动物细胞裂解液B(变性)厂商

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应动物细胞裂解液B(变性)厂商，产品信息：

类别：蛋白质研究

英文名：Animal Cell Lysis Solution(B)

产品名	产品编号	包装规格
动物细胞裂解液B(变性)	BTN80807B	100mL

规格：100mL

品牌：百奥莱博

编号：BTN80807B

产地：国产|进口

英文名：Animal Cell Lysis Solution(B)

本产品含有多种细胞裂解成分和蛋白酶抑制成分，可以在非变性或变性条件下迅速裂解组织或培养细胞，使之释放出细胞内蛋白，用于后续实验。

 

产品特点：

1.快速裂解，多种裂解成分经过精心优化，能快速使细胞裂解。

2. 非变性(BTN80807A)产品能最大程度地保留蛋白天然结构和功能，主要用于免疫沉淀和免疫共沉淀，还可以用于蛋白活性检测(信号传递研究和酶动力学检测)和Western Blot等各种后续实验。

3.变性(BTN80807B)裂解细胞的效率更高，主要用于对抗原空间构型不敏感的免疫共沉淀实验，还可以用于Western Blotting。

4.适用于培养细胞(包括悬浮细胞)和新鲜组织。

 

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。

 

注意事项：

1. 如果在本产品中额外再加入终浓度为1×的、新鲜配制的蛋白酶抑制剂复合物，可以更有效地抑制蛋白酶活性，防止蛋白降解。

2. 如果用于信号传递研究，最好在本产品中加入终浓度为1×的、新鲜配制的磷酸酶抑制剂复合物。

3. 整个裂解步骤都要在冰浴或4℃操作。本产品和PBS 均需预先冷却。

4. 本产品所含有较高浓度的去垢剂会对Bradford蛋白浓度测定有较大影响，因此只能使用BCA法测定蛋白浓度。

 

使用方法：

 

一：处理贴壁的培养细胞

1. 去除贴壁细胞培养液，用冰浴预冷的PBS 洗两遍，去尽残留的PBS。

2. 将培养板放置在冰上待用。

3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品(或100mm 贴壁细胞加1mL 本产品)的比例向培养板中加入适量的本产品(按此比例裂解得到的裂解物的蛋白浓度约在5-10mg/mL 之间)。

 注意：裂解效率跟细胞数量和本产品用量的比例密切相关。一般情况下6孔板的单孔(1～2×106细胞)需要0.1～0.2mL本产品；25 cm2培养瓶(3～6×106细胞)需要0.3~0.6mL；75 cm2培养瓶(1～2×107细胞)需要1～2mL。对于特别大或特别小的细胞，需要用户摸索最佳用量。

4. 冰上放置10-30分钟(最佳时间跟细胞系相关)，其间偶尔轻轻摇晃或用枪头轻轻吹打。

5. 将细胞培养板倾斜使上清液汇集在一端，并将其全部转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。

6. 15000×g，4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中，放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，最好新鲜使用。

7. 用前最好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

 

二：处理悬浮细胞

1. 400×g，4℃离心10分钟收集悬浮细胞，弃上清。

2. 用等体积的预冷PBS 洗涤细胞沉淀两遍，步骤同第一步。

3. 按每106个细胞加入0.1mL 本产品的比例加入本产品，充分悬浮细胞。

4. 冰上放置15分钟裂解细胞，期间偶尔轻柔震荡。

5. 15000×g，4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中。为避免吸取到细胞沉淀，最好留20-40μL液体不取。

6. 将上清液放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，最好新鲜使用。

7. 使用前最好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

 

三：处理组织块

1. 称量组织块，用毛玻片或玻璃匀浆器研磨或匀浆，用5-10倍体积的、预冷的PBS洗两次(包括冲洗器材)。

2. 将匀浆物转移到离心管中，1500g、4℃离心5分钟后弃上清。

3. 按每50mg 组织加入0.2mL 本产品的比例加入预冷的本产品，吹打混匀，放置冰上。

4. 每隔5分钟振荡器轻柔振荡一次，共4次。

5. 15000×g、4℃离心10分钟，将上清转移到一个新的1.5mL塑料离心管中，放置在冰上待用或放-80℃长期保存。注意：如果用于免疫沉淀，最好新鲜使用。

6. 使用前最好先测定上清液的蛋白浓度，然后再进行后续的电泳、Western或免疫沉淀操作。

动物细胞裂解液B(变性)厂商专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：变性,Animal Cell Lysis Solution(B),动物细胞裂解液B,动物细胞裂解液B(变性),BTN80807B

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