酶I消化PCR产物确定基因打靶效率):
1.在一个塑料离心管中,按次序加入下列成分:
| 成分 | 加入量 |
| PCR产物 | 200ng |
| 10×反应缓冲液 | 2μl |
| 超纯水 | 补水到19μl |
2.取上步溶液,在PCR 仪内进行如下操作:
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 初步变性 | 95℃ | 5min |
| Annealing | 95-85℃ | -2℃/second |
| 85-25℃ | -0.1℃/second | |
| Hold | 4℃ |
3.添加T7核酸内切酶I至退火后的PCR产物(20μL体系):
| 成分 | 加入量 |
| PCR产物 | 19μl |
| T7 核酸内切酶I | 1μl |
4.37℃保温15分钟。
5.添加1.5μL 0.25M EDTA终止反应。
备注:
T7核酸内切酶I是一种具有底物结构选择性的酶。该酶以不同的活性作用于不同的DNA底物。切割特定底物时,必须控制酶量和反应时间。反应温度超过42℃时,会增加非特异性核酸酶活性。
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文献和实验7 DNA 聚合酶以及末端转移酶。为满足工作需要,还开发有 Klenow DNA 聚合酶,耐热 DNA 聚合酶以及反转录酶。除限制修饰酶和聚合酶以外,基因操作中还用到很多重要的酶,包括:连接酶、T4 多核苷酸激酶、碱性磷酸酶、核酸酶、琼脂糖酶、蛋白酶、溶菌酶以及一些 DNA 结合蛋白。限制性核酸内切:能在特异位点(酶切位点)上催化双链DNA分子的断裂,产生相应的限制性DNA片段。 存在于细菌体内。 切割不同来源的DNA分子将产生特征性限制性酶切图谱,具有重大应用价值(“分子手术
佚名 DNA重组技术中对核酸的“精雕细刻”主要用酶作为工具。分子生物学研究过程中发现的酶,许多都用作工具,表20-列出最常用的几种工具酶。限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)在重组DNA技术中有重要地位,在此较详细介绍。 一、限制性核酸内切酶的概念 核酸酶可分为两类:核酸外切酶(exonuclease)是从核酸
Post-translational modification by SUMO is now recognized as an important regulatory method employed by the cell to reversibly modulate the activity, stability, or localization of intracellular proteins. A dedicated enzymatic machinery
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