WE0102型2×Taq MasterMix(含染料)哪里卖

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖WE0102型2×Taq MasterMix(含染料)哪里卖在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：WE0102型2×Taq MasterMix(含染料)哪里卖
英文名：2×Taq MasterMix(With Dye)
规格：1ml|5ml|25ml
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
  Taq MasterMix是由Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，浓度为2×。预配好的PCR混合液可根据使用量的多少调节扩增产物的特异性和得率，使操作更加简单快捷，并可最大限度地减少人为误差和污染。独创的MasterMix配方使扩增产物得率高，重复性强，稳定性好。本产品已加入染料(蓝色)，反应结束后可直接进行电泳检测，无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。主要适用于PCR法扩增DNA、DNA序列测定等实验。

产品组成：

 

组份	1ml	5ml	25ml
2×Taq MasterMix(With Dye)	1ml	5×1ml	5×5ml
ddH2O	1ml	5×1ml	5×5ml

注意：2×Taq MasterMix含有Taq DNA Polymerase, 3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。

质量控制：
1、经检验无外源核酸酶活性；
2、PCR方法检测无宿主残余DNA；
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系：
 

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×Taq MasterMix(With Dye)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件：
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2 min
变性	94℃	30 s	25-35 个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	30 s
终延伸	72℃	2 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。


储存条件：-20℃，避免反复冻融。

更多有关WE0102型2×Taq MasterMix(含染料)哪里卖的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
标准鲁哥氏染色液(Lugol"s碘液,1%)   100ml
PY08-008  SS琼脂平板 9CM  10皿/盒，用于沙门氏菌和志贺氏菌的选择性分离培养
四丁基*化铵 BTA 1643-19-2
BL0766 AMV Reverse Transcriptase  反转录酶
110-15-6 Succinic acid  琥珀酸
双链λ噬菌体DNA载体 100ug
D-葡萄糖-6-磷酸三*盐 Gum tragacanth powder 53411-70-4
ARB12680 大鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)尿液中含量检测 Rat bladder tumor antigen,bta ELISA KIT
D0102 脱纤维新生牛血(无菌 袋装)
ARB12002 大鼠S-100 蛋白定量分析 Rat soluble protein-100，s-100 ELISA KIT
ARB13653 兔子瘦素(LEP)酶联免疫定量检测 Rabbit leptin,lep ELISA KIT
146-68-9 INT 碘硝基*化四氮唑蓝
RBP01 兔脑粉 50g
10323-20-3 D-阿拉伯糖 D-Arabinose
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·植物蛋白提取试剂盒
编号：WE0264
英文名称：Plant Protein Extraction Kit
规格：25次|100次
  本试剂盒可从新鲜、冰冻或干燥植物组织中提取可溶性植物蛋白。适用于多种植物及植物的不同部位(如根、茎、叶、花、种子等)蛋白提取，高效提取植物蛋白，比传统的方法提取蛋白产量大、活性高、速度快。所提蛋白可直接进行蛋白电泳分析、免疫沉淀、Western Blot、蛋白活性测定及蛋白纯化等实验。所提蛋白可用BCA蛋白定量试剂盒(货号：WE0276)进行浓度的测定。

试剂盒组成：

组份	25次	100次
Plant Protein Extraction Reagent	25ml	100ml
Protease Inhibitor Cocktail	250μl	1ml

保存条件：Protease Inhibitor Cocktail：-20℃，其它组分：室温

注意事项：
1、本品含有1mM EDTA。
2、为防止蛋白降解，所有的操作尽量在冰上进行。
3、使用本产品提取蛋白后，可采用BCA法进行蛋白定量。
4、为了获得实验最佳效果，请根据实验调整最佳使用量。

使用方法：
1、请在蛋白抽提前取出实验所需Plant Protein Extraction Reagent进行预冷。
2、称量试验植物组织的重量。按照1 g组织加入5ml Plant Protein Extraction Reagent(在蛋白抽提前按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail)。
注意：
1)匀浆前将大块的植物组织剪成小块，机械匀浆器匀浆10 s，间歇10 s，反复三次进行裂解，根据组织样本不同选用适合的匀浆方式。
2)裂解液的使用量依据植物不同部位进行调整，若需要浓缩的蛋白提取物，可适当减少Plant Protein Extraction Reagent使用量。
3、匀浆后冰上孵育20-30分钟。
4、4℃ ～13400×g，离心20分钟。
5、收集上清中的可溶性蛋白，进行下一步的纯化或下游分析。

储存条件：-20℃


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·尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)
编号：WE0115
英文名称：Uracil-N-Glycosylase(UNG)
规格：200U|1000U
  尿嘧啶-N-糖基化酶(UNG酶)也称为尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG酶)，通过大肠杆菌表达纯化的重组酶，该蛋白分子量为25kD，可催化含尿嘧啶的单链和双链DNA释放游离尿嘧啶，并且对RNA无活性，主要应用于防止PCR扩增产物的污染。该酶作用机理为：在PCR反应中以dUTP代替dTTP，扩增产物片段中的T全部被U取代，形成了含dU碱基的PCR扩增产物。UNG酶能选择性断裂单链和双链DNA中U碱基的糖苷键，降解反应体系中含U的DNA，有效消除PCR产物的残留污染，大大降低扩增产物污染导致的假阳性，从而保证扩增的特异性和准确性。

活性定义：37℃，60分钟内催化1 nmol尿嘧啶，从含尿嘧啶的DNA上释放所需要的酶量定义为一个单位。

质量控制：SDS-PAGE检测纯度大于95%；经检测无核酸内、外切酶活性。

注意事项：
1、UNG长期储存(非频繁使用; 每月少于3次)请置于-70℃保存，每天或每周使用请于-20℃保存。尽量避免反复冻融，大包装建议分装使用。
2、UNG可以在PCR反应前先清除不慎污染的U-DNA分子，一个实验室必须在所有的PCR反应中使用dUTP作为dNTP之一，使所有扩增产物都成为U-DNA。如单使用于某个检测，T-DNA仍会积累，此抗污染系统也难以起到完全的作用。
3、UNG/dUTP系统是PCR试剂内部的一种防污染措施，为了防止PCR产物的污染，尤其是在临检实验室中反复放大同一片段时，必须严格规范实验室的划分和操作。

使用方法：
以下举例为Taq反应体系防止PCR产物污染的使用方法，实际应用可应根据具体实验进行改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
Taq PCR Buffer，10×	5μl	1×
dATP，10 mM	1μl	200μM
dGTP，10 mM	1μl	200μM
dCTP，10 mM	1μl	200μM
dTTP，10 mM	0.5μl	100μM
dUTP，10 mM	1μl	200μM
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	Xμl
Taq DNA Polymerase，5 U/μl	0.5μl	2.5 U/50μl
Uracil-N-Glycosylase，1 U/μl	0.2μl	0.2 U/50μl
ddH2O	up to 50μl

2、反应条件

步骤	温度	时间	循环数
UNG消化	37℃-50℃	5-10 min
预变性	95℃	10 min
变性	94℃	30 s	30-40个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	1 kb/min
终延伸	72℃	5 min

注意：通常将Taq酶与UNG酶按一定的比例加入PCR反应体系中，先于37℃-50℃范围内消化5-10分钟，然后95℃ 10分钟灭活，(同时这一步也达到预变性和热启动的效果)，随后进行PCR扩增。UNG酶的反应可以在37℃-50℃，5-10分钟的范围内变化，可以根据实验的需要进行调整。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

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