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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输、4℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
Animal Cell Lysis Solution(B)
- 库存:
894
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")动物细胞裂解液B(变性)厂商,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应动物细胞裂解液B(变性)厂商,产品信息:
类别:蛋白质研究
英文名:Animal Cell Lysis Solution(B)
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| 动物细胞裂解液B(变性) | BTN80807B | 100mL |
规格:100mL
品牌:百奥莱博
编号:BTN80807B
产地:国产|进口
英文名:Animal Cell Lysis Solution(B)
本产品含有多种细胞裂解成分和蛋白酶抑制成分,可以在非变性或变性条件下迅速裂解组织或培养细胞,使之释放出细胞内蛋白,用于后续实验。
产品特点:
1.快速裂解,多种裂解成分经过精心优化,能快速使细胞裂解。
2. 非变性(BTN80807A)产品能最大程度地保留蛋白天然结构和功能,主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀,还可以用于蛋白活性检测(信号传递研究和酶动力学检测)和Western Blot等各种后续实验。
3.变性(BTN80807B)裂解细胞的效率更高,主要用于对抗原空间构型不敏感的免疫共沉淀实验,还可以用于Western Blotting。
4.适用于培养细胞(包括悬浮细胞)和新鲜组织。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
注意事项:
1. 如果在本产品中额外再加入终浓度为1×的、新鲜配制的蛋白酶抑制剂复合物,可以更有效地抑制蛋白酶活性,防止蛋白降解。
2. 如果用于信号传递研究,最好在本产品中加入终浓度为1×的、新鲜配制的磷酸酶抑制剂复合物。
3. 整个裂解步骤都要在冰浴或4℃操作。本产品和PBS 均需预先冷却。
4. 本产品所含有较高浓度的去垢剂会对Bradford蛋白浓度测定有较大影响,因此只能使用BCA法测定蛋白浓度。
使用方法:
一:处理贴壁的培养细胞
1. 去除贴壁细胞培养液,用冰浴预冷的PBS 洗两遍,去尽残留的PBS。
2. 将培养板放置在冰上待用。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品(或100mm 贴壁细胞加1mL 本产品)的比例向培养板中加入适量的本产品(按此比例裂解得到的裂解物的蛋白浓度约在5-10mg/mL 之间)。
注意:裂解效率跟细胞数量和本产品用量的比例密切相关。一般情况下6孔板的单孔(1~2×106细胞)需要0.1~0.2mL本产品;25 cm2培养瓶(3~6×106细胞)需要0.3~0.6mL;75 cm2培养瓶(1~2×107细胞)需要1~2mL。对于特别大或特别小的细胞,需要用户摸索最佳用量。
4. 冰上放置10-30分钟(最佳时间跟细胞系相关),其间偶尔轻轻摇晃或用枪头轻轻吹打。
5. 将细胞培养板倾斜使上清液汇集在一端,并将其全部转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。
6. 15000×g,4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中,放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,最好新鲜使用。
7. 用前最好先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。
二:处理悬浮细胞
1. 400×g,4℃离心10分钟收集悬浮细胞,弃上清。
2. 用等体积的预冷PBS 洗涤细胞沉淀两遍,步骤同第一步。
3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品的比例加入本产品,充分悬浮细胞。
4. 冰上放置15分钟裂解细胞,期间偶尔轻柔震荡。
5. 15000×g,4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。为避免吸取到细胞沉淀,最好留20-40μL液体不取。
6. 将上清液放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,最好新鲜使用。
7. 使用前最好先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。
三:处理组织块
1. 称量组织块,用毛玻片或玻璃匀浆器研磨或匀浆,用5-10倍体积的、预冷的PBS洗两次(包括冲洗器材)。
2. 将匀浆物转移到离心管中,1500g、4℃离心5分钟后弃上清。
3. 按每50mg 组织加入0.2mL 本产品的比例加入预冷的本产品,吹打混匀,放置冰上。
4. 每隔5分钟振荡器轻柔振荡一次,共4次。
5. 15000×g、4℃离心10分钟,将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中,放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意:如果用于免疫沉淀,最好新鲜使用。
6. 使用前最好先测定上清液的蛋白浓度,然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。
动物细胞裂解液B(变性)厂商专业优质供应商:北京百奥莱博科技有限公司
关键词:变性,Animal Cell Lysis Solution(B),动物细胞裂解液B,动物细胞裂解液B(变性),BTN80807B
动物细胞裂解液B(变性)等试剂产品仅用于科研实验使用,拥有一流的技术指导及完善的售后服务体系,来保证我们产品的使用效果,欢迎广大科研学者来电咨询、选购。
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| 编号 | 类别 | 名称 |
| BTN140218 | 克隆与表达 | 大肠杆菌DB3.1化学感受态细胞 |
| BTN130897 | 其他培养基 | YPDG液体培养基 |
| BTN130917 | 核酸扩增(PCR) | dCTP溶液(100mM) |
| BTN60408 | 其他生化试剂 | 通用洗柱液 |
| BTN91107 | 核酸扩增(PCR) | SP6体外转录试剂盒 |
| BTN70607 | 其他生化试剂 | Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH8.0)(不含RNase) |
| BTN130624 | 工具酶 | 9°N DNA连接酶 |
| BTN100302 | 蛋白质研究 | 包涵体蛋白溶解及复性套装 |
| BTN81201 | 克隆与表达 | 酵母电转感受态细胞制备液 |
| BTN130989 | DNA纯化 | 白细胞裂解液 |
| BTN81226 | 蛋白质研究 | Tricine-SDS PAGE阴极电泳液(干粉) |
| BTN120654D | 核酸电泳和回收 | Southern DNA Marker DL2000(DIG标记) |
| BTN140436 | 蛋白质研究 | 非蛋白型Western封堵液 |
| BTN100816 | 核酸电泳和回收 | 碱性胶电泳液 |
| BTN120708 | 工具酶 | 凝血酶 |
| BTN140384 | 克隆与表达 | 农杆菌GV3101化学感受态细胞 |
| BTN130934 | DNA纯化 | 柱式石蜡包埋组织DNA提取试剂盒 |
| BTN60906 | 核酸扩增(PCR) | cDNA第一链合成试剂盒(逆转录试剂盒)(RT试剂盒) |
| BTN131182 | 工具酶 | Sulfolobus DNA聚合酶IV |
| BTN140105 | 其他细胞生物学试剂 | Zamboni固定液 |
| BTN60904 | 核酸电泳和回收 | 一站式RNA电泳套装 |
| BTN131278 | 其他细胞生物学试剂 | 戊二醛磷酸缓冲固定液 |
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文献和实验比活性的探针经短时间的曝 光就可看到。 b.用探针检测PCR 扩增产物的另一方法如下:克隆的靶序列经不对称PCR 扩增,合 成一单链探针,在5'末端标记。其中一个引物的量大大超过另一引物,主要产生单链 产物。单链探针形成之后,它能与待测的变性PCR 扩增DNA 退火。在退火反应中,我们 建议用过量的靶序列,使得所有的探针与靶DNA 结合。使用该方法已得到满意的结 果。需要注意的是,当野生型单链DNA 探针与突变的DNA 链退火互补时,该方法导致形 成单个碱基错配的异源双螺旋链
关于论坛中所有Native PAGE/非变性电泳及蛋白回收的经典总结
5倍体积的浸提液,4 ℃过夜,期间振摇3~4次。5. 第二天,4 ℃,10000 r/m离心10 min,留取上清。6. 使用透析袋,在相应的缓冲液中,4 ℃透析24—48小时7. 进行SDS-PAGE电泳鉴定和蛋白含量测定。注意事项:(切记!)回收前蛋白若为包涵体形式,回收后透析时透析液应加相应变性剂,以免沉淀。将胶在1mM DTT,20mM MgCl2种浸泡4h或过夜,将目的条带切下,置透析带中,电泳,然后收集上清液即为目的蛋白。Native PAGENative PAGE 分离碱性蛋白,要用
提取总RNA 和基因组DNA 为一次制备。本试剂盒所有试剂在室温贮存2 年不影响使用效果。Buffer R-A:细胞裂解液,室温密闭贮存。Buffer R-B:蛋白质变性剂,室温密闭贮。Buffer R-C:分相溶液,室温密闭贮存。Buffer R-D:分相溶液,室温密闭贮存。Buffer R-E:RNA 释放溶液,使用前检查溶液是否有沉淀析出,如有沉淀请于37℃温育溶解后再使用。室温密闭贮存。RNase-free Water:RNA 溶解溶液,室温密闭贮存。Buffer TE:10mM Tris
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