WE0107型Pfu DNA Polymerase库存

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")WE0107型Pfu DNA Polymerase库存，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：WE0107型Pfu DNA Polymerase库存
英文名：Pfu DNA Polymerase
品牌：百奥莱博
规格：500U
产地：国产|进口
  Pfu DNA Polymerase是通过大肠杆菌表达纯化的重组酶，具有5"-3"DNA聚合酶活性和5"-3"外切核酸酶活性的同时具有3"-5"外切核酸酶活性，因此在DNA扩增过程中具有纠错能力，是目前发现的错配率最低的耐高温DNA Polymerase。该酶与Taq DNA Polymerase相比具有更好的热稳定性，对于高GC含量模板，提高变性温度对它活性无影响。使用本产品扩增得到的PCR产物的3"端不带有“A”碱基，不能直接用于T/A克隆，如需进行T/A克隆则需要在其末端添加“A”或用平末端载体进行克隆。本产品适用于基因克隆、基因定点突变、SNP和末端补平等实验。

产品组成：

 

组份	500U
Pfu DNA Polymerase, 5 U/μl	100μl
10×PCR Buffer	1.8ml

注意：本产品的10×PCR Buffer中含有15 mM*离子。

活性定义：
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。

质量控制：
1、经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；
2、经检测无外源核酸酶活性；
3、PCR方法检测无宿主残余DNA；
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；
5、室温存放一个月，无明显活性改变。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
10×PCR Buffer	5μl	1×
dNTP Mix，10 mM each	1μl	200μM each
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
Pfu DNA Polymerase, 5 U/μl	0.5μl	2.5 U/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)用Pfu酶扩增时，引物的纯度要求较高，引物长度大于18个碱基，引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
2)Pfu酶3"-5"外切酶活性可能降解引物，所以应先加dNTP后，再加Pfu酶到反应体系中，并立即进行PCR反应。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2 min
变性	94℃	30 s	25-35 个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	60 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)Pfu酶的热稳定性比Taq酶好，对于GC含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃，对Pfu酶的活性无影响。
2)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
3)Pfu酶具有3"-5"外切酶活性，所以Pfu酶扩增时延伸速度远比Taq酶低，延伸时间根据所扩增片段大小设定，本产品的扩增延伸速率为1 kb/min。
4)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
5)本产品具有3"-5"外切核酸酶活性，PCR产物3’端不带“A”,不能直接用于T/A克隆，如需进行T/A克隆则需要在其末端添加“A”或用平末端载体进行克隆。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

我公司的WE0107型Pfu DNA Polymerase库存，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·蛋白酶K
编号：WE0212
英文名称：Proteinase K
规格：100mg
  蛋白酶K是一种以丝*酸为活性中心的枯草类蛋白酶，具有广泛的底物特异性，特别优先分解与疏水性*基酸、含硫*基酸、芳香族*基酸C末端邻接的酯键和肽键。可在多种不同盐、变性剂、去污剂、pH值和温度条件下进行分解蛋白作用。在提取DNA和RNA的缓冲液中具有很高的活性，主要用于DNA、RNA制备过程中蛋白的消化。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入5ml的蛋白酶K 储存液使其溶解,溶解后的蛋白酶K 浓度为20mg/ml。
2、孵育温度为25℃～65℃，理想孵育温度为58℃，孵育时间为15分钟至48小时；理想孵育时间为2小时。
3、配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。-20℃长期保存。

储存条件：室温(15～30℃)


WE0107型Pfu DNA Polymerase库存关键词：WE0107,Pfu DNA Polymerase

ZCSXQ02 鼠血清 500ml
PY04-075  *霉素溶液  10mg/支×10支  "  每支添加于100ml孟加拉红琼脂培养基基础中。
19-119kDa预先染色分子量MARK U 5′-P
甲基环戊烯醇酮 Phosphoglucose isomerase 765-70-8
9039-53-6 尿激酶 Urolinase
Weil髓鞘染色液   4×50ml
三(2-羧乙基)膦盐*(代"酸")盐 Glutathione Reductase from baker"s yeast 51805-45-9
BTN111107 DNA电泳分子量标准(2) DNAMETER(2)
ARB14018 绵羊瘦素(leptIn)elisa检测说明书 Sheep leptin ELISA KIT
NF-213 羊抗人C5血清
ARB11500 人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(AFABP)酶联免疫定量检测 Human adipocyte fatty acid-binding protein,a-fabp ELISA KIT
DNaseⅠ(RNase free)      10KU
ARB11321 人胆固醇(C)Elisa分析 Human cholesterol ELISA KIT
"
ARB12878 小鼠丙二醛(MDA)检测服务 Mouse malondialchehyche,mda ELISA KIT
ARB11984 大鼠GATA结合蛋白4(GATA4)ELISA代测服务 Rat gata binding protein 4,gata4 ELISA KIT
606-68-8 NADH Na2 还原型辅酶Ⅰ二*
BOC-L-色*酸 Amastatin hydrochloride hydrate 13139-14-5
苹果多酚 Pyrazole 85251-63-4
考马斯亮蓝R250 L-Lysine HCL 6104-59-2
F020215 兔抗山羊IgG抗体 Rabbit Anti-Goat IgG
WE0107型Pfu DNA Polymerase库存关键词：WE0107,Pfu DNA Polymerase

9001-12-1 CollagenaseⅠ  胶原酶Ⅰ
软骨染色液(甲**(代"胺")蓝法)   100ml
632-99-5 碱性品红 Magenta Red
CYB164051 兔抗FITC-HRP
乙醇脱*酶 Streptokinase 9031-72-5
ARB11794 人碱性成纤维细胞生长因子9(bFGF-9)ELISA代测服务 Human basic fibroblast growth factor 9,bfgf-9 ELISA KIT
53597-25-4 Protamine sulfate sale 硫*(代"酸")鱼精蛋白
ARB14131 人磷酸化磷酸肌醇3激酶(P-PI3K)Elisa方法检测 
F050303 人IgM抗体 Human IgM
缩二脲 3-O-Methylglucose 108-19-0
草酸铵结晶紫染色液   100ml
ARB13996 猪瘟病毒抗体(CSFV-Ab)ELISA代测服务 Porcine classical Swine fever virus antibody ELISA KIT
BL0607 琼脂糖凝胶2B Sepharose 2B
ARB11174 人单核细胞增多性李斯特菌素O(LLO)Elisa方法检测 Human listeriolysin o,llo ELISA KIT
HC0229 加样槽(可高压灭菌)
ARB10086 人CXC趋化因子配体16(CXCL16)代做ELISA实验 Human cxc-chemokine ligand 16,cxcl16 ELISA KIT
ARB10893 人抗唾液腺导管组织抗体(SDA)检测服务 Human salivary duct autoantibody,sda ELISA KIT
002001 无菌脱纤维马血
F030208 HRP标记山羊抗小鼠IgG1抗体 Goat Anti-Mouse IgG1*HRP

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